초록

본 발명은 복잡한 합성방법을 경유하지 않고 간편하면서 또한 고수율로 저렴하게 펩티드를 제조할 수 있는 신규 효소에 관한 것이다. 보다 상세하게는, 카복시 성분과 아민 성분으로부터 펩티드 생성반응을 촉매하는 신규 효소, 이러한 효소를 생산하는 미생물 및 이러한 효소 또는 미생물을 사용하는 저렴한 디펩티드의 제조방법을 제공하는 것이다. 신규하게 밝혀낸 엠페도박터속에 속하는 세균으로부터 펩티드를 효율적으로 생성하는 신규 효소를 밝혀내고, 저렴하면서 또한 간편하게 펩티드를 제조하는 방법을 밝혀냈다.

대표청구항 ▼

카복시 성분과 아민 성분으로부터 펩티드를 생성하는 능력을 갖는, 엠페도박터(Empedobacter)속 또는 스핀고박테리움(Sphingobacterium)속 유래의 효소.카복시 성분과 아민 성분으로부터 펩티드를 생성하는 능력을 가지며, 하기 (i) 내지 (iv)의 조건하의 디펩티드 생성반응에서 L-알라닐-L-글루타민의 생성 속도가 O.O3mM/분 이상으로 되는 능력을 갖는 효소: (i) 카복시 성분이 L-알라닌메틸에스테르 염산염(100mM),(ii) 아민 성분이 L-글루타민(200mM),(iii) pH가 9.0, 및(iv) 효소 첨

카복시 성분과 아민 성분으로부터 펩티드를 생성하는 능력을 갖는, 엠페도박터(Empedobacter)속 또는 스핀고박테리움(Sphingobacterium)속 유래의 효소.카복시 성분과 아민 성분으로부터 펩티드를 생성하는 능력을 가지며, 하기 (i) 내지 (iv)의 조건하의 디펩티드 생성반응에서 L-알라닐-L-글루타민의 생성 속도가 O.O3mM/분 이상으로 되는 능력을 갖는 효소: (i) 카복시 성분이 L-알라닌메틸에스테르 염산염(100mM),(ii) 아민 성분이 L-글루타민(200mM),(iii) pH가 9.0, 및(iv) 효소 첨가량이 단백질량으로서 0.61mg/ml 미만.제1항 또는 제2항에 있어서, 카복시 성분으로서 아미노산에스테르 및 아미노산아미드 둘 다를 기질로 할 수 있는 효소.제1항 내지 제3항 중의 어느 한 항에 있어서, 아민 성분으로서, 아미노산, C 보호 아미노산 및 아민의 어느 하나를 기질로 할 수 있는 효소.제1항 내지 제4항 중의 어느 한 항에 있어서, pH가 6.5 내지 10.5의 범위에서 펩티드를 생성하는 능력을 갖는 효소.제1항 내지 제5항 중의 어느 한 항에 있어서, 온도조건이 0 내지 60℃의 범위에서 펩티드를 생성하는 능력을 갖는 효소.제1항 내지 제6항 중의 어느 한 항에 있어서, 세린 효소 억제제인 페닐메틸설포닐플루오리드로는 억제되지 않으나 p-니트로페닐-p``-구아니디노벤조에이트로 억제되는 효소.제1항 내지 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, SDS-겔 전기영동에 의한 분자량이 약 75kDa, 겔 여과 크로마토그래피에 의한 분자량이 약 150kDa인 효소.제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 효소를 생산하는 미생물.제9항에 있어서, 엠페도박터 브레비스(Empedobacter brevis) FERM BP-8113주 또는 스핀고박테리움 종 FERM BP-8124주인 미생물.제1항 내지 제8항 중의 어느 한 항에 따른 효소 또는 당해 효소의 함유물을 사용하여, 카복시 성분과 아민 성분으로부터 디펩티드를 생성함을 포함하는, 디펩티드의 제조방법.