[논문]비알콜성 지방간 동물모델에서 갈화추출물의 간보호 효과

황형칠; 공룡; 강옥화; 권동렬

doi:10.6116/kjh.2018.33.5.1.

비알콜성 지방간 동물모델에서 갈화추출물의 간보호 효과
Hepatoprotecive Effects of Puerariae Flos Extract on Experimental Non-alcoholic Fatty Liver Disease Models 원문보기

大韓本草學會誌 = The Korea journal of herbology, v.33 no.5, 2018년, pp.1 - 8

황형칠 (원광대학교 약학대학 한약학과, 원광한약연구) , 공룡 (원광대학교 약학대학 한약학과, 원광한약연구) , 강옥화 (원광대학교 약학대학 한약학과, 원광한약연구) , 권동렬 (원광대학교 약학대학 한약학과, 원광한약연구)

Abstract ▼ AI-Helper

Objectives : The aim of this study is to investigate the preventive effect of Puerariae Flos ethanol extract (PE) on methionin and choline deficient (MCD)-diet-induced Nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD) in C57BL/6J mice. Methods : In the in vivo experiments, C57BL/6J mice were divided into 4 groups; Normal group, Control group, MCD+PE 100 group, and MCD+PE 300 group. After 4 weeks, body weight, liver weight, biochemical parameters for liver function test, histological changes, reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), and Western blot were assessed. Results : Mice lost body weight with the MCD-diet and the MCD+PE 100 group and MCD+PE 300 groups lost less than the control group, though showed no statistical significance. Liver weights were decreased by the MCD diet, but MCD+PE 300 groups were increased significantly. In the liver function test, all the values were decreased with the MCD-diet, MCD+PE 100 group and MCD+PE 300 groups were increased significance. In histological findings of the livers, MCD-diet induced severe fatty accumulation in the livers, but this fatty change was reduced in the MCD+PE 100 group and MCD+PE 300 groups was inhibited respectively. In lipid accumulation factors (such as SREBP-1c, $C/EBP{\alpha}$, PPAR-${\gamma}$), MCD+PE 100 group and MCD+PE 300 groups showed inhibitory effect on liver lipogenesis by reducing associated gene expressions caused by MCD diet. Conclusions : We were able to know that Puerariae Flos ethanol extract (PE) shown hepatoprotective effects via a decrease on the hepatic lipogenesis factors in the experimental NAFLD Models.

주제어

표/그림 (8)

표 Table 1. Constituents of MCD-diet
표 Table 2. Sequences of oligonucleotide primers designed for PCR
그림 Figure 1. Body weight change of MCD-diet induced mice with/without treatment. (A) Photographs of mice are shown (Normal vs. MCD: C57BL/6J mice on left was treated with normal diet for 4 weeks. C57BL/6J mice on right was treated with MCD diet for 4 weeks.) (B) Effect of Normal, MCD, MCD+PE 100 and MCD+PE 300 supplemented diets on body weight. Data represent means ± S.D. for 10 mice in each group. Normal: normal-diet-fed mice; MCD: MCD-diet-fed mice; PE 100: Puerariae Flos ethanol extract 100 ㎎/㎏/day; PE 300: Puerariae Flos ethanol extract 300 ㎎/㎏/day.
그림 Figure 2. Liver weight changes of each experimental groups. (A) Decreased liver weight in all three MCD-diet treated groups were observed. (B) Relative liver weight (g/㎏ BW). Data represent means ± S.D. for 10 mice in each group. *P < 0.05 vs. MCD. Normal: normal-diet-fed mice; MCD: MCD-diet-fed mice; PE 100: Puerariae Flos ethanol extract 100 ㎎/㎏/day; PE 300: Puerariae Flos ethanol extract 300 ㎎/㎏/day.
그림 Figure 3. The effect of PE on the liver histology in MCD-diet-induced mice. (A) Photographs of mice liver are shown. (B) Haematoxylin and eosin-stained liver sections from mice fed (X100) : (a) Normal, (b) MCD, (c) MCD+PE 100 ㎎/㎏/day, (d) MCD+PE 300 ㎎/㎏/day.
표 Table 3. Effects of PE on MCD-diet induced liver function in C57BL/6J mice by biochemistry
그림 Figure 4. Effects of PE on lipogenesis related gene expression in liver tissue of experimental mice. SREBP-1c, C/EBPα, PPARγ, β-actin gene expression in liver tissue were examined by RT-PCR analysis. Normal: normal-diet-fed mice; MCD: MCDdiet-fed mice; PE 100: Puerariae Flos ethanol extract 100 ㎎/㎏/day; PE 300: Puerariae Flos ethanol extract 300 ㎎/㎏/day.
그림 Figure 5. Effects of PE on lipogenesis related protein expression in liver tissue of experimental mice. SREBP-1c, C/EBPα, PPARγ, β-actin protein expression in liver tissue were examined by Western blot analysis. Normal: normal-diet-fed mice; MCD: MCDdiet-fed mice; PE 100: Puerariae Flos ethanol extract 100 ㎎/㎏/day; PE 300: Puerariae Flos ethanol extract 300 ㎎/㎏/day.

