[논문]Lactobacillus rhamnosus BHN-LAB 76에 의한 Pueraria 발효 추출물의 항산화 활성 평가

김병혁; 장종옥; 이준형; 박예은; 김중규; 윤여초; 정수진; 권기석; 이중복

doi:10.5352/jls.2019.29.5.545

Lactobacillus rhamnosus BHN-LAB 76에 의한 Pueraria 발효 추출물의 항산화 활성 평가
Evaluation of the Anti-oxidant Activity of Pueraria Extract Fermented by Lactobacillus rhamnosus BHN-LAB 76 원문보기

생명과학회지 = Journal of life science, v.29 no.5 = no.229, 2019년, pp.545 - 554

김병혁 (비에이치앤바이오 생물산업소재개발연구소) , 장종옥 (안동대학교 원예.생약융합학부) , 이준형 (비에이치앤바이오 생물산업소재개발연구소) , 박예은 (비에이치앤바이오 생물산업소재개발연구소) , 김중규 (비에이치앤바이오 생물산업소재개발연구소) , 윤여초 (비에이치앤바이오 생물산업소재개발연구소) , 정수진 (비에이치앤바이오 생물산업소재개발연구소) , 권기석 (안동대학교 원예.생약융합학부) , 이중복 (비에이치앤바이오 생물산업소재개발연구소)

초록
AI-Helper

칡의 화합물은 동양 전통 의학에서 매우 중요한 콩과 식물로서 다량의 이소플라본을 함유한다고 보고되었다. 그러나, 칡의 주요 함유 이소플라본은 생물학적으로 이용가능성이 낮기 때문에, 생물학적 이용가능성을 증대시키기 위해서는 가수분해나 ${\beta}$-glucosidase를 사용하여 생물전환을 통해 이용 효율성을 증대시킬 수 있다. 본 연구는 김치로 부터 분리된 Lactobacillus rhamnosus BHN-76를 이용해 발효한 칡 추출물의 항산화 효과를 조사하였다. L. rhamnosus BHN-76 발효는 $37^{\circ}C$에서 3일간 발효하였으며, 발효하지 않은 칡 추출물에 비해 L. rhamnosus BHN-76 발효 칡 추출물에서 총 폴리페놀 함량은 약 134%, 총 플라보노이드 함량은 약 110% 증가된 것을 확인하였다. 또한, SOD 유사활성능, DPPH radical 소거 활성능과 ABTS radical 소거활성능은 각각 약 213%, 190%와 107% 항산화능이 증가하는 것을 확인하였다. 이 결과를 통해 L. rhamnosus BHN-76을 이용한 칡의 발효가 가능하며, 유산균 발효가 칡의 항산화능 증대에 효과적인 것을 확인하였으며 본 연구를 기반으로 한 기능성 식품 또는 화장품 소재로의 개발 및 응용이 가능할 것으로 기대된다.

Abstract ▼ AI-Helper

The phytochemical compounds of Pueraria, a medicinally important leguminous plant, include various isoflavones that have weak estrogenic activity and a potential role in preventing chronic disease, cancer, osteoporosis, and postmenopausal syndrome. However, the major isoflavones are derivatives of puerarin and occur mainly as unabsorbable and biologically inactive glycosides. The bioavailability of the glucosides can be increased by hydrolysis of the sugar moiety using ${\beta}$-glucosidase. In this study, we investigated the antioxidant effects of a Pueraria extract after fermentation by Lactobacillus rhamnosus BHN-LAB 76. The L. rhamnosus BHN-LAB 76 strain was inoculated into Pueraria powder and fermented at $37^{\circ}C$ for 72 hr. The total polyphenol content of the Pueraria extract increased by about 134% and the total flavonoid content increased around 110% after fermentation with L. rhamnosus BHN-LAB 76 when compared to a non-fermented Pueraria extract. Superoxide dismutase-like activities, DPPH radical scavenging, and ABTS radical scavenging increased by approximately 213%, 190%, and 107%, respectively, in the fermented Pueraria extract compared to the non-fermented Pueraria extract. Fermentation of Pueraria extracts with L. rhamnosus BHN-LAB 76 is therefore possible and can effectively increase the antioxidant effects. These results can be applied to the development of improved foods and cosmetic materials.

주제어

표/그림 (8)

그림 Fig. 1. Phylogenetic tree of the L. rhamnosus BHN-LAB 76 and related bacteria of the Lactobacillus group based on 16S rRNA gene sequence comparisons. The sequences of isolated strains were compared with available from the GenBank database.
그림 Fig. 2. Quantitative analysis of L. rhamnosus BHN-LAB 76 in the P. thunbergiana fermentation process by the Realtime PCR.
표 Table 1. Quantification of L. rhamnosus BHN-LAB 76 in the P. thunbergiana fermentation process using the Lactobacillus sp. 16S rRNA gene by the Real-time PCR
표 Table 2. Total polyphenol and total flavonoid contents of extracts from the fermented P. thunbergiana extracts with L. rhamnosus BHN-LAB 76
그림 Fig. 3. Superoxide dismutase like activity of extracts from the fermented P. thunbergiana extracts with L. rhamnosus BHN-LAB 76. SOD-like activity was measured at 420 nm. NF; Non-fermented P. thunbergiana extracts, F; fermented P. thunbergiana extracts by L. rhamnosus BHNLAB 76, C; vitamin C 500 ppm.
그림 Fig. 4. DPPH radical scavenging activity of extracts from the fermented P. thunbergiana extracts with L. rhamnosus BHNLAB 76. DPPH radical scavenging activity was measured at 517 nm. Percent scavenging of the DPPH free radical was quantified compared to the control. NF; Non-fermented P. thunbergiana extracts, F; fermented P. thunbergiana extracts by L. rhamnosus BHN-LAB 76, C; vitamin C 500 ppm.
그림 Fig. 5. ABTS radical activity of extracts from the fermented P. thunbergiana extracts with L. rhamnosus BHN-LAB 76. SOD-like activity was measured at 734 nm. NF; Non-fermented P. thunbergiana extracts, F; fermented P. thunbergiana extracts by L. rhamnosus BHN-LAB 76, C; vitamin C 500 ppm.
그림 Fig. 6. Reducing power of extracts from the fermented P. thunbergiana extracts with L. rhamnosus BHN-LAB 76. Reducing power was measured at 700 nm. NF; Non-fermented P. thunbergiana extracts, F; fermented P. thunbergiana extracts by L. rhamnosus BHN-LAB 76, C; vitamin C 500 ppm.

