IPC분류정보
국가/구분 |
한국(KR)/등록특허
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국제특허분류(IPC8판) |
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출원번호 |
10-1996-0705103
(1996-09-14)
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공개번호 |
10-1997-0701791
(1997-04-12)
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등록번호 |
10-0230718-0000
(1999-08-24)
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국제출원번호 |
PCT/US1995/003339
(1995-03-14)
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국제공개번호 |
WO1995025180
(1995-09-21)
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번역문제출일자 |
1996-09-14
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DOI |
http://doi.org/10.8080/1019960705103
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발명자
/ 주소 |
- 다타굽타, 나니브후산
/ 미국 ***** 캘리포니아주 샌 디에고 커우드 코오트 ****
- 스툴, 폴, 더글라스
/ 미국 ***** 캘리포니아주 샌 디에고 노벨 드라이브 **** 아파트 먼트 ****
- 스핑골라, 마크
/ 미국 ***** 뉴멕시코주 앨부퀘르크 출라 비스타 플레이스 ***
- 캐시앙, 다니엘, 루이스
/ 미국 ***** 캘리포니아주 샌 디에고 템버 로오드 ****
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출원인 / 주소 |
- 젠-프로브 인코포레이티드 / 미국 캘리포니아주 ***** 샌디에고 제네틱 센터 드라이브 *****
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대리인 / 주소 |
-
장수길
(CHANG, Soo Kil)
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서울 종로구 내자동 세양빌딩 (김.장법률사무소)
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심사청구여부 |
있음 (1996-12-09) |
심사진행상태 |
등록결정(일반) |
법적상태 |
소멸 |
초록
5' 엑소뉴클레아제 활성이 결여된 핵산 폴리머라제 및 한조의 올리고뉴클레오티드 프라이머를 사용하여 표적 핵산 서열을 증폭시키는 방법. 바람직하게는 프라이머 어레이가 사용된다. 프라이머 어레이는 2개 조의 프라이머를 함유한다, 한조는 2개 이상의 상보성 프라이머를 함유한다. 다른 한조는 2개 이상의 센스 프라이머를 함유한다. 기재된 방법을 사용하여, 엑소뉴클레아제 활성 또는 제한 엔도뉴클레아제 활성없이도 필수적으로 일정 환경 조건하에서 증폭시킬 수 있다.
대표청구항
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핵산 표적 서열을 함유하는 핵산 가닥과 5' 엑소뉴클레아제 활성이 결여된 핵산 플리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염 및 3개 이상의 상이한 상보성 프라이머를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키는 단계를 포함하는 핵산 표적 서열의 증폭 방법. 핵산 표적 서열을 함유하는 핵산 가닥과 5' 엑소뉴클레아제 활성이 결여된 핵산 플리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드
핵산 표적 서열을 함유하는 핵산 가닥과 5' 엑소뉴클레아제 활성이 결여된 핵산 플리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염 및 3개 이상의 상이한 상보성 프라이머를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키는 단계를 포함하는 핵산 표적 서열의 증폭 방법. 핵산 표적 서열을 함유하는 핵산 가닥과 5' 엑소뉴클레아제 활성이 결여된 핵산 플리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염 및 2개 이상의 상이한 상보성 프라이머를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키되, 이 접촉 단계의 연장 반응 생성물에 활성인 제한 엔도뉴클레아제의 부재하에 접촉시키는 단계로 이루어지는 핵산 표적 서열의 증폭 방법. 핵산 표적 서열과 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염 및 3개 이상의 상보성 올리고뉴클레오티드 프라이머를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키는 단계로 이루어지며, 상기 상보성 프라이머 중 하나는 상기 접촉 단계에 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 헥산 분해에 내성이 되도록 변형시킨 것인 핵산 표적 서열의 증폭 방법. 