초록 ▼

효모 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)로부터 분리한 DNA를 대장균과 효모 사이의 셔틀 플라스미드 pK15에 의해 효모와 대장균에서 각각 형질 전환시켜 효모, 대장균 양쪽에서 프로모터로 작용하는 이중 프로모터로 제조한다.(1) 효모에서 추출한 유전자 DNA를 제한효소 AluI과 HaeIII로 처리한 다음, 1아가로스겔에서 전기 영동하여 DNA길이 500-2500 염기쌍인 것을 회수하여 이것을 제한 효소 BamHI으로 처리한 후, (2) 대장균 폴리머제 klenow분획으로 처리한 프로모터(prom

효모 사카로마이세스 세레비시아(Saccharomyces cerevisiae)로부터 분리한 DNA를 대장균과 효모 사이의 셔틀 플라스미드 pK15에 의해 효모와 대장균에서 각각 형질 전환시켜 효모, 대장균 양쪽에서 프로모터로 작용하는 이중 프로모터로 제조한다.(1) 효모에서 추출한 유전자 DNA를 제한효소 AluI과 HaeIII로 처리한 다음, 1아가로스겔에서 전기 영동하여 DNA길이 500-2500 염기쌍인 것을 회수하여 이것을 제한 효소 BamHI으로 처리한 후, (2) 대장균 폴리머제 klenow분획으로 처리한 프로모터(promoter)개발용 벡터(Vector)인 pK15벡터에 T4 DNA 리가아제 효소를 이용하여 (1)에서 제한 효소 처리한 DNA가닥을 접합시키고 이 접합된 것으로 대장균 LE392(E. coil LE392)를 형질 전환하여 배양한 다음, (3) (2)에서 배양한 것을 알카리 처리하여 플라스미드 DNA를 추출하고 이 추출된 플라스미드 DNA를 효모로 형질 전환하여 배양한 다음, (4) Bam HI 제한 효소로 처리하여 효모로부터 효모와 대장균의 두 가지 프로모터 활성을 가진 DNA를 분리하는 방법.

대표청구항 ▼

효모에서 추출한 유전자 DNA를 제한효소 AluI과 HaeⅢ로 처리한 다음, 1% 아가로스 젤에서 전기 영동에 의하여 DNA길이 500-2500염기쌍되는 것을 회수하여 이것을, 제한효소 BamHI으로 처리하고 대장균 폴리머라제 Klenow분획으로 처리한 pK15벡터에 T4 DNA리가아제 효소를 이용하여 접합시켜 이 접합된 것을 대장균 세표 LE392에 트란스포메이션하여 배양한 다음 알카리 처리하여 플라스미드 DNA를 추출하고 이 추출된 플라스미드 DNA를 효모에 트란스포메이션하여 배양한 다음 BamHI제한효소로 처리하는 효모로 부터

효모에서 추출한 유전자 DNA를 제한효소 AluI과 HaeⅢ로 처리한 다음, 1% 아가로스 젤에서 전기 영동에 의하여 DNA길이 500-2500염기쌍되는 것을 회수하여 이것을, 제한효소 BamHI으로 처리하고 대장균 폴리머라제 Klenow분획으로 처리한 pK15벡터에 T4 DNA리가아제 효소를 이용하여 접합시켜 이 접합된 것을 대장균 세표 LE392에 트란스포메이션하여 배양한 다음 알카리 처리하여 플라스미드 DNA를 추출하고 이 추출된 플라스미드 DNA를 효모에 트란스포메이션하여 배양한 다음 BamHI제한효소로 처리하는 효모로 부터 효모와 대장균의 두 가지 프로모터 활성을 가진 신규 DNA(YEP1)를 분리하는 방법.제1항에 있어서, 트란스포메이션한 대장균 세포 LE392를 엠피실린과 클로람페닐콜 함유 베지에서 배양하고, 또한, 트란스포메이션한 효모세포를 클로람페니콜 함유 베지에서 배양하여, 효모로 부터 효모와 대장균의 두 가지 포로모터 활성을 가진 신규 DNA(YEP1)를 분리하는 방법.다음의 염기 서열을 가진 효모와 대장균의 두 가지 활성을 가진 신규 DNA(YEP1)GTCGACACACTGGACACCTTGAATTCTTCCACTTATTTAAGCATTGGCAATGAAAAGTGTGCTGGCACGGGATCGTTACTAATCCAGTAGTTTCTGAATCCATTCTTTCAAGGCAAACGGGACATGTGGGGAGTTCGACTTTTACCAGTTCCTTTTTTTTCTTAACAGTGAATGGATCAGTAAGCAGATAGGGGAAGTCCTCGTTAGCGGCTGGTCTTTGGAGAGCTTTTTTTGAAAAACTATTTCTTTTACAGAGATCACATGGCATGTTTCGGGATCCCGATATTCTATTTTGGGGGTACGCTGTCTTAAGTTTGCCTGTAAGTATTATTGTTGTCTCAGGTGCAATTTACGTTTTACAGTGGGCTAACCCAACTTAATACAACTTTTCATTCCTTTGTATAGAGTCTTCATGAATGAAAGTCTTATTCATTTTTTTTTTTTTTTAGCATAGTTTTATATTCCTTTTTTATTCCAAGACTTATATTCTCATTATATTCTATTTAGTTTCGCATGGAATTTCAAGTACACATATAACTACAGCCTTACTTGAAAATTGCCTGTCTGGGTCTTATACTTTGCACCCTTGTACAGCTTTGTATTTTTGCCAATTGTTAATCCAGATACAATATCGATGGCTTCTACATAGATTCCACTGGCCGATTGTCCTATGTAAGAATATTCTAAGGAGACTGTTTGTAAATCAACTTTTTTTGTAAAATTTGGCCCAGTATTTTCATACTCAATACAGCCACGTAGTACAGGTACCGTTCCAGTGGCAGTTGATTTATCAAAAATCCATTGTCCTTGACCCATGATAATGCTATTTTCAAAACGG.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.