AI 본문요약
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문제 정의

따라서 본 연구는 갈화 추출물을 이용하여 비알콜성 지방간 개선 효과를 알아보고자 하였다. 그리하여 이번 연구에 서는 MCD-diet 모델을 비알콜성 지방간 동물모델로 삼고 갈화 에탄올 추출물 (PE)을 투여하여 비알콜성 지방간 질환의 병리적 과정에 어떠한 영향을 미치는지 관찰하였다.
최근에는 갈화가 당뇨 조절 기능, 간보호 작용, 항산화 효과, 암세포사멸 효능 등이 있는 것으로 보고되면서, 관련 질환의 치료에 적용할 수 있다는 가능성이 보고되기도 하였다^31-32). 따라서 본 연구는 갈화 추출물을 이용하여 비알콜성 지방간 개선 효과를 알아보고자 하였다. 그리하여 이번 연구에 서는 MCD-diet 모델을 비알콜성 지방간 동물모델로 삼고 갈화 에탄올 추출물 (PE)을 투여하여 비알콜성 지방간 질환의 병리적 과정에 어떠한 영향을 미치는지 관찰하였다.
따라서 본 연구에서는 갈화 에탄올 추출물 (Puerariae Flos ethanol extract, PE)의 비알콜성 지방간 개선 효과를 알아보기 위해, MCD-diet 모델을 이용한 in vivo 실험에 PE을 투여하여 비알콜성 지방간 질환의 병리적 과정에 어떠한 영향을 주는지 알아보고, 지방생성에 미치는 작용기전을 알아보고자 하였다.