AI 본문요약
AI-Helper

* AI 자동 식별 결과로 적합하지 않은 문장이 있을 수 있으니, 이용에 유의하시기 바랍니다.

제안 방법

Lactobacillus sp. 16S rRNA gene 정량 PCR은 Lacto-F/R를 이용하였고[4], 반응조건은 95℃에서 15 min 동안 pre-denaturation 시켜, 95℃에서 30 sec denaturation, 67℃에서 30 sec annealing, 72℃에서 30 sec extension후 fluorescence를 측정하고 45 cycles을 수행하였다. 그리고 final extension은 72℃에서 5 min동안 수행하였다.
250 ppm, 500 ppm, 1,000 ppm 농도로 희석한 각 시험 물질을 20 μl를 취하여 70% ethanol 80 μl, 5% Sodium nitrite (NaNO2) 6 μl와 혼합하여 5분간 상온에서 반응한 후, 10% Aluminum Chloride Hexahydrate (AlCl3 6H2O) 12 μl를 첨가하여 상온에서 6분간 반응하였다.
Cloning은 All-in-one PCR cloningkit (Biofact, Korea)를 이용하였고, manufacturer’s protocol을 따라 수행하여 16S rRNA gene의 염기서열을 결정하였다.
각 시험 물질 10 μl를 취하여 10% Sodium carbonate (Na₂CO₃) 200 μl, 50% Folinciocalteu reagent 10 μl와 혼합하여 상온에서 30분간 반응 후 760 nm에서 흡광도를 측정하였다. Gallic acid를 표준 물질로 사용하여 얻어진 표준 곡선으로 총 폴리페놀 함량(ug/ml)을 계산하였다.
coil DH5 α의 total DNA를 주형으로 PCR을 수행하여 350 bp의 PCR 산물을 얻었다[4]. PCR 산물은 All-in-one vector (Biofact, Korea)에 cloning하였으며, plasmid DNA는 HiGene^TM Plasmid Mini Prep Kit (Biofact, Korea)를 이용하여 추출하였다. 염기서열분석은 M13-20F (All-in-one Vector Systems manual)를 이용하여 분석하였고, BLAST search를 통해 확인하였다.
PCR 증폭산물은 1.2% agarose gel에 loading한 후 약 1,500 bp 크기의 band를 잘라, HiGeneTM Gel & PCR Purification Solution Kit (Biofact, Korea)를 이용하여 정제하여 cloning 하였다.
Rutin을 표준 물질로 사용하여 표준 곡선을 작성하고 이를 따라 총 플라보노이드 함량(ug/ml)을 계산하였다.
각각의 primer를 이용하여 50 μl 안에 1× PCR buffer, 20 mM MgCl2, 40mM dNTP mixture, 각 primer (1 μM), template DNA와 0.5U Taq polymerase를 첨가하여 PCR을 수행하였다.
Cloning은 All-in-one PCR cloningkit (Biofact, Korea)를 이용하였고, manufacturer’s protocol을 따라 수행하여 16S rRNA gene의 염기서열을 결정하였다. 결정된 염기서열은 CAP3 sequence assembly program (http://doua.prabi.fr/software/cap3)을 통해 assemble 하여 1,500 bp의 16S rRNA gene을 염기서열을 확인하였으며, NCBI (www.ncbi.nlm.nih.gov)의 GenBank database를 이용하여 BLAST search를 통해 분석하였다. 또한, Phylogenetic tree는 ClusterX를 이용하여 미생물간 상동성을 분석하고, MEGA 5.
이 과정에서 생성된 H2O2는 catalase에 의해 물 분자와 산소 분자로 전환되어 산화로부터 생체를 보호하는 기능을 하는 것으로 알려져 있다[19, 35, 43]. 따라서 이 실험에서는 생체 항산화 방어기전 중 효소적 방어 기전의 하나로 superoxide radical을 환원시켜서 산화와 노화로부터 보호하는 SOD 유사활성 측정을 pyrogallol의 자동 산화 반응을 이용하여 superoxide anion radical 소거 여부를 조사하였다. 발효하지 않은 칡 추출물 250 ppm, 500 ppm, 1,000ppm에서 각각 3.
발효하지 않은 칡과 유산균에 의해 발효된 칡은 각각 200g에 물 1 l를 이용하여 80℃에서 24시간 열수 추출하였으며, 3회에 걸쳐 추출을 수행하였다. 또한 추출된 추출물은 filter paper로 여과한 후 Rotary evaporator (N-1100 and N-1000; EYELA Co., Japan)을 이용하여 감압 농축하고 동결 건조(FD8512, ilshinBioBase Co. Ltd.)하여 실험에 사용하여, 발효 전후 각각 17.5%와 17.7% 회수하여 본 실험에 사용하였다.
또한, DNA 농도는 NanoDrop ND-2000 (Thermo Scientific, USA)을 이용하여 1 ng/μl를 분석에 이용하였다[24].
2℃씩 증가시키면서 fluorescence를 측정하였다[24]. 또한, 유전자 정량을 위해서 표준 유전자를 serial dilutions하여 Real-time-PCR을 수행하였으며, 정량을 위한 표준곡선은 y=-4.073x + 48.617 (R2=0.9918)로 확인되어 유산균 정량에 이용 하였다. 또한, DNA 농도는 NanoDrop ND-2000 (Thermo Scientific, USA)을 이용하여 1 ng/μl를 분석에 이용하였다[24].
발효하지 않은 칡과 유산균에 의해 발효된 칡은 각각 200g에 물 1 l를 이용하여 80℃에서 24시간 열수 추출하였으며, 3회에 걸쳐 추출을 수행하였다. 또한 추출된 추출물은 filter paper로 여과한 후 Rotary evaporator (N-1100 and N-1000; EYELA Co.
본 연구에서는 시중에 판매되는 칡 천연물을 이용하여 L.rhamnosus BHN-LAB 76으로 발효 후 총 폴리페놀 및 총 폴라보노이드 함량과 항산화 활성(SOD 유사활성, DPPH radical소거활성, ABTS radical 소거활성)을 분석하여 발효 전후의 변화를 확인하였다. L.
본 연구에 사용된 미생물은 김치로부터 분리 및 동정한 유산균을 사용하였다. 분리 유산균의 미생물 동정은 16S rRNA gene분석을 통해 수행하였으며, 배양액 1.5 ml를 취해 Fast DNA Spin kit for Soil (MP bio, USA)을 이용하여 total DNA를 추출하였다. 추출된 total DNA의 농도와 순도는 NanoDrop ND-2000 (Thermo Scientific, USA)을 이용하여 결정하였으며, 시료의 농도는 50 ng/μl 이상, 순도는 1.
시간에 따른 유산균의 크기를 정량적으로 평가하기 위해 qPCR을 수행하였다. 유산균의 정량적 평가를 위해 Lacto-F (5'-GCA GCA GTA GGG AAT CTT CCA-3')와 Lacto-R (5'-GCA TTY CAC CGC TAC ACA TG-3') primer를, E.
PCR 산물은 All-in-one vector (Biofact, Korea)에 cloning하였으며, plasmid DNA는 HiGene^TM Plasmid Mini Prep Kit (Biofact, Korea)를 이용하여 추출하였다. 염기서열분석은 M13-20F (All-in-one Vector Systems manual)를 이용하여 분석하였고, BLAST search를 통해 확인하였다. 염기서열이 확인된 plasmid DNA는 Real-time PCR (CFX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System, Bio-Rad, USA)를 이용하여 melting curve 분석 후 정량분석을 위한 표준 유전자(artificial standard clone)로 사용하였다.
유산균의 정량적 평가를 위해 Lacto-F (5'-GCA GCA GTA GGG AAT CTT CCA-3')와 Lacto-R (5'-GCA TTY CAC CGC TAC ACA TG-3') primer를, E. coil DH5 α의 total DNA를 주형으로 PCR을 수행하여 350 bp의 PCR 산물을 얻었다[4].
정량 PCR을 위해 Real-time PCR과 iTaqTM SYBR® Green Supermix with ROX (Bio-Rad, USA)를 이용하였다.
총 플라보노이드 함량의 측정은 flavonoid에 알칼리를 작용 시켜 측정하였다[64]. 250 ppm, 500 ppm, 1,000 ppm 농도로 희석한 각 시험 물질을 20 μl를 취하여 70% ethanol 80 μl, 5% Sodium nitrite (NaNO₂) 6 μl와 혼합하여 5분간 상온에서 반응한 후, 10% Aluminum Chloride Hexahydrate (AlCl₃ 6H₂O) 12 μl를 첨가하여 상온에서 6분간 반응하였다.
본 연구에 사용한 칡은 경북 영천에서 채취하여 제품화된 것을 구입하여 사용하였다. 추출 및 발효연구를 위해서 homogenizer를 이용하여 분쇄한 후 0.5 cm mesh를 이용하여 걸러 실험에 사용하였다.
추출물의 DPPH radical 소거 활성능 측정은 DPPH (1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl)에 대한 수소 공여 효과로 측정하였다[3]. 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)는 빛을 차단한 상태에서 99% Ethanol을 이용하여 2 mM 농도가 되도록 희석하여 사용하였다.
칡 추출물의 ABTS radical 소거능 측정은 7.4 mM ABTS와 2.6 mM potassium persulfate 용액을 혼합하고 24시간 차광 및 정치하여 ABTS 용액을 제조하여 측정하였다[11]. ABTS 용액 970 μl와 추출물 30 μl를 혼합하여 암소에서 30 분간 방치한 후, 734 nm 파장에서 흡광도를 측정하였다.
페놀성 화합물 분자 내 phenolic hydroxyl기가 효소 단백질 등 큰 분자들과 수소를 공유하며 결합하기 때문에 활성산소의 효과적인 제거와 산화 및 노화 억제의 기능을 하며, 플라보노이드는 폴리페놀계 화합물 중 하나로 항산화 활성과 더불어 다양한 생리활성 기능을 한다고 알려져 있다[13, 33, 43, 52]. 칡의 발효 전 후의 총 폴리페놀과 플라보노이드의 함량을 측정하여, BHN-LAB 76의 생물전환능을 확인하였다(Table 2). 총 폴리페놀 함량은 발효하지 않은 추출물 1,000 ppm 내 172.
칡의 발효를 위해 L. rhamnosus BHN- LAB76을 접종한 후 6, 12, 24, 48, 72, 96시간에 각각 시료를 채취하여 L. rhamnosus BHN-LAB 76의 16S rRNA gene copy를 분석한 결과, 각 채취 시간별로 1.86×106±4.77×105 copy · molecul/ml, 2.75×106±5.25×105 copy·molecul/ml, 5.49×106±6.58×105 copy·molecul/ml, 1.53×107±1.38×106 copy·molec-ul/ml, 1.88×107±1.28×106 copy·molecul/ml, 1.86×10±1.56×106 copy·molecul/ml로 미생물 성장을 확인하였다(Fig. 2,Table 1).

