초록

본 발명은 아쉬비아 고쉬피로부터의 신규 폴리뉴클레오티드; 그와 혼성화되는 올리고뉴클레오티드; 이들 폴리뉴클레오티드를 포함하는 발현 카세트 및 벡터; 그로 형질전환시킨 미생물; 이들 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩되는 폴리펩티드; 및 막횡단 수송을 개선하고 특히 아쉬비아 속의 미생물 중에서의 비타민 B2 생산을 개선하기 위한 표적으로서 신규 폴리펩티드 및 폴리뉴클레오티드의 용도에 관한 것이다.

대표청구항 ▼

막횡단 수송과 관련되고(거나) 막횡단 단백질인 단백질을 코딩하고, 아쉬비아 고쉬피로부터 단리될 수 있는 폴리뉴클레오티드.제1항에 있어서, 막횡단 수송과 관련되고(거나) 막횡단 단백질이고, 표 1에 나타낸 구조적 및(또는) 기능적 특성을 갖는 폴리뉴클레오티드.제1항 또는 제2항에 있어서, 바람직하게는 아쉬비아 고쉬피로부터 단리될 수 있는 서열 번호 1, 5, 10, 14, 19, 23, 28, 33, 37 또는 42에 나타낸 핵산 서열; 그에 대해 상보성인 폴리뉴클레오티드; 및 유전자 코드의 축퇴를 통해 이들 폴리뉴클레오티드로부터 유

막횡단 수송과 관련되고(거나) 막횡단 단백질인 단백질을 코딩하고, 아쉬비아 고쉬피로부터 단리될 수 있는 폴리뉴클레오티드.제1항에 있어서, 막횡단 수송과 관련되고(거나) 막횡단 단백질이고, 표 1에 나타낸 구조적 및(또는) 기능적 특성을 갖는 폴리뉴클레오티드.제1항 또는 제2항에 있어서, 바람직하게는 아쉬비아 고쉬피로부터 단리될 수 있는 서열 번호 1, 5, 10, 14, 19, 23, 28, 33, 37 또는 42에 나타낸 핵산 서열; 그에 대해 상보성인 폴리뉴클레오티드; 및 유전자 코드의 축퇴를 통해 이들 폴리뉴클레오티드로부터 유도된 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드.제4항에 있어서, 서열 번호 3, 8, 12, 17, 21, 26, 31, 35, 40 또는 44에 나타낸 핵산 서열 또는 이들의 단편을 포함하는 폴리뉴클레오티드.특히 엄격한 조건하에 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 폴리뉴클레오티드와 혼성화되는 올리고뉴클레오티드.특히 엄격한 조건하에 제5항에 따른 올리고뉴클레오티드와 혼성화되고, 아쉬비아 속의 미생물로부터의 유전자 산물 또는 이 유전자 산물의 기능적 동등물을 코딩하는 폴리뉴클레오티드. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 따른 핵산 서열 또는 이들의 단편을 포함하는 폴리뉴클레오티드 또는 제6항에 따른 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩되거나; 또는 서열 번호 2, 4, 6, 7, 9, 11, 13, 15, 16, 18, 20, 22, 24, 27, 29, 30, 32, 34, 36, 38, 39, 41, 43 또는 서열 번호 45에 나타낸 10개 이상의 연속 아미노산 잔기를 포함하는 아미노산 서열을 갖는 폴리펩티드; 및 이들의 기능적 동등물, 특히 제2항에 나타낸 구조적 및(또는) 기능적 특성 중 하나를 갖는 기능적 동등물.하나 이상의 조절 핵산 서열에 작동적으로 연결된 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 따른 핵산 서열을 포함하는 발현 카세트.제8항에 따른 하나 이상의 발현 카세트를 포함하는 재조합 벡터.제9항에 따른 하나 이상의 벡터로 형질전환된 원핵생물 또는 진핵생물 숙주.제7항에 따른 폴리펩티드를 코딩하는 하나 이상의 유전자의 기능적 발현을 조정하거나; 또는 제7항에 따른 폴리펩티드의 생물학적 활성을 감소 또는 증가시키는 원핵생물 또는 진핵생물 숙주.제10항 또는 제11항에 있어서, 아쉬비아 속으로부터의 숙주.비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체를 미생물학적으로 생산하기 위한, 제8항에 따른 발현 카세트, 제9항에 따른 벡터 또는 제10항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 숙주의 용도.제7항에 따른 폴리펩티드를 재조합 생산하기 위한, 제8항에 따른 발현 카세트, 제9항에 따른 벡터 또는 제10항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 숙주의 용도.비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체를 미생물학적으로 생산할 수 있는 미생물을 제7항에 따른 폴리펩티드 또는 그를 코딩하는 핵산 서열로부터 선택되는 표적과 상호작용하는, 특히 결합하는 이펙터로 처리하고, 비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체의 미생물학적 생산량에 대한 이펙터의 영향을 확인하고; 표적을 경우에 따라 단리하는, 비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체의 미생물학적 생산을 조정하기 위한 이펙터 표적의 탐지 방법.비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체를 미생물학적으로 생산할 수 있는 미생물을 제7항에 따른 폴리펩티드 또는 그를 코딩하는 핵산 서열로부터 선택되는 표적과 상호작용하는 이펙터로 처리하는, 비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체의 미생물학적 생산의 조정 방법.a) 항체 또는 그의 항원-결합 단편;b) a)와 상이하고 제7항에 따른 폴리펩티드와 상호작용하는 폴리펩티드 리간드;c) 제7항에 따른 폴리펩티드의 생물학적 활성을 조정하는 저분자량 이펙터;d) 안티센스 핵산 서열로부터 선택되는, 제7항에 따른 폴리펩티드 또는 그를 코딩하는 핵산 서열로부터 선택되는 표적에 대한 이펙터.제10항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 숙주를 비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체의 생산에 유리한 조건 하에 배양하고, 목적하는 생산물(들)을 배양 혼합물로부터 단리하는, 비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체의 미생물학적 생산 방법.제18항에 있어서, 숙주를 그의 배양 전 및(또는) 동안에 제17항에 따른 이펙터로 처리하는 방법.제18항 또는 제19항에 있어서, 숙주가 아쉬비아 속의 미생물로부터 선택되는 것인 방법.제18항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서, 미생물이 제10항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 숙주인 방법.아쉬비아 속의 미생물 중에서 비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체의 생산을 조정하는 표적으로서 제1항 내지 제4항 및 제6항 중 어느 한 항에 따른 폴리뉴클레오티드 또는 제7항에 따른 폴리펩티드의 용도.비타민 B2 및(또는) 그의 전구체 및(또는) 유도체를 미생물학적으로 생산하기 위한 배양 동안 아쉬비아 속의 미생물 중에서 막횡단 수송, 막횡단 단백질의 활성 또는 그와 관련된 차후 상태를 조정하기 위한 표적으로서 제1항 내지 제4항 및 제6항 중 어느 한 항에 따른 폴리뉴클레오티드 또는 제7항에 따른 폴리펩티드의 용도.제12항에 있어서, 외부 조건에 대해 개선된 세포 반응을 갖는 숙주.<