핵산 표적 서열과 핵산 폴리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염 및 2개 이상의 상이한 상보성 올리고뉴클레오티드 플라이머를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키되, 이 접촉 단계의 연장 반응의 생성물에 활성인 제한 엔도뉴클레아제의 부재하에 접촉시키는 단계로 이루어지며, 상기 상보성 프라이머 중 하나는 상기 접촉 단계에 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 핵산 분해에 내성이 되도록 변형시킨 것이 핵산 표적 서열의 증폭 방법. 제1항에 있어서, 상기 상보성 프라이머를 4개 이상 사용하는 방법. 제2항에 있어서, 상기 상보성 프라이머를 4개 이상 사용하는 방법. 제5항에 있어서, 상기 상보성 프라이머 각각이 1 내지 200 뉴클레오티드의 거리만큼 분리된 것인 방법. 제6항에 있어서, 상기 상보성 프라이머 각각이 1 내지 200 뉴클레오티드의 거리만큼 분리된 것인 방법. 핵산 표적 서열을 함유하는 핵산 가닥과 5'엑소뉴클레아제 활성이 결여된 핵산 폴리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염, 및 2 또는 3개의 상이한 상보성 올리고뉴클레오티드 프라이머와 2 또는 3개의 상이한 센스 올리고뉴클레오티드 프라이머로 이루어진 5개 이상의 상이한 프라이머의 프라이머 어레이를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키는 단계로 이루어지는 핵산 표적 서열의 증폭 방법.핵산 표적 서열을 함유하는 핵산 가닥과 핵산 폴리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염, 및 2 또는 3개의 상이한 상보성 올리고뉴클레오티드 프라이머와 2 또는 3개의 상이한 센스 올리고뉴클레오티드 프라이머로 이루어진 5개 이상의 상이한 프라이머의 프라이머 어레이를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키는 단계로 이루어지며, 상기 하나 이상의 센스 프라이머 또는 상기 하나 이상의 상보성 프라이머는 상기 접촉 단계에 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 핵산 분해에 내성이 되도록 변형시킨 것인 핵산 표적 서열의 증폭 방법.DNA 표적 서열을 함유하는 단일 가닥 DNA와 5'엑소뉴클레아제 활성이 결여된 DNA 폴리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염, 및 2 또는 3개의 상이한 상보성 올리고 뉴클레오티드 프라이머와 2 또는 3개의 상이한 센스 올리고뉴클레오티드 프라이머로 이루어진 5개 이상의 상이한 프라이머의 프라이머 어레이를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키는 단계로 이루어지는 DNA 표적 서열의 증폭 방법.DNA 표적 서열을 함유하는 단일 가닥 DNA와 DNA 폴리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인삼염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염, 및 2 또는 3개의 상이한 상보성 올리고뉴클레오티드 프라이머와 2 또는 3개의 상이한 센스 올리고뉴클레오티드 프라이머로 이루어진 5개 이상의 상이한 프라이머의 프라이머 어레이를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키는 단계로 이루어지며, 상기 하나 이상의 센스 프라이머 또는 하나 이상의 상보성 프라이머는 상기 접촉단계에서 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 핵산 분해에 내성이 되도록 변형시킨 것인 DNA 표적 서열의 증폭 방법.제9항에 있어서, 상기 센스 프라이머 및 상기 상보성 프라이머를 각각 4개 이상 사용하는 방법.제9항에 있어서, 상기 센스 프라이머 및 상기 상보성 프라이머를 각각 7개 이상 사용하는 방법.제9항에 있어서, 상기 센스 프라이머 및 상기 상보성 프라이머를 각각 10개 이상 사용하는 방법.제9항에 있어서, 서로 인접하고 있는 상기 센스 프라이머와 서로 인접하고 있는 상기 상보성 프라이머는 각각 1 내지 200 뉴클레오티드의 거리만큼 분리되어 있는 것인 방법.제13항에 있어서, 서로 인접하고 있는 상기 센스 프라이머와 서로 인접하고 있는 상기 상보성 프라이머는 각각 1 내지 200 뉴클레오티드의 거리만큼 분리되어 있는 것인 방법.제14항에 있어서, 서로 인접하고 있는 상기 센스 프라이머와 서로 인접하고 있는 상기 상보성 프라이머는 각각 1 내지 200 뉴클레오티드의 거리만큼 분리되어 있는 것인 방법.제15항에 있어서, 서로 인접하고 있는 상기 센스 프라이머와 서로 인접하고 있는 상기 상보성 프라이머는 각각 1 내지 200 뉴클레오티드의 거리만큼 분리되어 있는 것인 방법.