대상 데이터

16S rRNA gene 분석은 27F (5'-AGA GTT TGA TCM TGG CTC AG-3')와 1541R (5'-AAG GAG GTG ATC CAN CCR CA-3')을 사용하였다[7].
본 연구에 사용된 미생물은 김치로부터 분리 및 동정한 유산균을 사용하였다. 분리 유산균의 미생물 동정은 16S rRNA gene분석을 통해 수행하였으며, 배양액 1.
본 연구에 사용한 칡은 경북 영천에서 채취하여 제품화된 것을 구입하여 사용하였다. 추출 및 발효연구를 위해서 homogenizer를 이용하여 분쇄한 후 0.
본 연구에서는 다량의 생리활성물질을 포함하는 칡의 항산화 효과를 증가시키기위해 김치로 부터 분리된 GRAS 미생물인 L. rhamnosus BHN-LAB 76을 이용해 발효하였다. 발효된 칡으로부터 추출된 발효 추출물의 총 폴리페놀 및 플라보노이드, SOD 유사활성능, DPPH radical 소거활성능, ABTS radical 소거활성능을 탐색한 결과, 발효되지 않은 칡 추출물보다 L.
총 폴리페놀 함량의 측정은 Folin-Denis 방법에 따라 측정 하였다[51]. 천연물로 추출물은 250 ppm, 500 ppm, 1,000 ppm 농도로 희석하여 실험에 사용하였다. 각 시험 물질 10 μl를 취하여 10% Sodium carbonate (Na₂CO₃) 200 μl, 50% Folinciocalteu reagent 10 μl와 혼합하여 상온에서 30분간 반응 후 760 nm에서 흡광도를 측정하였다.
칡의 발효를 위해 사용된 유산균은 김치로부터 분리한 유산균을 이용하였다. 유산균은 MRS 배지(Difco Laboratories Inc.

