레조시놀다이펜틸에터를 함유한 O/W 나노에멀젼의 경피흡수 및 미백 효능 효과 연구 Studies on skin whitening efficacy and skin permeation using O/W Nanoemulsion system with Resorcinol Dipentyl Ether원문보기
본 연구에서는 피부미백제로 개발된 레조시놀다이펜틸에터[1,3-di(pentyloxyl)benzene]를 함유하여 조성 상전이 방법(Phase Inversion Composition, PIC)방법으로 제조된 RS-Nanoemulsion의 경피 흡수 및 피부 미백 효능효과에 대해서 연구하였다. 지표성분인 1,3-di(pentyloxyl)benzene를 mineral oil에 용해한 대조시료와 일반 O/W유화법으로 제조된 RS-emulsion시료를 비교 대상으로 인체 피부에 대한 경피 흡수시험을 수행하였다. 시험결과, RS-Nanoemulsion 시료는 지표성분인 1,3-di(pentyloxyl) benzene를 mineral oil에 용해한 대조시료와 RS-emulsion 시료에 비해 통계적으로 유의하게 높은 지표성분 경피 투과율을 나타내었다. RS-Nanoemulsion을 O/W크림에 함유하여 만든 크림 제형의 피부임상시험을 통하여 그 유효성을 평가하고자 하였으며, 상기 시험결과 시험제품과 대조제품 모두 8주간의 시험기간에 특별한 이상반응이 관찰되지 않아 안전한 제품으로 확인되었고, 사용 8주 후 평가에서 대조제품 사용에 비해 시험제품이 통계적으로 유의한 수준으로 피부미백에 도움을 주는 효과가 있는 것을 확인하였다.
본 연구에서는 피부미백제로 개발된 레조시놀다이펜틸에터[1,3-di(pentyloxyl)benzene]를 함유하여 조성 상전이 방법(Phase Inversion Composition, PIC)방법으로 제조된 RS-Nanoemulsion의 경피 흡수 및 피부 미백 효능효과에 대해서 연구하였다. 지표성분인 1,3-di(pentyloxyl)benzene를 mineral oil에 용해한 대조시료와 일반 O/W유화법으로 제조된 RS-emulsion시료를 비교 대상으로 인체 피부에 대한 경피 흡수시험을 수행하였다. 시험결과, RS-Nanoemulsion 시료는 지표성분인 1,3-di(pentyloxyl) benzene를 mineral oil에 용해한 대조시료와 RS-emulsion 시료에 비해 통계적으로 유의하게 높은 지표성분 경피 투과율을 나타내었다. RS-Nanoemulsion을 O/W크림에 함유하여 만든 크림 제형의 피부임상시험을 통하여 그 유효성을 평가하고자 하였으며, 상기 시험결과 시험제품과 대조제품 모두 8주간의 시험기간에 특별한 이상반응이 관찰되지 않아 안전한 제품으로 확인되었고, 사용 8주 후 평가에서 대조제품 사용에 비해 시험제품이 통계적으로 유의한 수준으로 피부미백에 도움을 주는 효과가 있는 것을 확인하였다.
In this study, we investigated the effect on the increase of In vitro skin permeation experiments and In-vivo skin whitening efficacy using a O/W nanoemulsion produced via PIC(Phase Inversion Composition) with 1,3-di(pentyloxyl)benzene. skin permeation experiments of RS-nanoemulsion formulated with ...
In this study, we investigated the effect on the increase of In vitro skin permeation experiments and In-vivo skin whitening efficacy using a O/W nanoemulsion produced via PIC(Phase Inversion Composition) with 1,3-di(pentyloxyl)benzene. skin permeation experiments of RS-nanoemulsion formulated with selected condition was evaluated compared to mineral oil containing 1,3-di(pentyloxyl)benzene and normal O/W type RS-emulsion. Compared to mineral oil with 1,3-di(pentyloxyl)benzene and RS-emulsion. RS-Nanoemulsion has a statistically significant high percutaneous absorption in terms of index substance, which is 1,3-di(pentyloxyl)benzene. In vivo test were prepared in the system of O/W cream containing RS-nanoemulsion. There was no adverse reactions in both samples. After 8 weeks, the subjects was evaluated by a dermatologist's scoring and Chromameter. In conclusion, the testing product showed statistically improvement (p<0.05) compared to the controlled product and proved its whitening efficacy.
