초록

식물 내에서의 노화 발현의 조절은 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 유전자 또는 유전자 단편을 안티센스 방향으로 식물 게놈 내로 통합시킴으로서 달성된다. 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 카네이션 및 아라비돕시스 유전자가 확인되고, 상기 뉴클레오타이드가 형질전환 식물 내에서 노화를 변형시키는데 이용된다.

대표청구항 ▼

낮은 스트린젠시 조건하에서 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 분리된 DNA 분자 또는 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이둘 모두와 하이브리다이즈하는 분리된 DNA 분자의 기능적 유도체제 1항에 있어서, 상기 DNA 분자는 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 서열을 지님을 특징으로 하는 분리된 DNA 분자제 1항에 있어서, 상기 DNA 분자는 서열번호: 4의 뉴클레오타이드 서열을 지님을 특징으로 하는 분리된 DNA 분자제 1항에 있어서, 상기 DNA 분자는 서열번호:

낮은 스트린젠시 조건하에서 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 분리된 DNA 분자 또는 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이둘 모두와 하이브리다이즈하는 분리된 DNA 분자의 기능적 유도체제 1항에 있어서, 상기 DNA 분자는 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 서열을 지님을 특징으로 하는 분리된 DNA 분자제 1항에 있어서, 상기 DNA 분자는 서열번호: 4의 뉴클레오타이드 서열을 지님을 특징으로 하는 분리된 DNA 분자제 1항에 있어서, 상기 DNA 분자는 서열번호: 18의 뉴클레오타이드 서열을 지님을 특징으로 하는 분리된 DNA 분자낮은 스트린젠시 조건하에서 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 뉴클레오타이드 서열에 의해 인코드된 분리된 노화-유도된 리파제 또는 노화-유도된 리파제의 기능적 유도체제 5항에 있어서, 상기 리파제는 서열번호: 2 또는 서열번호: 19의 아미노산 서열을 지님을 특징으로 하는 노화-유도된 리파제(a) 낮은 스트린젠시 조건 하에서 (1) 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 DNA 분자의 하나의 스트랜드의 상응하는 부분 또는 (2) 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 DNA 분자에 의해 인코드된 RNA 서열의 상응하는 부분에 실질적으로 상보적인 안티센스 뉴클레오타이드 서열 ; 및 (b) 안티센스 뉴클레오타이드 서열에 실시가능하게 연결되어 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 형질전화된 식물 세포 내에서 발현되도록 하는 조절 서열로 구성된 식물 세포의 형질전환을 위한 벡터제 7항에 있어서, 상기 조절 서열은 프로모터 및 전사 종결 구역으로 구성됨을 특징으로 하는 벡터제 7항에 있어서, 상기 조절 서열은 구성적 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 벡터제 7항에 있어서, 상기 조절 서열은 식물 조직-특이적 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 벡터제 7항에 있어서, 상기 조절 서열은 노화-유도된 식물 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 벡터제 7항에 있어서, 상기 조절 서열은 바이러스성 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 벡터제 7항에 있어서, 상기 조절 서열은 구성적 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 벡터식물 유전자가 낮은 스트린젠시 조건 하에서 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈함을 특징으로 하는, 식물 노화-유도된 리파제 유전자의 RNA 전사체의 상응하는 부분에 실질적으로 상보적인 RNA 서열를 인코딩하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드제 14항에 있어서, 상기 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드는 약 6∼100 뉴클레오타이드로 구성됨을 특징으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드제 14항에 있어서, 상기 식물 유전자의 코딩 구역은 서열번호: 1의 뉴클레오타이드 서열을 지님을 특징으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드제 14항에 있어서, 상기 식물 유전자의 코딩 구역은 서열번호: 18의 뉴클레오타이드 서열을 지님을 