데이터처리

모든 실험은 최소 3회 반복하여 진행하였으며, 각 시료들의 실험 결과는 평균 ± 표준편차로 나타내었으며, 각 실험 결과의 통계적 유의성 검토는 시료가 포함되지 않은 대조구와 비교하여 student’s에 의해 판정하였으며, F값이 0.05 또는 0.01 미만 일 때 유의성이 있다고 판단하였다.

이론/모형

gov)의 GenBank database를 이용하여 BLAST search를 통해 분석하였다. 또한, Phylogenetic tree는 ClusterX를 이용하여 미생물간 상동성을 분석하고, MEGA 5.0의 neighbor-joining method를 이용하여 유전적 계통분류를 수행하였다[53].
염기서열이 확인된 plasmid DNA는 Real-time PCR (CFX96 Touch™ Real-Time PCR Detection System, Bio-Rad, USA)를 이용하여 melting curve 분석 후 정량분석을 위한 표준 유전자(artificial standard clone)로 사용하였다.
총 폴리페놀 함량의 측정은 Folin-Denis 방법에 따라 측정 하였다[51]. 천연물로 추출물은 250 ppm, 500 ppm, 1,000 ppm 농도로 희석하여 실험에 사용하였다.

성능/효과

2,Table 1). BHN-LAB 76의 성장은 접종 초기부터 12시까지 낮은 성장을 보였으며, 접종 12시간 이후에 미생물성장이 급격하게 증가하는 것을 확인하였다. 또한, 접종 48시간 이후 BHN-LAB 76의 성장이 둔화되는 것을 확인하였다.
95 ug/100 g으로 분석되었다. BHNLAB 76을 이용한 칡의 미생물 발효를 통해 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량이 발효 전 시료보다 증가되는 것을 확인하였다. 총 폴리페놀 함량은 발효 후 약 110% 증가되었으며, 총 플라보이드 함량은 약 122%정도 증가하였다.
rhamnosus BHN-LAB 76으로 발효 후 총 폴리페놀 및 총 폴라보노이드 함량과 항산화 활성(SOD 유사활성, DPPH radical소거활성, ABTS radical 소거활성)을 분석하여 발효 전후의 변화를 확인하였다. L. rhamnosus BHN-LAB 76으로 발효 전 추출물과 발효 후 추출물내의 총 폴리페놀과 플라보이드가 각각 110%와 122%로 증가되었다. 또한, 항산화 활성을 측정한 결과, SOD 유사활성 213%, DPPH radical 소거활성 190%, ABTS radical 소거활성 107%가 증가되는 것을 확인하였다.
ceti,L. amylotrophicus 등의 species 수준에서 구별되는 것을 확인하여 L. rhamnosus BHN-LAB 76이라 명명하였다.
그리고, BHN-LAB 76으로 발효한 칡 추출물 1,000 ppm, 500 ppm, 250 ppm에 포함된 총 폴리페놀의 함량은 각각 183.75±18.19 ug/100 g, 88.83±2.98 ug/100 g, 40±6.34ug/100 g으로 분석되었다.
또한, L. rhamnosus BHN-LAB 76으로 생물전환과정을 거친 발효 칡 추출물의 환원력은 250 ppm에서 38.27%±2.27%, 500ppm에서 65.28%±2.25%, 1,000 ppm에서 85.59%±3.53%로 확인되었으며, 양성대조구인 vitamin C 500 ppm의 환원력은 97.95%±1.80%로 확인되었다.
식물류에 널리 존재하는 phenolic compound는 항사화능을 포함한 다양한 생물학적 효능을 나타내며, 이들의 주요 효능은 산화환원력에 의한 것이며, 총 폴리페놀의 함량이 높을수록 항산화능이 증가한다고 보고되었다[12, 41]. 또한, 본 연구에서도 생물전환을 통해 총 폴리페놀과 총 플라보노이드 함량의 증가와 환원력이 증가되는 것을 확인하였으며, 생물전환을 통해 항산화효과를 증가시킬 수 있을 것이라 판단하였다.
1). 또한, 분석된 16S rRNA gene sequence를 이용하여 유전적 계통도를 분석한 결과, Lactobacillaceae에 속하고, L. acidifarinae, L. zymae, L. parabrevis, L. plantarum, L.ceti,L. amylotrophicus 등의 species 수준에서 구별되는 것을 확인하여 L.
BHN-LAB 76의 성장은 접종 초기부터 12시까지 낮은 성장을 보였으며, 접종 12시간 이후에 미생물성장이 급격하게 증가하는 것을 확인하였다. 또한, 접종 48시간 이후 BHN-LAB 76의 성장이 둔화되는 것을 확인하였다. 이는, L.
또한, 총 폴라보노이드 함량은 발효하지 않은 칡 추추물 1,000 ppm, 500 ppm, 250 ppm내에 각각 57.83±3.09 ug/100 g, 26.00±11.38 ug/100 g, 10.08±4.42ug/100 g을 포함하는 것으로 분석되었으며, BHN-LAB 76으로 발효한 칡 추출물 1,000 ppm, 500 ppm, 250 ppm에 포함된 총 플라보노이드 함량은 각각 74.00±2.70 ug/100 g, 30.17±7.32 ug/100 g, 11.59±4.95 ug/100 g으로 분석되었다.
rhamnosus BHN-LAB 76으로 발효 전 추출물과 발효 후 추출물내의 총 폴리페놀과 플라보이드가 각각 110%와 122%로 증가되었다. 또한, 항산화 활성을 측정한 결과, SOD 유사활성 213%, DPPH radical 소거활성 190%, ABTS radical 소거활성 107%가 증가되는 것을 확인하였다.식물체 내의 많은 생리활성물질들은 배당체의 형태로 존재하며, 이를 보완하고 생리활성능을 증가시키기 위해서는 배당체 형태에서 비당체 형태로 전환하는 생물전환(bioconverstion)공정 기술 및 가공기술이 필요하다.