In this study, we investigated the effect on the increase of In vitro skin permeation experiments and In-vivo skin whitening efficacy using a O/W nanoemulsion produced via PIC(Phase Inversion Composition) with 1,3-di(pentyloxyl)benzene. skin permeation experiments of RS-nanoemulsion formulated with selected condition was evaluated compared to mineral oil containing 1,3-di(pentyloxyl)benzene and normal O/W type RS-emulsion. Compared to mineral oil with 1,3-di(pentyloxyl)benzene and RS-emulsion. RS-Nanoemulsion has a statistically significant high percutaneous absorption in terms of index substance, which is 1,3-di(pentyloxyl)benzene. In vivo test were prepared in the system of O/W cream containing RS-nanoemulsion. There was no adverse reactions in both samples. After 8 weeks, the subjects was evaluated by a dermatologist's scoring and Chromameter. In conclusion, the testing product showed statistically improvement (p<0.05) compared to the controlled product and proved its whitening efficacy.
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문제 정의
본 연구는 신규 미백제인 레조시놀다이펜틸에 터을 조성상전이 유화방법을 이용하여 안정한 RS-Nanoemulsion을 제조하여, Franz cell 시험법을 통해 경피흡수 평가를 하였으며, RS-Nanoemulsion을 O/W 크림 제형에 함유하여 인공색소 침착 후 미백 효과 평가시험을 통해 유효성과 사용 안전성을 평가하고자 하였다.
제안 방법
1,3-di(pentyloxyl)benzene을 함유하여 PIC방법으로 제조된 RS-Nanoemulsion의 안정성을 8주 동안 관찰 한 결과 물리적인 외관의 변색이나 변취 현상등은 관찰되지 않았으며, 경피흡수 생체외 실험에서 지표성분인 1,3-di(pentyloxyl)benzene을 mineral oil에 용해한 대조시료와 일반 O/W 유화법으로 제조된 RS-emulsion시료를 비교 대상으로 하여 인체 피부에 대한 경피 흡수시험을 수행하였다. 시험결과, mineral oil에 용해한 대조 시료와 RS-Nanoemulsion의 경우, Diffusion coefficient가 시험 시작부터 약 초기 1시간 경과 시에 가장 높고 이후 통계적으로 유의한 수준으로 감소하는 경향을 나타내어, 이후 10시간부터 24시간 경과 시점까지의 경피투과율은 지속적으로 감소하는 양상을 나타내었다.
Human skin 표면에 잔존하는 시료 및 기구 세척을 통해 잔존 시료를 회수한 후 그 양을 확인 하였으며, Human skin 내 흡수되어 있는 시료의 양을 확인하기 위해 시험에 사용한 skin을 세절한 후 homogenizer로 분쇄하여 50% ethanol solution로 1시간 동안 sonication을 통해 회수하고 그 양을 확인 하였다.
RS-Nanoemulsion을 O/W크림에 함유하여 만든 크림 제형을 피부 미백개선 효능평가를 위한 인체 적용 실험에 적용하였다. 평균 42세의 여성 지원자 20명을 대상으로 8주 동안 인체 적용 시험을 수행하였고, 대조군으로 placebo크림을 사용하였다.
수용부 (receptor chamber) 상부에 human skin을 올려놓은 후, 수용액를 채우고 30분간 피부를 안정화시키면서 표면을 건조시켰다. 수용부에 맞춰 시료를 도포한 후, 도포 1, 3, 6, 10, 24시간 경과 후 수용부의 수용액 전량을 각각 채취 하여 농축한 후 HPLC로 정량분석 실시하였다.
