본 연구는 삼채의 조추출물과 유기용매 분획물들을 가지고 DPPH 라디칼 소거 활성에 의한 항산화 활성 검색 결과 디클로로메탄($CH_2Cl_2$) 분획물과 에틸아세테이트(EtOAc) 분획물에서 라디칼 소거 활성을 나타냈으며, xanthine oxidase 억제 효과는 DPPH 활성 라디칼 소거 활성에서 제일 뛰어났던 에틸아세테이트 분획물에서, superoxide 소거 활성은 헥산(n-hexane) 분획물에서 활성이 나타났다. RAW 264.7 세포에 lipopolysaccharide로 자극을 주고 삼채 주정 추출물 및 유기용매 분획물들을 처리하여 확인해본 결과, 조추출물과 물 분획물을 제외한 나머지 유기용매 분획물에서 염증유발 인자(NO, $PGE_2$, iNOS, COX-2, IL-6 및 $IL-1{\beta}$) 생성억제 효과가 나타났으며, 그중 디클로로메탄 분획물과 에틸아세테이트 분획물에서 억제 효과를 확인할 수 있었다. 본 실험 결과 삼채 조추출물과 유기용매 분획물에서 항산화 효과 및 염증 유발 인자의 생성 억제 효과가 나타났으며, 이러한 결과 삼채에서 유효성분 추출을 통한 항산화, 항염증 물질의 연구 또는 예방하거나 치료할 수 있는 염증 억제 성분의 분리 및 그 작용기전 연구에 중요한 기초 자료가 될 것이라 생각한다.
본 연구는 삼채의 조추출물과 유기용매 분획물들을 가지고 DPPH 라디칼 소거 활성에 의한 항산화 활성 검색 결과 디클로로메탄($CH_2Cl_2$) 분획물과 에틸아세테이트(EtOAc) 분획물에서 라디칼 소거 활성을 나타냈으며, xanthine oxidase 억제 효과는 DPPH 활성 라디칼 소거 활성에서 제일 뛰어났던 에틸아세테이트 분획물에서, superoxide 소거 활성은 헥산(n-hexane) 분획물에서 활성이 나타났다. RAW 264.7 세포에 lipopolysaccharide로 자극을 주고 삼채 주정 추출물 및 유기용매 분획물들을 처리하여 확인해본 결과, 조추출물과 물 분획물을 제외한 나머지 유기용매 분획물에서 염증유발 인자(NO, $PGE_2$, iNOS, COX-2, IL-6 및 $IL-1{\beta}$) 생성억제 효과가 나타났으며, 그중 디클로로메탄 분획물과 에틸아세테이트 분획물에서 억제 효과를 확인할 수 있었다. 본 실험 결과 삼채 조추출물과 유기용매 분획물에서 항산화 효과 및 염증 유발 인자의 생성 억제 효과가 나타났으며, 이러한 결과 삼채에서 유효성분 추출을 통한 항산화, 항염증 물질의 연구 또는 예방하거나 치료할 수 있는 염증 억제 성분의 분리 및 그 작용기전 연구에 중요한 기초 자료가 될 것이라 생각한다.
This study describes the preliminary evaluation of antioxidant and anti-inflammatory activities of Allium hookeri. A. hookeri was extracted using crude extract and then fractionated sequentially with n-hexane, $CH_2Cl_2$, EtOAc, and n-BuOH. To screen for antioxidant and anti-inflammatory ...
This study describes the preliminary evaluation of antioxidant and anti-inflammatory activities of Allium hookeri. A. hookeri was extracted using crude extract and then fractionated sequentially with n-hexane, $CH_2Cl_2$, EtOAc, and n-BuOH. To screen for antioxidant and anti-inflammatory agents effectively, we first examined the inhibitory effect of A. hookeri extracts on production of oxidant stresses (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, xanthine oxidase, and superoxide). In addition, we examined the inhibitory effects of A. hookeri on production of pro-inflammatory factors (nitric oxide, prostaglandin $E_2$, inducible nitric oxide synthase, and cyclooxygenase-2) in murine macrophage RAW 264.7 cells stimulated with lipopolysaccharide. Of the sequential solvent fractions of A. hookeri, EtOAc fractions showed decreased production of oxidant stresses, and $CH_2Cl_2$ and EtOAc fractions of A. hookeri inhibited production of pro-inflammatory factors. EtOAc fraction inhibited production of pro-inflammatory cytokines (interleukin-6 and -$1{\beta}$). These results suggest that A. hookeri has significant effects on oxidant stresses and pro-inflammatory factors and is a possible antioxidant and anti-inflammatory therapeutic and preventive material.
