초록

본 발명은 래트 척수 외상 동물모델과 개 척수 마비 동물모델을 이용하여 과학적 분석을 통해 척수 손상을 치료할 수 있는 CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성, 그리고 CD117 양성 인간 제대혈 유래 줄기세포를 이용한 세포치료제 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 세포 치료제 조성물을 사용하면 척수 손상을 개선 및 치료할 수 있으며, 본 발명으로 인해 대체치료법이 없는 난치병 환자인 척수마비 환자들에게 새로운 희망을 안겨줄 것으로 기대된다.

대표청구항 ▼

CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 척수 마비(SPINAL CORD INJURY) 치료 및 개선을 위한 세포 치료제 조성물.출산 24시간 이내의 순수 제대혈로, 1 유닛(UNIT) 당 부피가 45 ㎖ 이상인 CD34 음성 제대혈에 항응고제를 가하고;항응고제가 혼합된 제대혈을 저-포도당 DMEM(LOW-GLUCOSE DULBECCO'S MODIFIED EAGLE MEDIA) 배지로 희석하고 원심분리하여 단핵구를 수확하고; 그리고,얻어진 단

CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 척수 마비(SPINAL CORD INJURY) 치료 및 개선을 위한 세포 치료제 조성물.출산 24시간 이내의 순수 제대혈로, 1 유닛(UNIT) 당 부피가 45 ㎖ 이상인 CD34 음성 제대혈에 항응고제를 가하고;항응고제가 혼합된 제대혈을 저-포도당 DMEM(LOW-GLUCOSE DULBECCO'S MODIFIED EAGLE MEDIA) 배지로 희석하고 원심분리하여 단핵구를 수확하고; 그리고,얻어진 단핵구를 10% FBS(FETAL BOVINE SERUM)가 포함된 저-포도당 DMEM 배지에 20 일 동안 배양하여 얻어진 CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.냉동보관된 제대혈을 해동하여 저-포도당 DMEM(LOW-GLUCOSE DULBECCO'S MODIFIED EAGLE MEDIA) 배지로 희석하고 원심분리하여 단핵구를 수확하고; 그리고,얻어진 단핵구를 10% FBS(FETAL BOVINE SERUM)가 포함된 저-포도당 DMEM 배지에 20 일 동안 배양하여 얻어진 CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.냉동보관된 제대혈에서 조직적합성 유전자 A, B, DR 검사를 미리 시행하고;조직적합성 유전자가 적어도 DR이 1 개 이상 일치하는 제대혈 두 유닛 이상에서 각각 해동하여 저-포도당 DMEM(LOW-GLUCOSE DULBECCO'S MODIFIED EAGLE MEDIA) 배지로 각각 희석하고 원심분리하여 단핵구를 수확하고;얻어진 단핵구를 10% FBS(FETAL BOVINE SERUM)가 포함된 저-포도당 DMEM 배지에 각각 20 일 동안 배양하여 얻어진 두 유닛 이상의 CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.래트에서의 척수신경 외상 이후, 이식에 따른 비비비 오픈 필드 스코어에서 뒷다리 운동기능의 향상을 유도하는, CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.래트에서의 척수신경 외상 이후, 이식에 따른 그리드 워크 테스트에서 뒷다리 운동기능의 향상을 유도하는, CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.래트에서의 척수신경 외상 이후, 이식에 따른 발자국 분석에서 뒷다리 운동기능의 향상을 유도하는, CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.래트에서의 척수신경 외상 이후, 상처공간 감소 효과가 있는, CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.제대혈의 유전자 형태 중 HLA-DR이 일치하는 두 개 이상의 제대혈을 사용하여 분리한, CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.래트, 개 및 척추동물의 완전한 척수손상 모델에서 척수 마비(SPINAL CORD INJURY) 치료 및 개선 효과를 갖는, CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.척추동물의 신경학적 평가 결과를 향상시키는, CD34 음성, CD45 양성, CD31 양성, CD13 양성, CD90 양성 및 CD117 양성의 제대혈 유래 줄기세포를 포함하는 세포 치료제 조성물.제 1 항의 척수 마비(SPINAL CORD INJURY) 치료 및 개선을 위한 세포 치료제 조성물을 면역 억제제 없이 단독으로 사용하는 방법.척수 마비(SPINAL CORD INJURY) 치료 및 개선을 위해, 제대혈의 유전자 형태 중 HLA-DR이 일치하는 두 개 이상의 제대혈을 사용하는 방법.투시기(FLUOROSCOPY) 하에서 요추와 천추 사이 공간에 경막외 주사바늘(EPIDURAL NEEDLE)을 삽입하고;경막외 주사바늘에 유도철사(GUIDE WIRE)를 삽입한 후 경막외 주사바늘을 제거하고;유도철사를 통해 안내도관(INTRODUCER)을 장착한 후 유도철사를 제거하고;안내도관을 통해 혈관성형풍선도관(ANGIOPLASTY BALLOON CATHETER)을 삽입하고;혈관성형풍선도관의 풍선을 부풀려 척수 손상을 유발하는 단계를 포함하는,실험용 척추동물에서 비침습적으로 척수손상을 유발하는 방법에 있어서,혈관성형 풍선 도관의 압박 시간을 30분 이상 유지시키는 방법.수술적 요법이 아닌, 비침습적, 비수술적, 비감염적 방법으로 X선-투시기 유도 하에 척수 손상이 유발된 부위 전, 후, 그리고 손상부위에 23 게이지 이상의 척수 바늘을 척수로 곧바로 이식하는 줄기세포 이식 방법.