신규미백제인 1,3-di(pentyloxy)benzene을 함유하여 선정된 최적의 나노에멀젼 조건하에서 조성 상전이 유화방법으로 제조된 RS-Nanoemulsion을 각 온도에 보관하면서 안정성를 관찰하였다. 초기 형성된 입자는 약 256nm 이며 (Fig.
평균 42세의 건강한 성인 여성을 대상으로 시험부위의 최소 홍반량 판정 및 자외선 조사를 4일간 진행하였으며, 8주간 제품을 1일 2회 도포하도록 하였다. 이후 시험부위의 사진촬영과 미백개선을 평가하기 위한 기기 측정 및 안전성 평가, 설문 평가 병행하여 제품의 효과 및 안전성을 평가하였다. 시험부위의 피부 색상은 두 명의 피부과 전문의에 의해 평가 되었다.
피부 미백 효능평가 실험은 식품의약품안전처 미백 기능성 화장품의 유효성 평가를 위한 가이드라인의 규정 ‘미백 개선 효능 평가 시험 방법 및 기준’에 따라 실험을 수행하였으며, 이 실험은 인공색소 침착 후 미백 효과 평가 실험 (Efficacy evaluation on induced pigmentation)으로 피험자 수는 통계적으로 비교가 가능하기 위해 20명 이상의 유효데이터를 확보하도록 하며, 대조군을 사용 시 이중 맹검법을 원칙으로 하였다. 평균 42세의 건강한 성인 여성을 대상으로 시험부위의 최소 홍반량 판정 및 자외선 조사를 4일간 진행하였으며, 8주간 제품을 1일 2회 도포하도록 하였다. 이후 시험부위의 사진촬영과 미백개선을 평가하기 위한 기기 측정 및 안전성 평가, 설문 평가 병행하여 제품의 효과 및 안전성을 평가하였다.
피부 미백 효능평가 실험은 식품의약품안전처 미백 기능성 화장품의 유효성 평가를 위한 가이드라인의 규정 ‘미백 개선 효능 평가 시험 방법 및 기준’에 따라 실험을 수행하였으며, 이 실험은 인공색소 침착 후 미백 효과 평가 실험 (Efficacy evaluation on induced pigmentation)으로 피험자 수는 통계적으로 비교가 가능하기 위해 20명 이상의 유효데이터를 확보하도록 하며, 대조군을 사용 시 이중 맹검법을 원칙으로 하였다. 평균 42세의 건강한 성인 여성을 대상으로 시험부위의 최소 홍반량 판정 및 자외선 조사를 4일간 진행하였으며, 8주간 제품을 1일 2회 도포하도록 하였다.
대상 데이터
실험에 이용한 인간 피부 조직 (kin No. PEA0881D009 (PEA088), BIOPREDIC International, France)은 56세 여성으로부터 채취된 직경 1.6cm 크기의 원형 피부 조직을 사용 직전까지 -20℃에서 보관하였으며, 시험에 사용할 피부의 교류 전기 저항이 정상 범위인지 확인한 후 실험에 사용하였다. 피부 투과 장치 (FDC-6T, Logan, USA)를 이용하였으며, 각 시료는 농축기 (Hypervap concentrator, Interface, Korea)와 고성능액체크로마토그래피 (HPLC: Agilent 1260 Infinity HPLC system)를 이용하여 1,3-di(pentyloxy)benzene의 함량을 확인하였다.
RS-Nanoemulsion을 O/W크림에 함유하여 만든 크림 제형을 피부 미백개선 효능평가를 위한 인체 적용 실험에 적용하였다. 평균 42세의 여성 지원자 20명을 대상으로 8주 동안 인체 적용 시험을 수행하였고, 대조군으로 placebo크림을 사용하였다.