제안 방법

4주간 MCD-diet 및 약재 투여 후 mouse를 에테르 마취 후 채혈 및 방혈 치사시킨 다음 간 조직을 적출하여 10% 포르말린으로 고정 후 12시간 이상 흐르는 물에서 formaldghyde를 세척한 후 60% ethanol에서 1시간, 70% ethanol에서 1시간, 80% ethanol에서 1시간, 90% ethanol에서 1시간, 100% ethanol에서 1시간씩 수세시켰다. 그리고 xylene에 1시간씩 3회의 투명과정과 파라핀에 1시간씩 2회의 침투과정을 실시하였으며, 굳은 파라핀 블럭을 약 4 ㎛ 두께로 잘라 절편을 얻었다.
실험을 위해 동물을 그룹당 7마리씩으로 하여 정상군 (Normal diet without any treatment), 대조군 (MCD-diet without any treatment), 저농도 약물 투여군 (MCD-diet + PE 100 ㎎/㎏/day), 고농도 약물 투여군 (MCD-diet + PE 300 ㎎/㎏/day)으로 나누어 실험하였다. 4주간 경구투여를 통해 약물을 주입하였고, 체중 및 식이 섭취량은 3일 간격으로 측정하였다.
C57BL/6J mice를 정상군, 대조군, 저농도 약물투여군, 고농도 약물 투여군으로 나누어 4주간 실험하여 간기능, 지방간 정도, 간의 지방생성과 관련된 인자들에 미치는 영향을 알아보았다. MCD-diet로 유발되는 병태모델에서는 Fat로 유발 시킨 병태모델과 다르게 체중감소가 나타는데, 정상군보다 MCD-diet 군에서 현저한 체중감소를 보였다.
Easy-BLUE ^TM total-RNA extraction kit (Intron Biotechnology, KOREA)를 사용하여 RNA를 분리하였다. 즉, 동물을 희생한 후 간 조직을 적당량 취하여 easy-BLUE solution에 넣은 후 homogenize 하였다.
MCD-diet에 의해 유도된 지방간 모델에서 PE가 간의 지방생성에 관여하는 gene 발현에 미치는 영향을 알아보기 위해 mouse 간 조직에서 SREBP-1c, C/EBPα , PPARγ gene 발현을 RT-PCR분석법을 이용해 확인하였다.
MCD-diet에 의해 유도된 지방간 모델에서 PE가 간의 지방생성에 미치는 영향을 알아보기 위해 mouse 간 조직에서 SREBP-1c, C/EBPα , PPARγ의 단백질 발현 정도를 살펴보았다.
Mouse 체중은 실험을 시작한 날로부터 실험종료 시까지 3일 간격으로 측정하였다. 실험결과 정상군에서는 체중증가가 꾸준히 있었으나, 대조군에서는 체중감소가 뚜렷이 나타났다.
PE 간기능 개선에 효과를 나타내는지 알아보기 위해 mice의 serum에서 간 기능과 관련된 인자들 즉, triglyceride와 total cholesterol을 측정하였다. 그 결과, 정상군 (112.
Western blot 분석을 위한 시료는 C57BL/6J 쥐의 간에서 간조직을 lysis buffer (20 mM Tris, 1 mM Na ₃VO4, 1 mM phenymethylsufonyl fluoride, 50 mM 6NaF)를 처리 하여 단백질을 추출한 다음 정량하였다. 이중 동량의 단백질을 SDS PAGE gel에서 전기영동 하여 단백질은 크기 별로 분리한 후 polyvinylidene membrane (Millipore, Bedford, MA, USA)에 1시간 동안 전이시켰다.
