초록

포유동물 세포, 바람직하게는 사람 세포를 배양하여 단백질의 생산, 재조합 또는 내생을 향상시키는 방법이 교시된다. 또한 셀라인, 특히 1차 배양으로부터 확립된 셀라인의 성장 및 장기간 생존을 위한 방법이 제공된다. 또한, 변화하는 수준의 선택된 아미노산을 함유하고, 각종 성장 인자 및 트레이스 요소로 보충된 세포 배양 배지가 제공된다. 추가적으로, 배지는 선택적으로 무혈청이며, 바람직하게는 글루코스를 제외한 에너지원을 사용한다. 배지는 특히 사람 태아 세포의 1차 배양 및 장기간 배양에 적합하다.

대표청구항 ▼

3000 mg/L 내지 1000 mg/L의 농도로 존재하는 과당으로 본질적으로 구성되는 1차 에너지원을 갖는 무혈청 세포 배양 배지의 조성물.제 1 항에 있어서, 7.2의 pH 및 290 mOsm의 삼투압을 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.제 1 항에 있어서, 적어도 하나의 세포외 기질 인자를 추가적 성분으로서 갖는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지.제 1 항에 있어서, 사람 이자 상피관 세포의 배양을 위해 최적화되는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지.제 1 항에 있어서, 사람 신장 세포의 배양을 위해 최적화되는 것을 특징으로

3000 mg/L 내지 1000 mg/L의 농도로 존재하는 과당으로 본질적으로 구성되는 1차 에너지원을 갖는 무혈청 세포 배양 배지의 조성물.제 1 항에 있어서, 7.2의 pH 및 290 mOsm의 삼투압을 갖는 것을 특징으로 하는 조성물.제 1 항에 있어서, 적어도 하나의 세포외 기질 인자를 추가적 성분으로서 갖는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지.제 1 항에 있어서, 사람 이자 상피관 세포의 배양을 위해 최적화되는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지.제 1 항에 있어서, 사람 신장 세포의 배양을 위해 최적화되는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지.제 1 항에 있어서, 사람 태아 세포의 1차 배양을 확립하기 위해 최적화 되는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지.제 1 항에 있어서, 하기의 대략적 수준으로 하기 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지: 염화칼슘(CaCl제 1 항에 있어서, 하기 대략적 수준으로 하기 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지: 아셀렌산 나트륨(NaSeO제 1 항에 있어서, 하기 대략적 수준으로 하기 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지: L-알라닌, 10-40(mg/L)| L-아스파라긴(유리염기), 8-35(mg/L)| L-아스파라긴-H제 1 항에 있어서, 하기 대략적 수준으로 하기 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지: 비오틴, 5.6x10제 1 항에 있어서, 약 5 내지 50 mM의 농도로 HEPES (4-[2-히드록시에틸]-1-피페라진-에탄술폰산) 완충제를 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지.제 1 항에 있어서, 하기 대략적 수준 또는 그 이하로 하기 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지: 퓨트레신-2HCl, 0.02-0.08(mg/L)| 티옥트산, 0.03-0.10(mg/L)| 피루브산 나트륨, 55-165(mg/L)| 및 리놀레산, 0.01-0.04(mg/L).제 1 항에 있어서, 하기 대략적 수준으로 적어도 하나의 하기 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지: 0.1-100㎍/ml의 최종농도의 성장 호르몬| 0.0005-0.05 IU/ml의 최종농도의 소마토트로핀| 0.1-10㎍/ml의 최종농도의 뇌하수체 추출물| 0.5-100㎍/ml의 최종농도의 아프로티닌| 0.1-100ng/ml 및 바람직하게는 10 ng/ml의 최종농도의 표피 성장 인자| 및 0.1-50㎍/ml의 최종농도의 피브로넥틴.제 1 항에 있어서, 하기 대략적 수준으로 적어도 하나의 하기 성분을 포함하는 것을 특징으로 하는 세포 배양 배지: 0.1-10μM의 최종농도의 에탄올아민| 0.1-10μM의 최종농도의 포스포에탄올아민| 1-25pM의 최종농도의 트리이오디티로닌| 1-100nM의 최종농도의 셀레늄| 0.1-50 nM의 최종농도의 하이드로코르티손| 0.1-50μM의 최종농도의 폴스콜린| 및 0.1-50의 최종농도의 헤레글린.지시된 최종 농도로 존재하는 하기 성분을 갖는 무혈청 세포 배양 배지의 조성물: 180 mg/L의 염화칼슘, 298 mg/L의 염화칼륨, 0.0126 mg/L의 질산칼륨, 68mg/L의 황산 마그네슘, 37 mg/L의 염화마그네슘, 6200 mg/L의 염화나트륨, 1200 mg/L의 중탄산나트륨, 43mg/L의 인산나트륨, 88 mg/L의 인산나트륨(2염기성), 0.0126 mg/L의 아셀렌산 나트륨, 메타바나듐산 암모늄 3.51x10세포의 성장에 적합한 조건하에서, 3000 mg/L 내지 1000 mg/L의 농도로 존재하는 과당으로 본질적으로 구성되는 1차 에너지원을 갖는 무혈청 세포 배양 배지로 세포를 접종시키는 것을 포함하는 세포의 배양 방법.제 16 항에 있어서, 세포를 하기 생물학적 시스템의 조직으로 구성되는 군으로부터 선택되는 조직으로부터 단리시키는 것을 특징으로 하는 방법:제 16 항에 있어서, 세포를 포유동물 태아 조직으로부터 단리시키는 것을 특징으로 하는 방법.