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• 연구 방법
• 연구 결과

제안 방법

• 4 PBq of capacity; AECL, Canada)를 이용하여 최종흡수선량이 50 Gy와 100 Gy가 되도록 실온에서 조사하였다. NAC 처리 및 감마선 조사 후 효모세포로부터 PBS buffer를 이용하여 단백질을 분리한 후 Bradford법을 바탕으로 한 Bio-Rad Protein Assay Kit를 이용하여 단백질 정량을 수행하였다. SOD assay는 DOJINDO사의 SOD Assay Kit-WST를 이용하여 제조사의 assay 방법에 의거하여 수행하였다.
• NAC 처리와 감마선 조사가 효모의 SOD 활성에 주는 영향을 확인하기 위해 0 mM에서 20 mM의 NAC를 두 시간 전처리한 후 50 Gy와 100 Gy 감마선을 조사한 다음 효모로부터 단백질을 분리하여 SOD assay를 수행하였다. 50 Gy와 100 Gy 감마선 조사 후 효모 SOD 활성은 대조군에 비해 약 15% 감소하였으며, 10 mM과 20 mM NAC만 처리한 효모세포에서 SOD 활성이 약 1.
• 이는 NAC 처리에 따른 감마선 조사 후 증가된 활성산소종 제거 및 산화스트레스 감소에 따른 결과로 NAC를 이용한 전사적 수준에서의 연구가 수행되었다[5]. 따라서 본 연구에서는, 효모를 이용하여 단백질 수준에서 NAC와 방사선 처리 후 항산화효소 중의 하나인 SOD의 활성변화를 확인하였다.
• 효모 Saccharomyces cerevisiae W303-1A strain(MATa leu2-3/112 trp1-1 can1-100 ura3-1 ade2-1 his3-11/1 ybp1-1)은 YPDA 배지에서 30°C, 48시간 배양하여 이용하였으며, NAC는 감마선 조사 2시간 전에 처리하였다. 효모 세포는 한국원자력연구원 방사선과학연구소내의 조사시설 ⁶⁰Co gamma irradiator (7.4 PBq of capacity; AECL, Canada)를 이용하여 최종흡수선량이 50 Gy와 100 Gy가 되도록 실온에서 조사하였다. NAC 처리 및 감마선 조사 후 효모세포로부터 PBS buffer를 이용하여 단백질을 분리한 후 Bradford법을 바탕으로 한 Bio-Rad Protein Assay Kit를 이용하여 단백질 정량을 수행하였다.

이론/모형

• NAC 처리 및 감마선 조사 후 효모세포로부터 PBS buffer를 이용하여 단백질을 분리한 후 Bradford법을 바탕으로 한 Bio-Rad Protein Assay Kit를 이용하여 단백질 정량을 수행하였다. SOD assay는 DOJINDO사의 SOD Assay Kit-WST를 이용하여 제조사의 assay 방법에 의거하여 수행하였다.

성능/효과

• 5배 높아짐을 확인하였다. 10 mM과 20 mM NAC 전처리 후 50 Gy 감마선이 조사된 효모의 SOD 활성은 1.3배와 1.1배 증가하였으며, 50 Gy 감마선만 조사된 실험군에 비해 약 1.5배와 1.4배 증가하였다. 두 농도의 NAC 전처리 후 100 Gy 감마선이 조사된 효모의 SOD 활성은 대조군에 비해 약 1.
• NAC 처리와 감마선 조사가 효모의 SOD 활성에 주는 영향을 확인하기 위해 0 mM에서 20 mM의 NAC를 두 시간 전처리한 후 50 Gy와 100 Gy 감마선을 조사한 다음 효모로부터 단백질을 분리하여 SOD assay를 수행하였다. 50 Gy와 100 Gy 감마선 조사 후 효모 SOD 활성은 대조군에 비해 약 15% 감소하였으며, 10 mM과 20 mM NAC만 처리한 효모세포에서 SOD 활성이 약 1.5배 높아짐을 확인하였다. 10 mM과 20 mM NAC 전처리 후 50 Gy 감마선이 조사된 효모의 SOD 활성은 1.
• 감마선 조사 후 효모 SOD 활성은 감소되었으며, NAC 처리는 감마선 조사 유무와 관계없이 효모 SOD 활성을 증가시켰다. 따라서 NAC는 항산화효소인 SOD를 활성화하며, 활성화된 SOD는 생체 내 활성산소종을 제거 하기 때문에 NAC는 활성산소종을 유발하는 감마선 조사나 피폭에 따른 방사선 방어제로 이용될 수 있으며, 활성산소종을 유발하는 외부 환경스트레스로부터 생물체를 보호하는데 이용될 수 있을 것으로 사료된다.
• 4배 증가하였다. 두 농도의 NAC 전처리 후 100 Gy 감마선이 조사된 효모의 SOD 활성은 대조군에 비해 약 1.2배 증가하거나 같은 수준의 활성을 확인할 수 있었으며, 100 Gy 감마선만 조사한 실험군에 비해 약 1.4배와 1.2배 증가함을 확인하였다. 이러한 결과로부터, NAC는 효모의 SOD 활성을 증가함을 알 수 있었다.
• 2배 증가함을 확인하였다. 이러한 결과로부터, NAC는 효모의 SOD 활성을 증가함을 알 수 있었다.

후속연구

• 감마선 조사 후 효모 SOD 활성은 감소되었으며, NAC 처리는 감마선 조사 유무와 관계없이 효모 SOD 활성을 증가시켰다. 따라서 NAC는 항산화효소인 SOD를 활성화하며, 활성화된 SOD는 생체 내 활성산소종을 제거 하기 때문에 NAC는 활성산소종을 유발하는 감마선 조사나 피폭에 따른 방사선 방어제로 이용될 수 있으며, 활성산소종을 유발하는 외부 환경스트레스로부터 생물체를 보호하는데 이용될 수 있을 것으로 사료된다.

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