본 발명은 지방-유래 전구세포의 조절된 분화를 위한 간단한 방법을 제공한다. 이 방법은 분화된 세포를 제조하는데 제공된다. 이 방법은 A) A) 지방-유래 전구세포 및 (B) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포의 혼합에 의한 혼합물의 수득; 및 B) 지방-유래 전구세포를 분화하게 하는 충분한 조건 하에 혼합물의 배양으로 구성된다. 본 발명은 A) 지방-유래 전구세포 및 B) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포로 구성된 세포 이식을 위한 조성물 또한 제공한다.
대표청구항▼
A) a) 지방-유래 전구세포 및 b) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포의 혼합에 의해 혼합물을 수득하는 단계 | 및B) 지방-유래 전구세포를 분화하게 하는 충분한 조건 하에서 이 혼합물을 배양하는 단계로 구성된 분화된 세포의 제조방법제 1항에 있어서, 상기 분화된 세포는 간엽 세포임을 특징으로 하는 방법제 1항에 있어서, 상기 분화된 세포는 지방세포, 골수세포, 조골세포, 연골세포, 섬유아세포, 근섬유아세포, 신경세포, 골격근세포, 심근세포, 혈관내피세포, 혈관평활근세포, 간세포 및 신장세포로 구성된 군에서 선택됨을 특
A) a) 지방-유래 전구세포 및 b) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포의 혼합에 의해 혼합물을 수득하는 단계 | 및B) 지방-유래 전구세포를 분화하게 하는 충분한 조건 하에서 이 혼합물을 배양하는 단계로 구성된 분화된 세포의 제조방법제 1항에 있어서, 상기 분화된 세포는 간엽 세포임을 특징으로 하는 방법제 1항에 있어서, 상기 분화된 세포는 지방세포, 골수세포, 조골세포, 연골세포, 섬유아세포, 근섬유아세포, 신경세포, 골격근세포, 심근세포, 혈관내피세포, 혈관평활근세포, 간세포 및 신장세포로 구성된 군에서 선택됨을 특징으로 하는 혼합물제 1항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 CD13, CD29, CD34, CD36, CD44, CD49d, CD54, CD58, CD69, CD71, CD73, CD90, CD105, CD106, CD151 및 SH3으로 구성된 군에서 선택된 적어도 하나의 단백질을 발현하는 세포임을 특징으로 하는 방법제 4항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 CD13, CD29, CD34, CD36, CD44, CD49d, CD54, CD58, CD69, CD71, CD73, CD90, CD105, CD106, CD151 및 SH3을 발현하는 세포임을 특징으로 하는 방법제 4항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 CD31, CD45, CD117 및 CD146으로 구성된 군에서 선택된 적어도 하나의 단백질을 더욱 발현하는 세포임을 특징으로 하는 방법제 1항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 CD56을 발현하지 않는 세포임을 특징으로 하는 방법제 1항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 CD56이 아니라 CD49d를 발현하는 세포임을 특징으로 하는 방법제 1항에서 있어서, 상기 방법은 분화된 세포 내로 분화를 촉진하기 위한 약제를 제공하는 것을 더욱 포함함을 특징으로 하는 방법제 1항에 있어서, 상기 혼합물은 부신피질 스테로이드, 인슐린, 포도당, 인도메타신, 이소부틸-메틸크산틴(IBMX), 아스코르빈산 및 그 유도체, 글리세로포스페이트, 에스트로겐 및 그 유도체, 프로게스테론 및 그 유도체, 안드로겐 및 그 유도체, 성장인자(growth factor), 뇌하수체 분비물 추출물(pituitary gland extracts), 송과선 추출물(pineal body extracts), 레티논산, 비타민 D, 갑상선 호르몬, 우태아 혈청, 말 혈청, 인간 혈청, 헤파린, 탄산수소나트륨, HEPES, 알부민, 트랜스페린(transferrin), 셀레네이트(selenates), 리놀레인산, 3-이소부틸-1-메틸크산틴, 탈메틸화제, 히스톤 탈아세틸레이트제(histone deacetylating agents), 악티빈(activin), 사이토카인, 헥사메틸렌비스아세트아마이드(HMBA), 다이메틸아세트아마이드(DMA), 디부틸 cAMP(dbcAMP), 디메틸설폭사이드(DMSO), 요도디옥시유리딘(IdU), 하이록시우레아(hyroxyurea(HU)), 사이토신 아라비노사이드(cytosine arabinoside(AraC)), 마이토마이신 C(mitomycin C(MMC)), 소디움 뷰티레이트(sodium butyrate(NaBu)), 폴리브렌(polybrene) 및 셀레늄으로 구성된 군에서 