간 중량에 의한 PE의 효과를 알아보기 위해 mice의 간조직의 중량을 측정하고, 체중에 따른 상대적인 간 중량을 측정해 보았다. 그 결과 간 중량이 정상군에 비해 대조군 약물 투여군이 모두 감소하였으나, 이것을 다시 각 동물 체중 평균으로 나누어서 비교해 보았을 때는 간의 중량이 체중 대비 고농도 약물 투여군에서 유의적으로 증가된 것을 확인하였다 (Figure 2).
갈화 ethanol 추출물은 갈화 1㎏을 70% ethanol을 100 g/L 의 비율로 하여, 2시간 환류 추출하였다. 추출물을 0.
갈화 에탄올 추출물 (PE)이 C57BL/6J mice에 MCD-diet로 유발시킨 NAFLD 병태모델에 미치는 효능을 관찰하기 위해 체중변화, 간중량 변화, 간기능 검사, 조직병리학적 검사 (H&E stain) 및 간의 지방생성과 연관된 유전자 검사를 RT-PCR과 Western blot 분석법을 시행하였다.
4주간 MCD-diet 및 약재 투여 후 mouse를 에테르 마취 후 채혈 및 방혈 치사시킨 다음 간 조직을 적출하여 10% 포르말린으로 고정 후 12시간 이상 흐르는 물에서 formaldghyde를 세척한 후 60% ethanol에서 1시간, 70% ethanol에서 1시간, 80% ethanol에서 1시간, 90% ethanol에서 1시간, 100% ethanol에서 1시간씩 수세시켰다. 그리고 xylene에 1시간씩 3회의 투명과정과 파라핀에 1시간씩 2회의 침투과정을 실시하였으며, 굳은 파라핀 블럭을 약 4 ㎛ 두께로 잘라 절편을 얻었다. 절편은 hematoxylin and eosin (H & E) 염색을 시행하여 광학현미경으로 분석하였다.
병리조직학적인 분석은 H&E stain을 통해 이루어졌다.
5% skim milk에 1시간 동안 Blocking 하였고, 1차 항체는 4℃에서 밤새 반응시켰다. 수차례의 세척 과정을 거친 뒤 2차 항체를 상온에서 1시간 반응 시킨 다음 ECL prime Western blotting detection reagents (GE Healthcare, USA)와 ImageQuant LAS 4000 Mini Biomolecular Imager (GE Healthcare, USA)를 사용하여 단백질 발현을 확인하였다.
에 표시하였다. 실험을 위해 동물을 그룹당 7마리씩으로 하여 정상군 (Normal diet without any treatment), 대조군 (MCD-diet without any treatment), 저농도 약물 투여군 (MCD-diet + PE 100 ㎎/㎏/day), 고농도 약물 투여군 (MCD-diet + PE 300 ㎎/㎏/day)으로 나누어 실험하였다. 4주간 경구투여를 통해 약물을 주입하였고, 체중 및 식이 섭취량은 3일 간격으로 측정하였다.
여기에 chloroform 200 ㎕를 넣고 다시 교반하여 13,000 rpm, 4℃에서 10분간 원심분리한 다음, 상등액 400 ㎕에 isopropanol을 가하여 다시 원심분리하여 RNA 펠렛을 얻었다. 여기서 얻어진 RNA에 MuLV 역전사효소(reverse transcriptase), 1 mM dNTP 0.5 ㎍을 넣어 cDNA를 만들었다. 여기에 각각의 primer를 넣고 유전자 증폭기 (thermal cycler)를 이용하여 증폭시켰다.
절편은 hematoxylin and eosin (H & E) 염색을 시행하여 광학현미경으로 분석하였다.