rhamnosus BHN-LAB 76을 이용해 발효하였다. 발효된 칡으로부터 추출된 발효 추출물의 총 폴리페놀 및 플라보노이드, SOD 유사활성능, DPPH radical 소거활성능, ABTS radical 소거활성능을 탐색한 결과, 발효되지 않은 칡 추출물보다 L.rhamnosus BHN-LAB 76으로 생물전환된 칡 추출물에서 보다높은 항산화 효과를 확인하였다. 이런 결과를 통해 L.
발효전 칡 추출물의 환원력은 250 ppm, 500 ppm, 1,000 ppm의 환원력은 각각 22.25%±3.19%, 45.69%±2.23%, 65.28%±3.28%로 확인되었다.
80%로 확인되었다. 발효하지 않은 추출물 1,000ppm의 환원력은 양성대조구에 비해 약 66.62%로 확인되었으며, 발효 칡 추출물의 환원력은 87.38%로 확인되었고, 생물전환을 통해 약 20%정도 환원력이 증가된 것을 확인하였다. 이러한 환원력의 증가는 총 폴리페놀 함량과 연관이 있다고 알려졌다[8, 30].
발효하지 않은 칡 추출물 250 ppm, 500 ppm, 1,000 ppm에서 각각 4.13±1.19%, 4.38±1.23%, 13.71±0.28%의 DPPH radical 소거활성능을 보였으며,BHN-LAB 76으로 발효한 칡 추출물 250 ppm, 500 ppm, 1,000ppm에서 각각 5.03±1.77%, 10.57±0.49%, 28.42±2.26%의DPPH radical 소거활성능을 보이며 평균 190% 증가된활성을 확인하였다(Fig. 4).
발효하지 않은 칡 추출물 250 ppm, 500 ppm, 1,000 ppm의 ABTS radical 소거활성은 각각 54.6±2.19%, 79.5±1.23%, 91.3±0.28%의 ABTS radical 소거활성능을 보였으며, BHN-LAB 76으로 발효한 칡 추출물 250 ppm, 500 ppm, 1,000 ppm의 ABTS radical 소거활성능은 각각 60.1±2.77%, 82.7±0.49%, 96.3±1.53%의 ABTS radical 소거활성능을 확인하였으며, 평균 약 107%정도로 매우 미약하게 증가된 것을 확인하였다(Fig. 5).
발효하지 않은 칡 추출물 250 ppm, 500 ppm, 1,000ppm에서 각각 3.25±1.14%, 4.45±1.07%, 8.49±0.31%의 SOD 유사활성을 보였으며, BHN-LAB 76으로 발효한 칡 추출물 250ppm, 500 ppm, 1,000 ppm에서 각각 6.44±1.09%, 12.69±0.54%, 13.37±1.15%의 SOD 유사활성을 보이며 평균 213% 증가된 활성을 보였다(Fig. 3).
시간에 따른 발효배양액 내의 L. rhamnosus BHN-LAB 76의 성장을 Real-time PCR을 통해 확인하였으며, 초기 접종한 후 BHN-LAB 76은 1.90×106±5.28×105 copy·molecul/ml으로 확인되었다(Table 1).
양성대조군인 vitamin C보다는 낮게 나타났지만, 미생물 과정을 통한 발효산물 추출물은 발효하지 않은 칡 추출물에 비교해 증가된 것을 확인할 수 있다.
4). 이 결과를 통해 미생물 발효과정을 통한 발효한 칡 추출물은 발효하지 않은 칡 추출물에 비교해 높은 DPPH radical 소거활성능을 갖는다는 것을 확인할 수 있다.
rhamnosus BHN-LAB 76으로 생물전환된 칡 추출물에서 보다높은 항산화 효과를 확인하였다. 이런 결과를 통해 L. rhamnosus BHN-76을 이용한 칡의 발효가 가능한 것을 확인하였으며,유산균 발효가 칡의 항산화능 증대에 효과적인 것을 확인하였으며, 미생물에 의한 생물전환기술은 생리활성을 증대시키기 위한 매우 유용한 기술임을 확인하였다. 본 연구를 기반으로한 기능성 식품 또는 화장품 소재로의 개발 및 응용이 가능할 것으로 기대된다.
BHNLAB 76을 이용한 칡의 미생물 발효를 통해 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드 함량이 발효 전 시료보다 증가되는 것을 확인하였다. 총 폴리페놀 함량은 발효 후 약 110% 증가되었으며, 총 플라보이드 함량은 약 122%정도 증가하였다. 그러나, 증가된 총 폴리페놀과 총 플라보노이드의 함량의 차이를 보였다.
총 폴리페놀 함량은 발효하지 않은 추출물 1,000 ppm 내 172.50±5.34 ug/ 100 g, 500 ppm에는 78.08±12.39 ug/100 g,250 ppm에는 46.08±2.98 ug/100 g이 포함하고 있는 것으로 분석되었다.
추출된 total DNA의 농도와 순도는 NanoDrop ND-2000 (Thermo Scientific, USA)을 이용하여 결정하였으며, 시료의 농도는 50 ng/μl 이상, 순도는 1.8~2.0으로 본 연구를 수행하기에 적합하였다.
칡의 발효를 위해 사용한 유산균은 고성이씨 종갓집 김장김치로부터 분리하였으며, 선발 균주의 16S rRNA gene을 분석한 결과 Lactobacillus rhamnosus와 99% 유사도를 갖는 것으로 분석되었다(Fig. 1). 또한, 분석된 16S rRNA gene sequence를 이용하여 유전적 계통도를 분석한 결과, Lactobacillaceae에 속하고, L.