특징으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드제 14항에 있어서, 상기 식물 유전자는 카네이션 유전자임을 특징으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드제 14항에 있어서, 상기 식물 유전자는 아라비돕시스 유전자임을 특징으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드제 14항에 있어서, 상기 식물 유전자는 토마토 유전자임을 특징으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드제 14항에 있어서, 상기 식물 유전자는 깍지콩 유전자임을 특징으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드제 14항에 있어서, 상기 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드는 RNA 전사체의 5'-비-코딩 구역의 상응하는 부분에 실질적으로 상보적임을 특징으로 하는 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드(a) 낮은 스트린젠시 조건 하에서 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 DNA 분자; 및 (b) 안티센스 뉴클레오타이드 서열에 실시가능하게 연결되어 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 형질전화된 식물 세포 내에서 발현되도록 하는 조절 서열로 구성된 벡터제 23항에 따른 벡터로 형질전환된 식물 세포제 7항에 따른 벡터로 형질전환된 식물 세포제 7항에 따른 벡터로 형질전환된 식물 세포로부터 생성된 식물 및 그의 자손제 26항에 따른 식물, 식물 부분 또는 식물 자손(1) (A) (ⅰ) 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 내성적 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 DNA 분자의 하나의 스트랜드의 상응하는 부분 또는 (ⅱ) 내생적 노화-유도된 리파제 유전자에 의해 인코드된 RNA 서열의 상응하는 부분에 실질적으로 상보적인 안티센스 뉴클레오타이드 서열 ; 및(B) 안티센스 뉴클레오타이드 서열에 실시가능하게 연결되어 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 발현되게 하는 조절 서열로 구성된 벡터를 식물의 게놈 내로 통합시키고 ;(2) 상기 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 전사되고 상기 RNA 서열에 결합하여, 상기 노화-유도된 리파제 유전자의 발현이 억제되도록 상기 식물을 생장시키는 것으로 구성된식물 내에서의 내생적 노화-유도된 리파제의 발현을 억제하는 방법제 28항에 있어서, 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드에 실질적으로 상보적인 상기 DNA의 상응하는 부분 또는 RNA의 상응하는 부분은 5'-비-코딩 서열로 구성됨을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 억제는 식물의 변화된 노화를 초래함을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 억제는 상기 식물의 환경적 스트레스-유도된 노화에 대한 증가된 저항성을 초래함을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 억제는 상기 식물의 증가된 생물량을 초래함을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 억제는 상기 식물 내에서 증가된 종자 산출량을 초래함을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 조절 서열은 식물에서 활성적인 구성적 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 조절 서열은 이중 35S 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 조절 서열은 식물 내에서 활성적인 조직 특이적 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 조절 서열은 식물 내에서 활성적인 노화-유도된 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 식물은 열매를 지닌 식물, 개화 식물, 채소, 농작식물 및 산림종으로 구성된 군으로부터 선택됨을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 식물은 토마토임을 특징으로 하는 방법제 28항에 있어서, 상기 식물은 카네이션임을 특징으로 하는 방법(1) (A) 낮은 스트린젠시 조건하에서 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이둘 모두와 하이브리다이즈하는 외생적 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 분리된 DNA 분자 또는 