대상 데이터

3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethox yphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium (MTS)는 Promega (Madison, WI, USA)로부터 구입하였다. Fetal bovine serum (FBS) 및 항생제는 Gibco/BRL (Gaithersburg, USA)로부터 구입하였다.
Anti-β-actin, peroxisome proliferator activated receptor (PPAR)-α , PPAR-γ , CCAAT/enhancer-binding protein (C/EBP)α , sterol regulatory element binding protein (SREBP), fatty acid synthase (FAS) antibodies 는 Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)로 부터 구입하였다.
3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethox yphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium (MTS)는 Promega (Madison, WI, USA)로부터 구입하였다. Fetal bovine serum (FBS) 및 항생제는 Gibco/BRL (Gaithersburg, USA)로부터 구입하였다. 조직배양 플레이트와 직경 100㎜ 페트리접시는 넌크사 (Nunc, Inc, USA)로부터 구입하여 사용 하였다.
동물은 20g 내외의 생후 7주령 C57BL/6J 수컷 생쥐를 ㈜ 중앙실험동물 (Soeul, Korea)로부터 구입하여 실험에 사용하였다. NAFLD를 유도하기 위해 Methionine Choline Deficient (MCD)-diet 사료를 ㈜중앙실험동물 (Soeul, Korea)로부터 구입하여 실험에 사용하였으며, 1주 동안 적응시킨 후 본 실험을 시작하였다. 실험 기간 중 명암주기는 12시간 간격, 온도 25 ± 2℃, 습도 55%로 실험실 환경을 유지하였다.
동물은 20g 내외의 생후 7주령 C57BL/6J 수컷 생쥐를 ㈜ 중앙실험동물 (Soeul, Korea)로부터 구입하여 실험에 사용하였다. NAFLD를 유도하기 위해 Methionine Choline Deficient (MCD)-diet 사료를 ㈜중앙실험동물 (Soeul, Korea)로부터 구입하여 실험에 사용하였으며, 1주 동안 적응시킨 후 본 실험을 시작하였다.
본 실험에 사용된 약재인 葛花는 백제허브(대전, 한국)에서 구입하여 권동렬 교수가 감정하여 사용하였다.
Fetal bovine serum (FBS) 및 항생제는 Gibco/BRL (Gaithersburg, USA)로부터 구입하였다. 조직배양 플레이트와 직경 100㎜ 페트리접시는 넌크사 (Nunc, Inc, USA)로부터 구입하여 사용 하였다. Anti-β-actin, peroxisome proliferator activated receptor (PPAR)-α , PPAR-γ , CCAAT/enhancer-binding protein (C/EBP)α , sterol regulatory element binding protein (SREBP), fatty acid synthase (FAS) antibodies 는 Santa Cruz Biotechnology (Santa Cruz, CA, USA)로 부터 구입하였다.

데이터처리

모든 실험값은 평균±표준오차 (mean±SD)로 표시했으며, 통계분석은 ANOVA와 Student’ s t-test로 처리하여 유의성 한계는 p < 0.05로 정하였다.

이론/모형

TC는 Richmond 등의 효소법²⁰⁾ 에 의하여 조제된 kit (AM 202-K, Asan)를 사용하여 측정하였다. HDL-C는 Nakayama 등의 효소법 ²¹⁾에 의하여 조제된 kit (AM 203-K, Asan)를 사용하여 측정하였다. 수치는 표준 검량선에 준해 그 함량을 ㎎/㎗로 표시하였다.
수치는 표준 검량선에 준해 그 함량을 ㎎/㎗로 표시하였다. LDL-C 함량은 Fridewald 등의 방법²²⁾ 에 따라 다음의 식에 의하여 산출하였다.
에 준하여 조제된 kit (AM 157S-K, Asan)를 사용하여 측정하였다. TC는 Richmond 등의 효소법²⁰⁾ 에 의하여 조제된 kit (AM 202-K, Asan)를 사용하여 측정하였다. HDL-C는 Nakayama 등의 효소법 ²¹⁾에 의하여 조제된 kit (AM 203-K, Asan)를 사용하여 측정하였다.
TG는 McGowan 등의 방법¹⁹⁾ 에 준하여 조제된 kit (AM 157S-K, Asan)를 사용하여 측정하였다. TC는 Richmond 등의 효소법²⁰⁾ 에 의하여 조제된 kit (AM 202-K, Asan)를 사용하여 측정하였다.