제16항에 있어서, 서로 인접하고 2개의 센스 프라이머와 서로 인접하고 있는 2개의 상보성 프라이머는 각각 10 뉴클레오티드 이하의 거리만큼 분리되어 있는 것인 방법.핵산 표적 서열을 함유하는 핵산 가닥과 5'엑소뉴클레아제 활성이 결여된 핵산 폴리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염, 2개의 상이한 상보성 올리고뉴클레오티드 프라이머 및 2개의 상이한 센스 프라이머를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키되, 이 접촉 단계의 연장 반응의 생성물에 활성인 제한 엔도뉴클레아제의 부재하에 접촉시키는 단계로 이루어지는 핵산 표적 서열의 증폭 방법.핵산 표적 서열을 함유하는 핵산 가닥과 핵산 폴리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염, 2개의 상이한나 상보성 올리고뉴클레오티드 프라이머 및 2개의 상이한 센스 프라이머를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키되, 이 접촉 단계의 연장 반응의 생성물에 활성인 제한 엔도뉴클레아제의 부재하에 접촉시키는 단계로 이루어지며, 상기 하나 이상의 센스 프라이머 또는 상기 하나 이상의 상보성 프라이머는 상기 접촉 단계에서 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 핵산 분해에 내성이 되도록 변형시킨 것인 핵산 표적 서열의 증폭 방법.DNA 표적 서열을 함유하는 단일 가닥 DNA와 5'엑소뉴클레아제 활성이 결여된 DNA 폴리머라제, 아데노신, 티미딘, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염, 2개의 상이한 상보성 올리고뉴클레오티드 프라이머 및 2개의 상이한 센스 올리고뉴클레오티드 프라이머를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키되, 이 접촉 단계의 연장 반응의 생성물에 활성인 제한 엔도뉴클레아제의 부재하에 접촉시키는 단계로 이루어지는 DNA 표적 서열의 증폭 방법.DNA 표적 서열을 함유하는 단일 가닥 DNA 와 DNA 폴리머라제, 아데노신, 티디민, 구아노신 및 시토신 삼인산염 중에서 선택되는 하나 이상의 뉴클레오티드 삼인산염, 2개의 상이한 상보성 올리고뉴클레오티드 프라이머 및 2개의 상이한 센스 프라이머를 필수적으로 일정 온도에서 올리고뉴클레오티드 프라이머 연장 조건하에서 접촉시키되, 이 접촉 단계의 연장 반응의 생성물에 활성인 제한 엔도뉴클레아제의 부재하에 접촉시키는 단계로 이루어지며, 상기 하나 이상의 센스 프라이머 또는 상기 하나 이상의 상보성 프라이머는 상기 접촉 단계에서 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 핵산 분해에 내성이 되도록 변형시킨 것인 DNA 표적 서열의 증폭 방법.제23항에 있어서, 상기 조건이 DMSO가 제공되는 조건인 방법.제23항에 있어서, 상기 필수적인 일정 온도가 43℃ 이상인 방법.제26항에 있어서, 상기 필수적인 일정 온도가 60℃ 내지 70℃인 방법.제23항에 있어서, 상기 조건이 가닥 변위제(strand-displacing agent)가 제공되는 조건인 방법.제28항에 있어서, 상기 가닥 변위제가 헬리카제(helicase), RecA 단백질, 및 단일 가닥 핵산 결합 단백질로 이루어진 군중에서 선택되는 방법.제23항에 있어서, 상기 DNA 폴리머라제가 Bst DNA 폴리머라제 I 및 변형된 Tag DNA 폴리머라제인 방법.제23항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오티드 프라이머 중 하나 이상의 프라이머가 5'비상보성 영역을 추가로 포함하는 방법.제23항에 있어서, 상기 상보성 프라이머 및 상기 센스 프라이머를 각각 4개 이상 사용하는 방법.제23항에 있어서, 상기 상보성 프라이머 및 상기 센스 프라이머를 각각 7개 이상 사용하는 방법.제23항에 있어서, 상기 상보성 프라이머 및 상기 센스 프라이머를 각각 10개 이상 사용하는 방법.제10항에 있어서, 상기 하나 이상의 센스 프라이머 및 상기 하나 이상의 상보성 프라이머는 상기 접촉 단계에서 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 핵산 분해에 내성이 되도록 변형시킨 것인 방법.제12항에 있어서, 상기 하나 이상의 센스 프라이머 및 상기 하나 이상의 상보성 프라이머는 상기 접촉 단계에서 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 핵산 분해에 내성이 되도록 형성시킨 것인 방법.제22항에 있어서, 상기 하나 이상의 센스 프라이머 및 상기 하나 이상의 상보성 프라이머는 상기 접촉 단계에서 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 핵산 분해에 내성이 되도록 변형시킨 것인 방법.제24항에 있어서, 상기 하나 이상의 센스 프라이머 및 상기 하나 이상의 상보성 프라이머는 상기 접촉 단계에서 존재하는 5'-엑소뉴클레아제에 의한 핵산 분해에 내성이 되도록 변형시킨 것인 방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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