Table 1에서 실험에 사용된 원료를 정리하였다. 화장품용 원료는 각 생산업체로부터 받아 그대로 사용 하였으며, 백색 무취의 1,3-di(pentyloxyl) benzene은 순도 99.5%시료를 사용하였다.
성능/효과
8). Mexameter MX-18기기에 의한 색소감소정도 및 멜라닌 수치의 감소량 비교 통계처리 결과를 도표화 한 것으로 사용 2주 후부터 시험제품 사용부위에서 대조제품 사용부위에 비해 통계적으로 유의한 수준의 멜라닌 색소 감소를 확인할 수 있었다 (Fig. 9).
RS-Nanoemulsion 함유한 크림제형을 총 8주간의 시험기간 동안 25명의 피험자들을 대상으로 제품의 피부 미백 효능 시험을 시행하였으며 실험 결과 시험부위와 대조부위 모두 8주간의 시험 기간 동안 색소침착의 정도가 감소하는 양상을 보였으나, 시험부위에서 Visual analog scale의 점수 감소 정도가 더 큰 것으로 나타났으며 사용 4주차부터 통계적으로 유의한 수준으로 확인되었다. 기기평가에서는 시험부위와 대조부위 모두 8 주간의 시험기간 동안 M-value가 감소하는 양상을 보였으나 그 감소치의 크기는 시험부위에서 더 큰 것으로 나타났으며, 시험 2주차부터 8주차 까지 통계적으로 유의한 수준의 차이임이 확인되었다.
7은 Mexameter MX-18기기를 통해 멜라닌 수치변화를 나타내었다. 사용 4주 후부터 시험제품 사용부위에서 대조제품 사용부위에 비해 통계적으로 유의한 수준의 미백 효과를 전문가의 육안으로 확인 가능하였다 (Fig. 8).
1,3-di(pentyloxyl)benzene을 함유하여 PIC방법으로 제조된 RS-Nanoemulsion의 안정성을 8주 동안 관찰 한 결과 물리적인 외관의 변색이나 변취 현상등은 관찰되지 않았으며, 경피흡수 생체외 실험에서 지표성분인 1,3-di(pentyloxyl)benzene을 mineral oil에 용해한 대조시료와 일반 O/W 유화법으로 제조된 RS-emulsion시료를 비교 대상으로 하여 인체 피부에 대한 경피 흡수시험을 수행하였다. 시험결과, mineral oil에 용해한 대조 시료와 RS-Nanoemulsion의 경우, Diffusion coefficient가 시험 시작부터 약 초기 1시간 경과 시에 가장 높고 이후 통계적으로 유의한 수준으로 감소하는 경향을 나타내어, 이후 10시간부터 24시간 경과 시점까지의 경피투과율은 지속적으로 감소하는 양상을 나타내었다. 특히 RS-Nanoemulsion 시료는 1,3-di(pentyloxyl) benzene에 대한 Diffusion coefficient가 시험 시작부터 약 24 경과 시까지 1.
4에 나타내었다. 실험결과, 1,3-di(pentyloxy) benzene은 실험 시작부터 약 24 경과 시까지 Diffusion coefficient가 1.09±6.68 ~ 14.31±5.47×10-10(cm2/s)범위를 나타내며, 초기 1시간 경과 시에 가장 높고 이후 통계적으로 유의한 수준으로 감소하는 경향을 나타내어, 이후 10시간부터 24시간 경과 시점까지의 경피투과율은 지속적으로 감소하는 양상을 나타내었다.
2에 나타내었다. 실험결과, 1,3-di(pentyloxy)benzene은 실험 시작부터 약 10시간 경과 시까지 Diffusion (Permeation) coefficient가 5.79±3.09 ×10-11 ~ 8.23±0.75 ×10-10(cm2/s)범위를 나타내며, 초기 1시간 경과 시에 가장 높고 이후 통계적으로 유의한 수준으로 감소하는 경향을 나타내어, 이후 10시간부터 24시간 경과 시점까지의 경피투과율은 지속적으로 감소하는 양상을 나타내었다.