후속연구

특히 미생물에 의한 생물전환은 epimerization, hydration, hydroxylation과 같은 부가적 반응이 적은 장점이 있다. 따라서, 생물전환공정에 의한 비배당체 전환 물질은 면역활성 및 생리활성이 증가된 기능성물질로 활용 할 수 있을 것이다[28, 44, 58]. 또한, 생물전환은 생체 및 생촉매의 기능을 활용하여 의약품, 의약품 원료물질, 비타민, 유용아미노산, 인지질, 식품원료, 농업용 화학제품 등을 포함한 다양한 화학제품의 생산에 활용할 수 있는 기술이다[25].
rhamnosus BHN-76을 이용한 칡의 발효가 가능한 것을 확인하였으며,유산균 발효가 칡의 항산화능 증대에 효과적인 것을 확인하였으며, 미생물에 의한 생물전환기술은 생리활성을 증대시키기 위한 매우 유용한 기술임을 확인하였다. 본 연구를 기반으로한 기능성 식품 또는 화장품 소재로의 개발 및 응용이 가능할 것으로 기대된다.

질의응답

핵심어	질문	논문에서 추출한 답변
	폴리페놀계 화합물의 특징은?	폴리페놀류 화합물은 과일 및 엽채류 등의 다양한 식물에 풍부하게 함유된 분자 내에 다량의 히드록실기(-OH)를 함유하여 항산화 효과뿐만 아니라 항암, 콜레스테롤 저해, 정장 작용등의 생리활성 기능이 보고되었다[26, 33, 46]. 페놀성 화합물 분자 내 phenolic hydroxyl기가 효소 단백질 등 큰 분자들과 수소를 공유하며 결합하기 때문에 활성산소의 효과적인 제거와 산화 및 노화 억제의 기능을 하며, 플라보노이드는 폴리페놀계 화합물 중 하나로 항산화 활성과 더불어 다양한 생리활성 기능을 한다고 알려져 있다[13, 33, 43, 52].
	칡의 화합물의 특징은?	칡의 화합물은 동양 전통 의학에서 매우 중요한 콩과 식물로서 다량의 이소플라본을 함유한다고 보고되었다. 그러나, 칡의 주요 함유 이소플라본은 생물학적으로 이용가능성이 낮기 때문에, 생물학적 이용가능성을 증대시키기 위해서는 가수분해나 ${\beta}$-glucosidase를 사용하여 생물전환을 통해 이용 효율성을 증대시킬 수 있다.
	시간에 따른 유산균의 크기를 정량적으로 평가하기 위해 무엇을 하는가?	시간에 따른 유산균의 크기를 정량적으로 평가하기 위해 qPCR을 수행하였다. 유산균의 정량적 평가를 위해 Lacto-F (5'-GCA GCA GTA GGG AAT CTT CCA-3')와 Lacto-R (5'-GCA TTY CAC CGC TAC ACA TG-3') primer를, E.

참고문헌 (64)

Ann, Y. G. 2011. Probiotic lactic acid bacteria. Kor. J. Food Nutr. 24, 817-832.

원문보기 상세보기
Aruoma, O. I. 1998. Free radicals, oxidative stress, and antioxidants in human health and disease. JAOCS 75, 199-212.

상세보기
Blois, M. S. 1958. Antioxidant determinations by the use of a stable free radical. Nature 121, 1999.
Castillo, M., Martin-Orue, S. M., Manzanilla, E. G., Badiola, I., Martin, M. and Gasa, J. 2005. Quantification of total bacteria, enterobacteria and lactobacilli populations in pig digesta by real-time PCR. Vet. Microbiol. 114, 165-170.
Cherdshewasart, W., Subtang, S. and Dahlan, W. 2007. Major isoflavonoid contents of the phytoestrogen rich-herb Pueraria mirifica in comparison with Pueraria lobata. J. Pham. Biomed. Anal. 43, 428-434.

상세보기
Cho, Y. H., Imm, J. Y., Kim, H. Y., Hong, S. G., Hwang, S. J., Park, D. J. and Oh, S. 2009. Isolation and partial characterization of isoflavone transforming Lactobacillus plantarum YS712 for potential probiotic use. Kor. J. Food Sci. An. Resour. 29, 640-646.

원문보기 상세보기
Forney, L. J., Zhou, X. and Brown, C. J. 2004. Molecular microbial ecology: land of the one-eyed king. Curr. Opin. Microbiol. 7, 210-220.

상세보기
Gheldof, N. and Engeseth, N. J. 2002. Antioxidant capacity of honeys from various floral sources based on the determination of oxygen radical absorbance capacity and inhibition of in vitro lipoprotein oxidation in human serum J. Agric. Food Chem. 50, 3050-3055.

상세보기
Halliwell, B., Aeschbach, R., Lliger, J. and Aruoma, O. I. 1995. The characterization of antioxidants. Food Chem. Toxicol. 33, 601-617.

상세보기
Han, S. H., Kim, J. B., Min, S. G. and Lee, C. H. 1995. The effect of Puerariae radix catechins administration on liver function in carbon tetrachloride-treated rats. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 25, 713-719.
Han, S. R., Noh, M. Y., Lee, J. H. and Oh, T. J. 2015. Evaluation of antioxidant and antimicrobial activities of solvent extracts from Coriolus versicolor. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 44, 1793-1798.

원문보기 상세보기
Holasova, M., Fiedlerova, V., Smrcinova, H., Orsak, M., Lachman, J. and Vavreinova, S. 2002. Buckwheat-the source of antioxidant activity in functional foods. Food Res. Int. 35, 207-211.

상세보기
Hyon, J. S., Kang, S. M., Han, S. W., Kang, M. C., Oh, M. C., Oh, C. K., Kim, D. W., Jeon, Y. J. and Kim, S. H. 2009. Flavonoid component changes and antioxidant activities of fermented Citrus grandis Osbeck peel. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 38, 1310-1316.

원문보기 상세보기
Imai, J., Ide, N., Nagae, S., Moriguchi, T., Matsuura, H. and Itakura, Y. 1994. Antioxidant and radical scavenging effects of aged garlic extract and its constituents. Planta Med. 60, 417-420.

상세보기
Ioku, K., Pongpiriyadach, Y., Konishi, Y., Takei, Y., Nakatani, N. and Terao, J. 1998. ${\beta}$ -Glucosidase activity in the rat small intestine toward quercitin monoglucosides. Biosci. Biotechnol. Biochem. 62, 1425-1431.

상세보기
Ito, N., Hirose, M., Fukushima, S., Tsuda, H., Shirai, T. and Tatematsu, M. 1986. Studies on antioxidants: Their carcinogenic and modifying effects on chemical carcinogenesis. Food Chem. Toxicol. 24, 1071-1082.

상세보기
Ivar do Sul, J. A. and Costa, M. F. 2014. The present and future of microplastic pollution in the marine environment. Environ. Pollut. 185, 352-364.

상세보기
Izumi, T., Piskula, M. K., Osawa, S., Obata, A., Tobe, K., Saito, M., Kataoka, S., Kubota, Y. and Kikuchi, M. 2000. Soy isoflavone aglycones are absorbed faster and in higher amounts than their glucosides in humans. J. Nutr. 130, 1695-1699.

상세보기
Jeong, H. J., Park, S. B., Kim, S. A. and Kim, H. K. 2007. Total polyphenol content and antioxidative activity of wild grape (Vitis coignetiae) extracts depending on ethanol concentrations. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 36, 1491-1496.

원문보기 상세보기
Jung, H. K., Kim, E. Y., Yae, H. S., Choi, S. J., Jung, J. Y. and Juhn, S. L. 2000. Cholesterol-lowering effect of lactic acid bacteria and fermented milks as probiotic functional foods. Food Ind. Nutr. 5, 29-35.
Jung, T. D., Shin, G. H., Kim, J. M., Choi, S. I., Lee, J. H., Lee, S. J., Heo, I. Y., Park, S. J., Oh, S. K., Woo, K. S., Lim, J. K. and Lee, O. H. 2016. Isoflavone, ${\beta}$ -glucan content and antioxidant activity of defatted soybean powder by bioconversion with Lentinula edodes. J. Food Hyg. Saf. 31, 386.