선택된 적어도 하나의 성분을 포함하는 배지에서 배양됨을 특징으로 하는 방법제 1항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포에 대한 지방-유래 전구세포의 존재비는 요구되는 부위에서 건강한 조직 내 분화된 세포에 대한 줄기세포의 존재비 보다 더 큰 것을 특징으로 하는 방법제 1항에 있어서, 상기 혼합물 내 지방-유래 전구세포의 비율은 요구되는 부위에서 건강한 조직 내 줄기세포의 비율보다 더 큰 것을 특징으로 하는 방법제 1항에 있어서, 상기 혼합물 내 지방-유래 전구세포의 비율은 요구되는 부위에서 건강한 조직의 줄기세포의 비율보다 약 2∼10 배 더 큰 것을 특징으로 하는 방법지방-유래 전구세포| 및요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포로 구성된 세포 혼합물제 14항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포에 대한 지방-유래 전구세포의 존재비는 요구되는 부위에서 건강한 조직 내 분화된 세포에 대한 줄기세포의 존재비 보다 더 큰 것을 특징으로 하는 세포 혼합물제 14항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포에 대한 지방-유래 전구세포의 존재비는 요구되는 부위에서 건강한 조직 내 분화된 세포에 대한 줄기세포의 존재비 보다 약 2∼10배 더 큰 것을 특징으로 하는 세포 혼합물제 14항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포에 대한 지방-유래 전구세포의 존재비는 요구되는 부위에서 건강한 조직 내 분화된 세포에 대한 줄기세포의 존재비 보다 약 2∼5배 더 큰 것을 특징으로 하는 세포 혼합물제 14항에 있어서, 상기 세포 혼합물은 지방-유래 전구세포가 분화하게 하는 충분한 조건 하에 노출됨을 특징으로 하는 세포 혼합물제 14항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포는 지방세포이고, 혼합물 내 지방-유래 전구세포의 비율이 지방 조직 내 지방-유래 전구세포의 비율 보다 더 큰 것을 특징으로 하는 세포 혼합물제 19항에 있어서, 상기 혼합물 내 지방-유래 전구세포의 비율은 요구되는 부위에서 건강한 조직의 지방-유래 전구세포의 비율 보다 더 큰 것을 특징으로 하는 세포 혼합물제 19항에 있어서, 상기 혼합물 내 지방-유래 전구세포의 비율은 요구되는 부위에서 건강한 조직의 지방-유래 전구세포의 비율 보다 약 2∼10배 더 큰 것을 특징으로 하는 세포 혼합물제 19항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 흡입된 세포로부터 유래됨을 특징으로 하는 세포 혼합물제 19항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 지방흡입에 의한 흡인물의 액체 비율로부터 유래됨을 특징으로 하는 세포 혼합물a) 지방-유래 전구세포| 및b) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포로 구성된 세포 이식을 위한 조성물제 24항에 있어서, 상기 조성물은 요구되는 부위 내로 이식됨을 특징으로 하는 조성물제 24항에 있어서, 상기 분화된 세포는 간엽 세포임을 특징으로 하는 조성물제 24항에 있어서, 상기 분화된 세포는 지방세포, 골수세포, 조골세포, 연골세포, 섬유아세포, 근섬유아세포, 신경세포, 골격근세포, 심근세포, 혈관내피세포, 혈관평활근세포, 간세포 및 신장세포로 구성된 군에서 선택됨을 특징으로 하는 조성물제 24항에 있어서, 상기 분화된 세포는 흡입된 지방에서 제공됨을 특징으로 하는 조성물제 24항에 있어서, 상기 분화된 세포는 지방흡입에 의한 흡인물의 액체 비율에서 제공됨을 특징으로 하는 조성물제 24항에 있어서, 상기 조성물은 부신피질 스테로이드, 인슐린, 포도당, 인도메타신, 이소부틸-메틸크산틴(IBMX), 아스코르빈산 및 그 유도체, 글리세로포스페이트, 에스트로겐 및 그 유도체, 프로게스테론 및 그 유도체, 안드로겐 및 그 유도체, 성장인자(growth factor), 뇌하수체 분비물 추출물(pituitary gland extracts), 송과선 추출물(pineal body extracts), 레티논산, 비타민 D, 갑상선 호르몬, 우태아 혈청, 말 혈청, 인간 혈청, 헤파린, 탄산수소나트륨, HEPES, 알부민, 트랜스페린(transferrin), 셀레네이트(selenates), 리놀레인산, 3-이소부틸-1-메틸크산틴, 탈메틸화제, 히스톤 탈아세틸레이트제(histone deacetylating agents), 악티빈(activin), 사이토카인, 헥사메틸렌비스아세트아마이드(HMBA), 다이메틸아세트아마이드(DMA), 디부틸 cAMP(dbcAMP), 디메틸설폭사이드(DMSO), 요도디옥시유리딘(IdU), 하이록시우레아(hyroxyurea(HU)), 사이토신 