3에 나타내었다. 실험결과, mineral oil에 용해한 대조시료와 유사하게 1,3-di(pentyloxy)benzene은 Diffusion coefficient가 초기 1시간 경과 시에 상대적으로 높았으나 통계적으로 유의한 차이는 아니었다. 다만 초기 1시간 경과 후와 24시간 경과 후의 Diffusion coefficient가 통계적으로 유의하게 차이나, 24시간 경과 시점까지의 경피투과율은 지속적으로 감소하는 양상을 나타내었다.
기기평가에서는 시험부위와 대조부위 모두 8 주간의 시험기간 동안 M-value가 감소하는 양상을 보였으나 그 감소치의 크기는 시험부위에서 더 큰 것으로 나타났으며, 시험 2주차부터 8주차 까지 통계적으로 유의한 수준의 차이임이 확인되었다. 종합해보면 시험물질에 포함되어 있는 지표 성분 레조시놀다이펜틸에터[1,3-di(pentyloxyl) benzene]는 효과적인 미백 효과를 가지고 있는 것으로 판단할 수 있다.
질의응답
핵심어
질문
논문에서 추출한 답변
피부흡수시험법의 종류와 각 방법의 특징은 무엇인가?
피부흡수시험법은 생체 내(in vivo)시험과 생체 외(in vitro)시험 두 가지로 구분된다. 생체 내시험방법은 전신 순환의 일반사항과 대사 정보를 얻을 수 있다는 장점이 있으나 살아있는 동물을 사용해야 하고, 초기 흡수 상을 구분하기 어려우며, 실험에 사용하는 랫드 등 다른 종과 인체 피부의 투과도가 차이나는 단점이 있다 [10-12]. 생체 외 피부흡수시험방법은 시험물질이 피부를 통과하여 용액저장소로 이동한 양을 측정하는 방법으로, 인체 피부 또는 다른 종의 피부를 사용할 수 있고 시험물질에 대하여 반복 측정이 가능하며 실험동물을 사용하지 않고 연구가 가능하다. 또한 사용할 수 있는 시험물질의 범위가 넓고 윤리적 이유로 생체 내 시험으로는 평가할 수 없는 피부 손상과 피부 흡수에 대한 관계에 대하여 연구할 수 있는 장점이 있다 [13,14].
Franz cell시험법은 무엇인가?
본 연구에서는 Franz cell시험법을 통해 경피흡수 평가를 하였으며, Franz cell시험법은 피부 혹은 피부대용품의 한쪽 면에 경피 제제를 도포하거나 붙이고 다른쪽에는 피부 내 체액의 성분으로 구성 되거나 또는 특정 시험법에 따라 제조된 용액을 접촉시킴으로써 특정 성분의 투과도를 측정하는 시험법이다 [15]. 이때 용액의 온도는 피부내 온도와 같은 37℃를 유지하며 Auto-sampler를 이용하여 시간대 별로 용출 액을 채취하여 HPLC, UV 등을 통하여 함량을 분석하였다.
멜라닌의 과도 합성은 어떤 문제를 일으키는가?
멜라닌은 피부를 보호하는 중요한 방어수단이 나, 자외선, 호르몬 또는 약물 부작용 등의 여러 가지 요인으로, 멜라닌이 과도하게 합성되어 피부 표면에 침착되면, 기미, 주근깨 등의 원하지 않는 색소 침착을 유발하게 된다. 따라서, 이러한 색소 침착을 방지 및 해결하기 위해 멜라닌 합성을 조절 및 저해하는 알부틴(arbutin), 하이드로퀴논 (hydroquinone), 비타민 C 유도체 (vitamin C derivatives)등의 물질이 개발되어 왔으나 효과가 충분하지 않거나 피부 자극 등의 안전성, 제형내의 안정성 등의 한계로 화장품 제형에는 제한적으로 사용되어 왔다 [1,2].
참고문헌 (15)
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