원문보기 상세보기
Kaufman, P. B., Duke, J. A., Brielmann, H., Boik, J. and Hoyt, J. E. 1997. A comparative survey of leguminous plants as sources of the isoflavones, genistein and daidzein: Implications for human nutrition and health. J. Altern. Complement. Med. 3, 7-12.

상세보기
Keung, W. M. and Vallee, B. L. 1993. Daidzein a potent selective inhibitor of human mitochondrial aldehyde dehydrogenase. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 90, 1247-1251.

상세보기
Kim, B. H., Jang, J. O., Joa, J. H., Kim, J. A., Song, S. Y., Lim, C. K., Kim, C. H., Jung, Y. B., Seong, K. C., Kim, H. S. and Moon, D. G. 2017. A comparison of the microbial diversity in Korean and Chinese post-fermented teas. Microbiol. Biotechnol. Lett. 45, 71-80.

원문보기 상세보기
Kim, C. K. 2001. Ginseng sponins processing by using bioconversion technology. The Korean Ginseng Research and Industry 6, 3-13.
Kim, E. J., Choi, J. Y., Yu, M. R., Kim, M. Y., Lee, S. H. and Lee, B. H. 2012. Total polyphenols, total flavonoid contents, and antioxidant activity of Korean natural and medicinal plants. Kor. J. Food Sci. Technol. 44, 337-342.

원문보기 상세보기
Kim, H. Y., Hong, J. H., Kim, D. S., Kang, K. J., Han, S. B., Lee, E. J., Chung, H. W., Song, K. H., Sho, K. A., Kwack, S. J., Kim, S. S., Park, K. L., Lee, S. K., Kim, M. C., Kim, C. M. and Song, I. S. 2003. Isoflavone content and estrogen activity in arrowroot Puerariae Radix. Food Sci. Biotechnol. 12, 29-35.

상세보기
Kim, J. S., Lee, J. H., Surh, J., Kang, S. A. and Jang, K. H. 2016. Aglycone isoflavones and exopolysaccharides produced by Lactobacillus acidophilus in fermented soybean paste. Prev. Nutr. Food Sci. 21, 117-123.

원문보기 상세보기
Kim, M. H. 2015. Biological activity of ethanol extracts from fermented Opuntia humifusa with 3 different mushroom mycelia. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 28, 620-627.
Kim, S. I., Sim, K. H., Ju, S. Y. and Han, Y. S. 2009. A Study on antioxidative and hypoglycemic activities of Omija (Schizandra chinensis Baillon) extract under variable extract conditions. Kor. J. Food Nutr. 22, 41-47.
Larson, R. A. 1988. The antioxidants of higher plants. Phytochemistry 27, 969-978.

상세보기
Lee, K. J., Gu, M. J., Roh, J. H., Jung, P., M. and Ma, J. Y. 2013. Quantitative analysis of bioconversion constituents of insampeadock-san using various fermented bacteria. Yakhak Hoeji 57, 167-172.
Lee, M. Y., Yoo, M. S., Whang, Y. J., Jin, Y. J., Hong, M. H. and Pyo, Y. H. 2012. Vitamin C, total polyphenol, flavonoid contents and antioxidant capacity of several fruit peels. Kor. J. Food Sci. Technol. 44, 540-544.

원문보기 상세보기
Lee, W. H., Han, S. R., Yu, S. C. and Oh, T. J. 2018. Comparison of physiological activities of Flammulina velutipes according to solvent extractions. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 47, 83-89.

상세보기
Lim, J. D., Cha, H. S., Choung, M. G., Choi, R. N., Choi, D. J. and Youn, A. R. 2004. Antioxidant activities of acidic ethanol extract and the anthocyanin rich fraction from Aronia melanocarpa. Kor. J. Food Cook Sci. 30, 573-578.
Linares, D. M., Gomez, C., Renes, E., Fresno, J. M., Tornadijo, M. E., Ross, R. P. and Stanton, C. 2017. Lactic acid bacteria and Bifidobacteria with potential to design natural biofunctional health-promoting dairy foods. Front. Microbiol. 8, 846.

상세보기
Ljungh, A. and Wadstrom, T. 2006. Lactic acid bacteria as probiotics. Curr. Issues Intest. Microbiol. 7, 73-90.

상세보기
Marklund, S. and Marklund, G. 1974. Marklund, S. and Marklund, G. 1974. Involvement of the superoxide anion radical in the autoxidation of pyrogallol and a convenient assay for superoxide dismutase. FEBS J. 47, 469-474.
Murota, K., Shimizu, S., Miyamoto, S., Izumi, T., Obata, A., Kikuchi, M. and Terao, J. 2002. Unique uptake and transport of isoflavone aglycones by human intestinal caco-2 cells:Comparison of isoflavonoids and flavonoids. J. Nutr. 132, 1956-1961.

상세보기
Oh, J., Lee, K. S., Son, H. Y. and Kim, S. Y. 1990. Antioxidative components of Pueraria root. Kor. J. Food Sci. Technol. 22, 793-800.
Osawa, T. 1994 Novel natural antioxidants for utilization in food and biological systems. Japan Scientific Societies, Tokyo, Japan.
Oyaizu, M. 1986. Studies on product of browning reaction prepared from glucose amine. Jap. J. Nutr. 44, 307-315.

상세보기
Park, Y. E., Kim, B. H., Yoon, Y. C., Kim, J. K., Lee, J. H., Kwon, G. S., Hwang, H. S. and Lee, J. B. 2018. Total polyphenol contents, flavonoid contents, and antioxidant activity of roasted-flaxseed extracts based on lactic-acid bacteria fermentation. J. Life Sci. 28, 547-554.
Park, Y. E., Kwon, G. S., Kim, B. H. and Lee, J. B. 2019. Usefulness evaluation for anti-oxidative and whitening effects of the fermented Thistle (Cirsium japonicum) with Lactobacillus rhamnosus BHN-LAB 105. Asian J. Beauty Cosmetol. in press.
Poojary, M. M., Dellarosa, N., Roohinejad, S., Koubaa, M., Tylewicz, U., Gomez-Galindo, F., Saraiva, J. A., Rosa, M. D. and Barba, F. J. 2017. Influence of innovative processing on ${\gamma}$ -aminobutyric acid (GABA) contents in plant food materials. Compr. Rev. Food Sci. F. 16, 895-905.

상세보기
Rice Evans, C., Miller, N. and Paganga, G. 1997. Antioxidant properties of phenolic compounds. Trends Plant Sci. 2, 152-159.