성능/효과

1. MCD-diet 섭취 시 쥐의 체중감소가 나타나는 것을 확인 하였으나, 저농도 및 고농도의 약물 투여시 체중감소 효과가 억제되는 것을 확인하였다. 그러나 체중에서 약물 투여군과 대조군 사이에 유의적인 차이가 나타나지는 않았다.
2. 대조군에서는 간 중량이 감소되었으나, 저농도 및 고농도 약물 투여군에서 mice의 간 중량이 증가 되었다. 특히, 체중에 대비한 간 중량에서는 고농도 약물 투여군에서 유의적으로 증가 되었다.
3. PE는 혈중 TG, TC, HDL-콜레스테롤, LDL-콜레스테롤 농도에서 유의적인 효과를 나타냈다.
4. PE는 MCD-diet로 유발된 간조직의 지방축적을 억제 하였다.
5. PE는 MCD-diet로 증가 된 SREBP-1, c/EBPα , PPARγ 의 발현을 농도 의존적으로 억제하였다.
C57BL/6J mice를 정상군, 대조군, 저농도 약물투여군, 고농도 약물 투여군으로 나누어 4주간 실험하여 간기능, 지방간 정도, 간의 지방생성과 관련된 인자들에 미치는 영향을 알아보았다. MCD-diet로 유발되는 병태모델에서는 Fat로 유발 시킨 병태모델과 다르게 체중감소가 나타는데, 정상군보다 MCD-diet 군에서 현저한 체중감소를 보였다. 약물 투여군에서는 대조군보다는 체중이 덜 감소하였으나 유의성은 없었다 (Figure 1).
7 ㎎/㎗)에서는 농도 의존적인 감소 효과를 보였다. Total cholesterol, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol 수치도 대조군에 비교해 약물 투여군들에서 농도 의존적인 개선 양상을 보였다.
약물 투여군에서는 대조군보다는 체중이 덜 감소하였으나 유의성은 없었다 (Figure 1). 간 중량에서는 대조군과 약물 투여군에서 유의성 있게 증가하였고, 이것을 다시 각 동물 체중 평균으로 나누어서 비교해 보았을 때 간 중량이 체중 대비 각 약물 투여군 모두에서 증가 된 것으로 나타났으며 특히, 고농도 약물 투여군에서는 유의성 있게 증가하는 것을 확인하였다 (Figure 2). 간기능 검사에서 MCD-diet를 섭취한 대조군에서는 TG와 HDL-cholesterol 이 증가하였고, 약물 투여군에서는 TG와 HDL-cholesterol level이 감소하였다 (Table 3).
간 중량에서는 대조군과 약물 투여군에서 유의성 있게 증가하였고, 이것을 다시 각 동물 체중 평균으로 나누어서 비교해 보았을 때 간 중량이 체중 대비 각 약물 투여군 모두에서 증가 된 것으로 나타났으며 특히, 고농도 약물 투여군에서는 유의성 있게 증가하는 것을 확인하였다 (Figure 2). 간기능 검사에서 MCD-diet를 섭취한 대조군에서는 TG와 HDL-cholesterol 이 증가하였고, 약물 투여군에서는 TG와 HDL-cholesterol level이 감소하였다 (Table 3). 즉, PE가 TG와 HDL-cholesterol 상승을 억제하여 간보호 작용을 하는 것으로 나타났다.
간 중량에 의한 PE의 효과를 알아보기 위해 mice의 간조직의 중량을 측정하고, 체중에 따른 상대적인 간 중량을 측정해 보았다. 그 결과 간 중량이 정상군에 비해 대조군 약물 투여군이 모두 감소하였으나, 이것을 다시 각 동물 체중 평균으로 나누어서 비교해 보았을 때는 간의 중량이 체중 대비 고농도 약물 투여군에서 유의적으로 증가된 것을 확인하였다 (Figure 2).
그 결과, 대조군의 간 조직에서 SREBP-1c, C/EBPα , PPARγ의 mRNA 발현이 증가하였으나, 약물 투여군에서는 감소하였다.
그 결과, 대조군의 간 조직에서 SREBP-1c, C/EBPα , PPARγ의 단백질 발현이 증가한 반면 약물 투여군에서는 감소하는 것을 확인하였다.
그 결과, 정상군 (112.6 ± 3.2 ㎎/㎗)에 비해 대조군 (141.3 ± 5.7 ㎎/㎗)에서 triglyceride 함량이 증가하였으며, 저농도 약물 투여군 (122.7 ± 5.3 ㎎/㎗), 고동도 약물 투여군 (118.2 ± 0.7 ㎎/㎗)에서는 농도 의존적인 감소 효과를 보였다.
정상군에서는 간소엽의 입체구조가 잘 유지되었고, 문맥 주위 및 중심 정맥 주위의 섬유화 및 간세포 괴사나 염증반응은 관찰되지 않았으나, 대조군에서는 간소엽의 입체구조가 소실되면서 많은 지방축적이 관찰되었다. 반면, 저농도 약물 투여군에서는 작은 입자의 지방 입자만 관찰되었고, 고농도 약물 투여군에서는 지방 입자가 거의 관찰되지 않아 PE에 의해 지방간이 개선됨을 확인하였다 (Figure 3).
Mouse 체중은 실험을 시작한 날로부터 실험종료 시까지 3일 간격으로 측정하였다. 실험결과 정상군에서는 체중증가가 꾸준히 있었으나, 대조군에서는 체중감소가 뚜렷이 나타났다. 약물 투여군에서는 대조군과 비교하여 체중이 적게 감소되었으며, 유의적인 차이는 없었다(Figure 1).
PE는 MCD-diet로 증가 된 SREBP-1c, c/EBPα , PPAR-γ의 발현을 농도 의존적으로 억제하였다 (Figure 4, 5). 이러한 결과를 볼 때, PE는 지방 생성 관련 단백질인 SREBP-1c의 발현을 조절하여 지방 세포의 증식과 분화 기능을 억제함으로써 체내 지방형성과 축적을 저해하는 것으로 판단된다.
이상의 결과에서 갈화는 비알코올성 지방간 실험 모델에 있어서 유의한 간보호 작용이 있는 것으로 확인되었으며, 그 작용기전에 관한 연구에서도 지방생성을 유도하는 인자들의 발현을 억제시킴으로써 간에서의 지방생성을 감소시켜줄 수 있을 것으로 추정된다. 향후 추가적인 연구를 통하여 임상에서 NAFLD의 치료 후보물질로서의 가능성을 보여줌으로써 간질환을 비롯한 대사질환 치료제로의 개발 가능성을 보여준다.
간기능 검사에서 MCD-diet를 섭취한 대조군에서는 TG와 HDL-cholesterol 이 증가하였고, 약물 투여군에서는 TG와 HDL-cholesterol level이 감소하였다 (Table 3). 즉, PE가 TG와 HDL-cholesterol 상승을 억제하여 간보호 작용을 하는 것으로 나타났다. 또한, Figure 3.