아라비노사이드(cytosine arabinoside(AraC)), 마이토마이신 C(mitomycin C(MMC)), 소디움 뷰티레이트(sodium butyrate(NaBu)), 폴리브렌(polybrene) 및 셀레늄으로 구성된 군에서 선택된 적어도 하나의 성분을 더욱 포함함을 특징으로 하는 조성물제 24항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 분화된 세포와 동종이계(allogenic)임을 특징으로 하는 조성물제 24항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 분화된 세포와 동급체(isologous)임을 특징으로 하는 조성물A) a) 지방-유래 전구세포| 및 b) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포로 구성된 조성물을 제공하는 단계| 및B) 피험자에 조성물을 투여하는 단계로 구성된 분화된 세포의 결핍에 의한 질병, 장해 또는 비정상적인 상태를 치료하거나 예방하기 위한 방법a) 지방-유래 전구세포|b) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포| 및c) 약학적으로 수용 가능한 캐리어로 구성된 분화된 세포의 결핍에 의한 질병, 장해 또는 비정상적인 상태를 치료하거나 예방하기 위한 약제분화된 세포의 결핍에 의한 질병, 장애 또는 비정상적인 상태를 치료하거나 예방하기 위한 약제의 제조를 위한 a) 지방-유래 전구세포| 및 b) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포의 혼합물의 사용A) a) 지방-유래 전구세포| 및 b) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포로 구성된 조성물을 제공하는 단계| 및B) 피험자에 조성물을 투여하는 단계로 구성된 성형성 질환을 치료하거나 개선하기 위한 방법제 36항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포는 지방세포임을 특징으로 하는 방법제 36항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포는 복부 지방으로부터 유래됨을 특징으로 하는 방법제 36항에 있어서, 상기 성형성 질환은 가슴의 성형성 질환임을 특징으로 하는 방법제 36항에 있어서, 상기 방법은 피험자의 지방에서 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포를 얻는 것을 더욱 포함함을 특징으로 하는 방법제 40항에 있어서, 지방을 얻는 단계는 흡입된 지방에 의해 수행됨을 특징으로 하는 방법제 36항에 있어서, 상기 방법은 피험자의 복부에서 지방-유래 전구세포를 얻는 것을 더욱 포함함을 특징으로 하는 방법제 36항에 있어서, 상기 방법은 피험자의 흡입된 지방에서 지방-유래 전구세포를 얻는 것을 더욱 포함함을 특징으로 하는 방법제 43항에 있어서, 상기 방법은 지방흡입에 의한 흡인물의 액체 부분에서 지방-유래 전구세포를 얻는 것을 더욱 포함함을 특징으로 하는 방법a) 지방-유래 전구세포|b) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포| 및c) 약학적으로 수용 가능한 캐리어로 구성된 성형성 질환을 치료하거나 개선하기 위한 약제제 45항에 있어서, 상기 성형성 질환은 가슴의 성형성 질환임을 특징으로 하는 약제제 45항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포는 지방세포임을 특징으로 하는 약제제 45항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포는 복부 지방세포임을 특징으로 하는 약제제 45항에 있어서, 상기 지방-유래 전구세포는 복부 지방으로부터 유래됨을 특징으로 하는 약제제 45항에 있어서, 상기 약제 내 지방-유래 전구세포의 비율은 요구되는 부위에서 건강한 조직 내 줄기세포의 비율 보다 더 큰 것을 특징으로 하는 약제제 45항에 있어서, 상기 약학적으로 수용 가능한 캐리어는 세포 배양배지 또는 버퍼로 구성됨을 특징으로 하는 약제성형성 질환을 치료하거나 개선하기 위한 약제의 제조를 위한 a) 지방-유래 전구세포| 및 b) 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포의 혼합물의 사용제 52항에 있어서, 상기 요구되는 부위에 상응하는 분화된 세포에 대한 지방-유래 전구세포의 존재비는 요구되는 부위의 건강한 조직 내 분화된 세포에 대한 줄기세포의 존재비 보다 더 큰 것을 특징으로 하는 사용제 52항에 있어서, 상기 혼합물 내 지방-유래 전구세포의 비율은 요구되는 부위의 건강한 조직 내 줄기세포의 비율 보다 약 2∼10배 더 큰 것을 특징으로 하는 사용
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