상세보기
Saez-Lara, M. J., Gomez-Llorente, C., Plaza-Diaz, J. and Gil, A. 2015. The role of probiotic lactic acid bacteria and Bifidobacteria in the prevention and treatment of inflammatory bowel disease and other related diseases: A systematic review of randomized human clinical trials. Biomed Res. Int. 2015, 505878.
Saito, M., Sakagami, H. and Fujisawa, S. 2002. Cytotoxicity and apoptosis induction by butylated hydroxyanisole (BHA) and butylated hydroxytoluene (BHT). Anticancer Res. 23, 4693-4701.
Samak, G., Shenoy, R. P., Manjunatha, S. M. and Vinayak, K. S. 2009. Superoxide and hydroxyl radical scavenging actions of botanical extracts of Wagatea spicata. Food Chem. 115, 631-634.

상세보기
Setchell, K. D. R. and Cassidy, A. 1999. Dietary isoflavones:Biological effects and relevance to human health. J. Nutr. 129, 758-767.

상세보기
Smeriglio, A., Galati, E. M., Monforte, M. T., Lanuzza, F., D'angelo, V. and Circosta, C. 2016. Polyphenolic compounds and antioxidant activity of cold-pressed seed oil from finola cultivar of cannabis sativa l. Phytother. Res. 30, 1298-1307.

상세보기
Song, H. S., Kim, H. K., Min, H. O., Choi, J. D. and Kim, Y. M. 2011. Changes in physicochemical and sensory properties of hizikia fusiforme water extract by fermentation of lactic acid bacteria. Kor. J. Fish Aquat. Sci. 44, 104-110.
Tamura, K., Peterson, D., Peterson, N., Stecher, G., Nei, M. and Kumar, S. 2011. MEGA5: Molecular evolutionary genetics analysis using maximum likelihood, evolutionary distance, and maximum parsimony methods. Mol. Biol. Evol. 28, 2731-2739.

상세보기
Tannock, G. W. 1997. Probiotic properties of lactic acid bacteria:plenty of scope for fundamental R&D. Trends Biotechnol. 15, 270-274.

상세보기
Vrijheid, M., Casas, M., Gascon, M., Valvi, D. and Nieuwenhuijsen, M. 2016. Environmental pollutants and child health-A review of recent concerns. Int. J. Hyg. Envir. Heal. 219, 331-342.

상세보기
Waltenberger, B., Halabalaki, M., Schwaiger, S., Adamopoulos, N., Allouche, N., Fiebich, B. L., Hermans, N., Jansen-Durr, P., Kesternich, V., Pieters, L., Schonbichler, S., Skaltsounis, A. L., Tran, H., Trougakos, I. P., Viljoen, A., Wolfender, J. L., Wolfrum, C., Xynos, N. and Stuppner, H. 2018. Novel natural products for healthy ageing from the medi terranean diet and food plants of other global sources-The MediHealth Project. Molecules 23, 1097.

상세보기
Xiaohai, W., C. S., G. and Tsao, G. T. 1998. Bioconversion of fumaric acid to succinic acid by reconbinant E. coli. Appl. Biochem. Biotechnol. 70, 919-928.
Yoon, Y. C., Kim, B. H., Kim, J. K., Lee, J. H., Park, Y. E., Kwon, G. S., Hwang, H. S. and Lee, J. B. 2018. Verification of biological activities and tyrosinase inhibition of ethanol extracts from Hemp Seed (Cannabis sativa L.) fermented with lactic acid bacteria. J. Life Sci. 28, 688-696.
Yoshino, M. and Murakami, K. 1998. nteraction of iron with polyphenolic compounds: application to antioxidant characterization. Anal. Biochem. 257, 40-44.

상세보기
Yu, S. C. and Oh, T. J. 2016. Antioxidant activities and antimicrobial effects of extracts from Auricularia auricula-judae. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 45, 327-332.

원문보기 상세보기
Yuan, J. P., Wang, J. H. and Liu, X. 2007. Metabolism of dietary soy isoflavones to equol by human intestinal microflora - implications for health. Mol. Nutr. Food Res. 51, 765-781.

상세보기
Yun, Y. J., Lee, A., Nguyen, T. M. T., Park, J. T., Yun, S. M. and Kim, J. 2018. Bioconversion of onino extract to improve the bioavailablility of quercetin glycoconjugate. Korean J. Food Sci. Technol. 50, 391-399.
Zeng, C. Y., Zhang, L. Y., Zhou, Y. P. and Fan, L. L. 1982. Pharmacological studies on Pueraria radix. Clin. Med. J. 95, 145-150.
Zhishen, J., Mengcheng, T. and Jianming, W. 1999. The determination of flavonoid contents in mulberry and their scavenging effects on superoxide radicals. Food Chem. 64, 555-559.

상세보기

저자의 다른 논문 :

표제어: PCR

동의어: Packet Collision Rate

용어 설명 출처 목록 (6)

용어 설명: PCR은 세균 특이성이 있는 primer를 이용하여 적은 수의 세균이 있을지라도 쉽게 검출할 수 있는 유용한 방법이며, 이를 이용하여 구강 내 치면세균막이나 타액에서 직접 세균을 검출할 수 있게 되었다[8].

내보내기 구분	파일저장 인쇄 메일전송
구성항목	기본정보 상세정보 관리번호, 논문명, 저널/프로시딩명, 저자 , 발행년, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, 발행기관 관리번호, 논문명, 대등논문명, 저자 , 저널/프로시딩명, 발행기관, 발행년, 발행언어, 권, 호, 시작페이지, 끝페이지, ISBN, ISSN, 주제분야, 키워드, 초록(한글), 초록(영문), 저자(소속기관)
저장형식	Text(ASCII format) Excel format RefWorks Direct Export RIS format (for Reference Manager, ProCite, EndNote), Scholar's Aids, Mendeley
메일정보	받는사람 (필수) @ 보내는사람 (선택) @ 제목 내용 KISTI 검색결과 이메일 서비스
안내	총 건의 자료가 검색되었습니다. 다운받으실 자료의 인덱스를 입력하세요. (1-10,000) 검색결과의 순서대로 최대 10,000건 까지 다운로드가 가능합니다. 데이타가 많을 경우 속도가 느려질 수 있습니다.(최대 2~3분 소요) 다운로드 파일은 UTF-8 형태로 저장됩니다. 파일의 내용이 제대로 보이지 않을실 때는 웹브라우저 상단의 보기 -> 인코딩 -> 자동선택 여부를 확인하십시오. ~ Text(ASCII format) Excel format

연합인증