This study describes the preliminary evaluation of antioxidant and anti-inflammatory activities of Allium hookeri. A. hookeri was extracted using crude extract and then fractionated sequentially with n-hexane, $CH_2Cl_2$, EtOAc, and n-BuOH. To screen for antioxidant and anti-inflammatory agents effectively, we first examined the inhibitory effect of A. hookeri extracts on production of oxidant stresses (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl, xanthine oxidase, and superoxide). In addition, we examined the inhibitory effects of A. hookeri on production of pro-inflammatory factors (nitric oxide, prostaglandin $E_2$, inducible nitric oxide synthase, and cyclooxygenase-2) in murine macrophage RAW 264.7 cells stimulated with lipopolysaccharide. Of the sequential solvent fractions of A. hookeri, EtOAc fractions showed decreased production of oxidant stresses, and $CH_2Cl_2$ and EtOAc fractions of A. hookeri inhibited production of pro-inflammatory factors. EtOAc fraction inhibited production of pro-inflammatory cytokines (interleukin-6 and -$1{\beta}$). These results suggest that A. hookeri has significant effects on oxidant stresses and pro-inflammatory factors and is a possible antioxidant and anti-inflammatory therapeutic and preventive material.
), 에틸아세테이트(EtOAc) 그리고 부탄올(n-BuOH)을 사용하여 용매의 극성을 이용한 순차적 추출법을 사용하였다. 즉 건조된 분말 시료에 70% 주정 에탄올로 2회 반복추출한 후 여과하여 얻어진 추출액을 감압 농축하여 동결건조기로 완전히 건조시켜 조추출물을 제작하였고 건조된 조추출물에 10배량의 증류수와 동량의 헥산을 첨가하여 분획한 후 감압 농축하여 헥산 분획물을 얻었으며, 같은 방법으로 디클로로메탄, 에틸아세테이트, 부탄올 그리고 물 층을 분획하여 각각의 순차 분획물을 얻었고 모든 과정은 2회 반복 시행하였다.
대상 데이터
충청북도에서 재배되고 있는 삼채(Allium hookeri) 원물을 2015년 7월에 구입하여 사용하였고, 확보한 시료는 증류수로 2~3회 수세한 후 물기를 제거하여 열풍건조 한 다음마쇄기로 갈아 미세말로 하여 추출용 시료로 사용하였다.
데이터처리
모든 실험은 3회 이상 반복으로 이루어졌으며, 실험 결과는 각 항목에 따라 평균±표준편차(SD)를 구하여 신뢰수준95%(P<0.05)에서 통계적 유의차를 평가하였다.
성능/효과
DPPH는 안정한 유리기로 cysteine, glutathione과 같은 황함유 아미노산과 ascorbic acid, aromatic amine(ρ-phenylenediamine, ρ-aminophenol) 등에 의해 환원되어 탈색되므로 항산화 물질의 항산화능 측정에 많이 이용되고 있다. 삼채의 조추출물과 유기용매 분획물의 실험 결과 큰 라디칼 소거 활성을 보이지는 않았으나, 디클로로메탄 분획물과 에틸아세테이트 분획물에서 라디칼 소거 활성을 나타내는 것을 확인하였으며, 디클로로메탄과 에틸아세테이트 분획물의 IC50 값은 377.4 μg/mL와 202.0 μg/mL로 각각 나타났다(Table 1).
생성된 NO 양을 Griess 시약을 이용하여 세포배양액 중에 존재하는 NO2-의 형태로 측정하였다. 실험 결과 삼채 조추출물과 물 분획물을 제외한 유기용매 분획물에서 NO 생성 억제 효과를 보였으며, 그중 디클로로메탄 분획물과 에틸아세테이트 분획물에서 대조군인 LPS단독처리군에 비해 NO 생성 억제 효과를 관찰할 수 있었고 가장 활성이 높은 디클로로메탄 분획물의 경우 농도 의존적으로 NO 생성 억제 활성이 있는 것을 확인할 수 있었다(Fig.1).
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