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이둘 모두와 하이브리다이즈하는 분리된 DNA 분자의 기능적 유도체 ; 및(B) DNA 분자에 실시가능하게 연결되어 인코드된 외생적 노화-유도된 리파제가 발현되게 하는 조절 서열로 구성된 벡터를 적어도 하나 이상의 식물 세포의 게놈 내로 통합시키고 ;(2) 상기 DNA 분자가 과발현되고 내생적 노화-유도된 리파제 유전자 또는 유전자들이 외생적 노화-유도된 리파제에 의해 억제되도록 상기 식물을 생장시키는 것으로 구성된식물 세포 내에서의 내생적 노화-유도된 리파제 유전자 또는 유전자들의 발현을 억제하는 방법제 41항에 있어서, 상기 조절 서열은 구성적 프로모터로 구성됨을 특징으로 하는 방법(1) (A) (ⅰ) 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 내성적 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 DNA 분자의 하나의 스트랜드의 상응하는 부분 또는 (ⅱ) 내생적 노화-유도된 리파제 유전자에 의해 인코드된 RNA 서열의 적어도 일부분에 실질적으로 상보적인 안티센스 뉴클레오타이드 서열 ; 및(B) 안티센스 뉴클레오타이드 서열에 실시가능하게 연결되어 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 발현되게 하는 조절 서열로 구성된 벡터를 식물의 게놈 내로 통합시키고 ;(2) 상기 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 전사되고 상기 RNA 서열에 결합하여, 상기 노화-유도된 리파제 유전자의 발현이 억제되도록 상기 식물을 생장시키는 것으로 구성된식물 내에서의 연령-관련된 노화 및 환경적 스트레스-관련된 노화를 변화시키는 방법제 7항에 따른 벡터로 구성된 형질전환 식물 세포제 23항에 따른 벡터로 구성된 형질전환 식물 세포원핵세포성 숙주 내에서 기능적인 복제 시스템 및 제 14항에 따른 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드로 구성된 플라스미드아크로박테리움 내에서 기능적인 복제 시스템 및 제 14항에 따른 안티센스 올리고뉴클레오타이드 또는 폴리뉴클레오타이드로 구성된 플라스미드상기 식물은 제 7항에 따른 벡터로 구성되고, 노화-유도된 리파제의 억제되거나 감소된 발현을 지닌 세포로부터 유도됨을 특징으로 하는 식물 및 그의 자손(1) (A) (ⅰ) 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 내성적 노화-유도된 리파제를 인코딩하는 DNA 분자의 하나의 스트랜드의 상응하는 부분 또는 (ⅱ) 내생적 노화-유도된 리파제 유전자에 의해 인코드된 RNA 서열의 상응하는 부분 실질적으로 상보적인 안티센스 뉴클레오타이드 서열 ; 및(B) 안티센스 뉴클레오타이드 서열에 실시가능하게 연결되어 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 발현되게 하는 조절 서열로 구성된 벡터를 세포의 게놈 내로 통합시키고 ;(2) 상기 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 전사되고 상기 RNA 서열에 결합하여, 상기 노화-유도된 리파제 유전자의 발현이 억제되도록 상기 세포를 생장시킴으로서 생성되고, 노화-유도된 리파제의 억제되거나 감소된 발현을 지닌 세포로부터 유도됨을 특징으로 하는 식물 또는 그의 자손상기 식물은 토마토임을 특징으로 하는 제 49항에 따른 식물 및 자손상기 식물은 카네이션임을 특징으로 하는 제49항에 따른 식물 및 자손(1) (A) (ⅰ) 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 내성적 숙성-유도된 리파제를 인코딩하는 DNA 분자의 하나의 스트랜드의 상응하는 부분 또는 (ⅱ) 내생적 숙성-유도된 리파제 유전자를 인코딩하는 DNA로부터 전사된 RNA 서열의 상응하는 부분에 실질적으로 상보적인 안티센스 뉴클레오타이드 서열 ; 및(B) 안티센스 뉴클레오타이드 서열에 실시가능하게 연결된 조절 서열로 구성된 벡터를 식물의 게놈 내로 통합시키고 ;(2) 상기 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 전사되고 상기 RNA 서열에 결합하여, 상기 숙성-유도된 리파제 유전자의 발현이 억제되도록 상기 식물을 생장시키는 것으로 구성된종자 숙성을 억제하는 방법(1) (A) (ⅰ) 서열번호: 1, 서열번호: 18 또는 이 둘 모두와 하이브리다이즈하는 내성적 숙성-유도된 리파제를 인코딩하는 DNA 분자의 하나의 스트랜드의 상응하는 부분 또는 (ⅱ) 내생적 숙성-유도된 리파제 유전자를 인코딩하는 DNA로부터 전사된 RNA 서열의 상응하는 부분에 실질적으로 상보적인 안티센스 뉴클레오타이드 서열 ; 및(B) 안티센스 뉴클레오타이드 서열에 실시가능하게 연결된 조절 서열로 구성된 벡터를 식물의 게놈 내로 통합시키고 ;(2) 상기 안티센스 뉴클레오타이드 서열이 전사되고 상기 RNA 서열에 결합하여, 상기 숙성-유도된 리파제 유전자의 발현이 억제되도록 상기 식물을 생장시키는 것으로 구성된종자 산출량을 증가시키는 방법<