선택한 단어 수는 입니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
최소 단어 이상 선택하여야 합니다.
선택한 단어 수는 30입니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
최대 10 단어까지만 선택 가능합니다.
제안 방법
- c汕.에서 발현시킨 다음, 넙치에서 공격감염과 ELISA 항체가 분석을 통해 백신의 효능을 알아보았다.
- . 재조합 단백질 백신제조를 위한 항원 유전자의 규명: 항원유전자를 규명하기위해 스쿠티카충에서 mRNA를 분리하여 cDNA libraiy를 제조한 다음, EST 염기서열을 확인 및 분석하고 백신 후보클론의 5, 말단의 염기서열을 확인하였다.
- . 공격 감염을 통한 백신 효능 실험: 백신 10 //g/fish, 50 [ig/fish, 0 陽/fish(감염대조구)을 처리한 넙치 20마리를 각 수조에 분주하고 준비한 스쿠티카충을 각각 3.96X104 cells의 농도로 침지하여 공격감염하였다.
- 항체가 확인: EL%A를 이용하여 항체가를 확인하기 위해, 스쿠티카충의 초음파처리한 액을 코팅 완충액으로 희석하여 96 well plate에 100 成씩 첨가한 후 1시간 반응시키고, 여기에 면역시킨 넙치에서 얻은 혈청을 10배 희석액부터 2단계 희석하여 반응시키고, anti-flounder IgM monoclonal antibody와 반응시켰다. Peroxidase conjugated anti-mouse goat serum을 첨가하여 반응시킨 후 발색하여 492 nm의 파장에서 흡광도를 측정하였다.
- . 재조합 항원 단백질의 분리: 재조합 항원 단백질의 생산을 위해 pMALrc2x 벡터의 EcoRl과 Hmdm 사이트에 항원유전자를 클로닝하여 발현하였다. 발현된 재조합 단백질을 pMAL 단백질 정제 시스템을 이용하여 정 제하고 western blot으로 발현단백 질의 항원성을 확인하였다.
- 재조합 항원 단백질의 분리: 재조합 항원 단백질의 생산을 위해 pMALrc2x 벡터의 EcoRl과 Hmdm 사이트에 항원유전자를 클로닝하여 발현하였다. 발현된 재조합 단백질을 pMAL 단백질 정제 시스템을 이용하여 정 제하고 western blot으로 발현단백 질의 항원성을 확인하였다.
- . 항원 단백질의 아미노산 서열 및 항원단백질의 유전자 확인: 항원단백질의 N-terminal 아미노산 서열을 확인하고 EST에서 얻은 클론과 비교하여 full-length 항원 유전자를 확인하였다.
※ AI-Helper는 부적절한 답변을 할 수 있습니다.