후속연구

NAFLD에 관한 이해가 넓어지고 있음에도 불구하고, 현재 까지 식사요법, 운동요법 등을 통한 체중 감량 등의 기본적인 치료법과 인슐린 감수성의 개선, 혈당조절과 같은 방법들과 함께 항산화제의 복용 등을 권장하는 등 아직 효과적인 치료 방법은 미비한 실정이다. 따라서 앞으로 비알콜성 지방간에 대한 여러 기전 연구와 지방간의 발생을 억제하는데 필요한 세포 신호전달 체계를 규명하고 천연물에 대한 연구를 통해 독창적 작용점에 근거한 비알콜성 지방간 치료제의 개발에 힘써야 할 것이라 생각된다. 갈화 (Flower of Pueraria thunbergiana Bentham)는 콩과 (Leguminosae)에 속한 다년생 덩굴 식물로 칡(Pueraria lobata Ohwi)의 꽃을 말한다.
이상의 결과에서 갈화는 비알코올성 지방간 실험 모델에 있어서 유의한 간보호 작용이 있는 것으로 확인되었으며, 그 작용기전에 관한 연구에서도 지방생성을 유도하는 인자들의 발현을 억제시킴으로써 간에서의 지방생성을 감소시켜줄 수 있을 것으로 추정된다. 향후 추가적인 연구를 통하여 임상에서 NAFLD의 치료 후보물질로서의 가능성을 보여줌으로써 간질환을 비롯한 대사질환 치료제로의 개발 가능성을 보여준다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	인슐린 저항성을 가진 환자의 간에서는 인지되지 않는 손상이 빈번히 일어날 경우 어떤 문제점을 야기하는가?	NAFLD은 서구인의 경우 20 - 30% 의 유병률을 보이며, 비만이나 인슐린 비의존형 당뇨병의 경우 25 - 75%에서 발병된다2-5). 특히, 인슐린 저항성을 가진 환자의 간에서는 인지되지 않는 손상이 빈번이 일어나는데 이러한 만성적인 간 손상으로 인슐린 저항성이 점차 악화되는 과정에서 병이 진행되다가 당뇨, 고혈압, 고지혈증, 혈관질환과 같은 대사증후군이 명확해질 시점이 되면 지방간염 (steatohepatitis) 과 간경화 (cirrhosis)로 진행된다. 이때, 지방 성분은 간세포 내중성지질 방울 (droplets)의 형태로 저장되며 그 결과 간세포의 세포핵은 세포 주변으로 밀려나 거품 모양의 세포 형태를 이루게 된다6).
	비알콜성 지방간이란?	비알콜성 지방간 (NAFLD)은 알코올 섭취력은 거의 없지만 알코올성 지방간과 유사하게 소엽성 간염의 조직 소견을 특징으로 하며, 중성지질(triglyceride) 함량이 전체 간 무게의 5%을 초과할 경우로 정의된다1). NAFLD은 서구인의 경우 20 - 30% 의 유병률을 보이며, 비만이나 인슐린 비의존형 당뇨병의 경우 25 - 75%에서 발병된다2-5).
	비알콜성 지방간의 동물모델에는 어떤것이 있는가?	현재 NAFLD의 동물모델에는 methionine and choline deficient (MCD) diet, choline-deficient diet (CD), high-fat diet (HFD) 등이 있다. 이 중 MCD-diet 모델은 짧은 기간에 가장 심각한 NAFLD의 표현형을 나타내는데, 이 모델은 40년 이상 사용된 모델이며, 2 - 4주면 설치류에 간 지방증 (주로 거대 수포성)을 유도한다7-8).

참고문헌 (36)

Ko JS. Dermatology. Soomoonsa Press. 2000:73.
Pavel S, Muskiet FA. Eumelanin (precursor) metabolites as markers for pigmented malignant melanoma, a preliminary report. Cancer Detect Prev. 1983;6:311-316.
Prota, G. Recent advances in the chemistry of melanogenesis in mammals. J Invest Dermatol. 1980;75:122-127.

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Parvez S, M Kang, HS Chung, C Cho, MC Hong, MK Shin, H Bae. Survey and mechanism of skin depigmenting and lightening agents. Phytother Res. 2006;20:921-934.

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Mayer A. M. Polyphenol oxidases in plants recent progress. Phytochemistry. 1987;26:11-20.
Cabanes JS, Chazarra S, Garcia-Carmona F. Kojic acid, a cosmetic skin whitening agent, is a slow binding inhibitor of catecholase activity of tyrosinase. J Pharm Pharmacol. 1994;46:982-985.

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Masashi N, Yasuteru K,Tooru S. Murine Models of Nonalcoholic Fatty Liver Disease and Steatohepatitis. 2012;2013:237870. doi: 10.1155/2013/237870.

상세보기
Andrew J Lickteig, Craig D Fisher, Lisa M Augustine, Nathan J. Cherrington. Genes of the Antioxidant Response Undergo Upregulation in a Rodent Model of Nonalcoholic Steatohepatitis. J Biochem Molecular Toxicology. 2007;219:216-220.
Mu Y-ping, Ogawa T, Kawada N. Reversibility of fibrosis, inflammation, and endoplasmic reticulum stress in the liver of rats fed a methionine-cholinedeficient diet. Laboratory Investigation. J Technical Methods and Pathology. 2010;90:245-256.
Heo J. Hwang sil donguibogam. Seoul: Geumjinpublishing. 1993;927.
Kim CM, Sin MK, Lee KS, Ahn DK. Encyclopedia of oriental herbal medicine. Seoul:Jeongdam. 2004;2307.
Kim TJ, Resources plants in Korea. Seoul:Seoul National University Publishing Council, 1986;232.
Kubo M, Fujita K. A new irisolidone-7-Oglucoside and tectoridin from Pueraria species. Phytochemistry. 1973;12:25-47.

상세보기
Kubo M, Sasaki M, Namba K, Naruto S, Nishimura H. Isolation of a new isoflavone from chinese Pueraria Flower. Chem Pharm Bull. 1975;23:2449-2451.

상세보기
Kurihara T, Kikuchi. Studies on the constituents of Flower (1): On the constituents of Flower of Pueraria thunbergiana Benth (2). Isolation of a new isoflavone glycoside. Yakugaku Zasshi. 1975;95: 1283-1285.

