초록 ▼

본 발명은 클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum) A형 독소를 정제하는 방법에 관한 것으로, 구체적으로는 (a) 클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum) A형 균주의 배양액에 황산을 첨가하여 pH를 3∼4가 되도록 하여 침전물을 생성시킨 후, 침전물을 수득하는 단계; (b) 수득된 침전물을 완충용액으로 용해시킨 다음, 용해물을 황산 암모늄을 이용하여 침전시킨 후, 침전물을 수득하는 단계; (c) 상기 침전물을 포스페이트 완충용액으로 현탁한 다음, RNA 가수분해 효소를 처리한 후 불용

본 발명은 클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum) A형 독소를 정제하는 방법에 관한 것으로, 구체적으로는 (a) 클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum) A형 균주의 배양액에 황산을 첨가하여 pH를 3∼4가 되도록 하여 침전물을 생성시킨 후, 침전물을 수득하는 단계; (b) 수득된 침전물을 완충용액으로 용해시킨 다음, 용해물을 황산 암모늄을 이용하여 침전시킨 후, 침전물을 수득하는 단계; (c) 상기 침전물을 포스페이트 완충용액으로 현탁한 다음, RNA 가수분해 효소를 처리한 후 불용화된 것을 제거하고 한 후 상등액을 황산암모늄을 이용하여 침전시킨 후 침전물을 수득하는 단계; (d) 수득된 침전물을 완충용액에 용해시킨 다음, 이온교환크로마토그래피를 수행하여 A260/280의 값이 0.6 이상되는 분획만을 수득하는 단계; (e) 수득된 분획에 대하여 겔 투과 크로마토그래피를 수행하는 단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 한다.

대표청구항 ▼

다음 단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum) A형 독소를 정제하는 방법:(a) 클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum) A형 균주의 배양액에 황산을 첨가하여 pH를 3∼4가 되도록 하여 침전물을 생성시킨 후, 침전물을 수득하는 단계;(b) 수득된 침전물을 완충용액으로 용해시킨 다음, 용해물을 황산 암모늄을 이용하여 침전시킨 후, 침전물을 수득하는 단계;(c) 상기 침전물을 포스페이트 완충용액으로 현탁한 다음, RNA 가수분해 효소를 처리한

다음 단계를 포함하여 이루어지는 것을 특징으로 하는 클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum) A형 독소를 정제하는 방법:(a) 클로스트리디움 보툴리눔(Clostridium botulinum) A형 균주의 배양액에 황산을 첨가하여 pH를 3∼4가 되도록 하여 침전물을 생성시킨 후, 침전물을 수득하는 단계;(b) 수득된 침전물을 완충용액으로 용해시킨 다음, 용해물을 황산 암모늄을 이용하여 침전시킨 후, 침전물을 수득하는 단계;(c) 상기 침전물을 포스페이트 완충용액으로 현탁한 다음, RNA 가수분해 효소를 처리한 후 불용화된 것을 제거하고 한 후 상등액을 황산암모늄을 이용하여 침전시킨 후 침전물을 수득하는 단계;(d) 수득된 침전물을 완충용액에 용해시킨 다음, 이온교환크로마토그래피를 수행하여 A260/280의 값이 0.6 이상되는 분획만을 수득하는 단계;(e) 수득된 분획에 대하여 겔 투과 크로마토그래피를 수행하는 단계.