상세보기
Park HJ, Park JH, Moon JO, Lee KT, Jung WT, Oh SR, Lee HK. Isoflavone glycosides from the Flower of Pueraria thunbergiana. Phytochemistry. 1999;51:147-151.

상세보기
Hsu FL, Liu IM, Kuo DH, Chen WC, Su HC, Cheng JT. Antihyperglycemic effect of puerarin in sterptozotocin-induced diabetic rats. J Nature Products. 2003;66:788-792.

상세보기
Hwang YP, Choi CY, Chung YC, Jeon SS, Jeong HG. Protective effects of puerarin on carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity. Arch Pharmacal Res. 2007;30:1309-1317.

원문보기 상세보기
Falchuk FR, Fiske SC, Haggitt RC, Federman M, Trey C. Pericentral hepatic fibrosis and intracellular hyalin in diabetes mellitus. Gastroenterology. 1980;78:535-541.

상세보기
Bacon BR. Genetic, metabolic, and infiltrative diseases affecting the liver. Harrison's principles of internal medicine. 17th ed. New York: McGraw-Hill. 2008;1980-1983
Angulo P. Nonalcoholic fatty liver disease. N Engl J Med. 2002;346:1221-1231.

상세보기
Yun JW, Cho YK. Clinical impact of non-alcoholic fatty liver disease on other medical diseases. Korean J Intern Med. 2009;76(1):25-29.
Brunt EM. Alcoholic and nonalcoholic steatohepatitis. Clin Liver Dis. 2002;6(2):399-420.

상세보기
Leevy CM. Fatty liver. A study of 270 patients with biopsy proven fatty liver and review of the literature. Medicine. 1962;41:249-276.

상세보기
Wanless IR, Lentz JS. Fatty liver hepatitis (steatohepatitis) and obesity: an autopsy study with analysis of risk factors. Hepatology. 1990;12: 1106-1110.

상세보기
Eriksson S, Eriksson KF, Bondesson L. Nonalcoholic steatohepatitis in obesity: a reversible condition. Acta Med Scand. 1986;220:83-88.
Kim MJ, Park CH, Kim DH, Park MH, Park KC, Hyun MK, Lee AK, Moon HR, Chung HY. Hepatoprotective Effects of MHY3200 on High-Fat, Diet-Induced, Non-Alcoholic Fatty Liver Disease in Rats. Molecules. 2018;23(8). doi: 10.3390/molecules23082057.

상세보기
Powell EE, Cooksley WG, Hanson R, Searle J, Halliday JW, Powell LW. The natural history of nonalcoholic steatohepatitis: a follow-up study of forty-two patients for up to 21 years. Hepatology. 1990;11:74-80.

상세보기
Lee RG. Nonalcoholic steatohepatitis: a study of 49 patients. Hum Path. 1989;20:594-598.

상세보기
Bacon BR, Faragvash MJ, Janny CG, Neuschwander-Tetri BA. Nonalcoholic steatohepatitis: an espanded clinical entity. Gastroenterology. 1994;107:1103-1109.

상세보기
Hsu FL, Liu IM, Kuo DH, Chen WC, Su HC, Cheng JT. Antihyperglycemic effect of puerarin in sterptozotocin-induced diabetic rats. J Nature Products. 2003;66:788-792.

상세보기
Hwang YP, Choi CY, Chung YC, Jeon SS, Jeong HG. Protective effects of puerarin on carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity. Arch Pharmacal Res. 2007;30:1309-1317.

원문보기 상세보기
Gervois P, Torra IP, Fruchart JC, Staels B. Regulation of lipid and lipoprotein metabolism by PPAR activators. Clin Chem Lab Med. 2000;38:3-11.
Foretz M, Guichard C, Ferre P, Foufelle F. Sterol regulatory element binding protein-1c is a major mediator of insulin action on the hepatic expression of glucokinase and lipogenesis-related genes. Proc Natl Acad Sci. 1999;96:12737-12742.

상세보기
Morrison CD, Huypens P, Stewart LK, Gettys TW. Implications of cross talk between leptin and insulin signaling during the development of dietinduced obesity. Biochim Biophys Acta. 2009;1792: 409-416.

상세보기
Gomez-Lechon MJ, Donato MT, Martinez-Romero A, Jimenez N, Castell JV and O'Connor JE. A human hepatocellular in vitro model to investigate steatosis. Chem Biol Interact. 2007;165(2):106-116.

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표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

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