초록 ▼

본 발명은 신경관(neural crest)으로부터 유도된 세포, 바람직하게는 수상돌기세포 형태의 뉴런세포를 위한 담체로서 유용한 다이아몬드-유사 탄소(DLC)로 고분자 표면을 코팅하는 방벙을 설명한다. DLC로 코팅된 생체고분자는 뇌, 안구, 중추 및 말초신경계, 폐, 간, 지라, 신장 및 골과 연골을 포함하는 신체의 다양한 부위에 세포를 이식하기 위한 담체 시스템으로서 사용할 수 있는 생분해성 고분자 및 다른 이식가능한 생체고분자를 포함할 것이다. 상기 생체고분자는 시트형태 또는 미세입자 형태가 될 수 있고, 그의 합성중에 신

본 발명은 신경관(neural crest)으로부터 유도된 세포, 바람직하게는 수상돌기세포 형태의 뉴런세포를 위한 담체로서 유용한 다이아몬드-유사 탄소(DLC)로 고분자 표면을 코팅하는 방벙을 설명한다. DLC로 코팅된 생체고분자는 뇌, 안구, 중추 및 말초신경계, 폐, 간, 지라, 신장 및 골과 연골을 포함하는 신체의 다양한 부위에 세포를 이식하기 위한 담체 시스템으로서 사용할 수 있는 생분해성 고분자 및 다른 이식가능한 생체고분자를 포함할 것이다. 상기 생체고분자는 시트형태 또는 미세입자 형태가 될 수 있고, 그의 합성중에 신경세포 부착 및 성장을 촉진하고 도모하는 부착 및 성장 촉진제가, 그의 구조물 내부로 함입 또는 투입될 수 있다. 또한, 이러한 코팅방법은 배양된 송아지 각막 내피세포에 의하여 분비되는 세포외 기질(ECM)과 같은 다른 코팅제 뿐만 아니라, 피브로넥틴, 라미닌 및 RGDS와 같은 점착성 분자로 확대될 수 있다. 상기 코팅단계는 ECM이 코팅된 표면 또는 부착인자가 코팅된 표면의 위에 DLC 층이 추가되는 방식으로 순차적으로 진행될 수 있다.

대표청구항 ▼

고품질의 수소가 없는 다이아몬드-유사 탄소표면으로 코팅된 생체고분자를 포함하는 세포의 부착을 증대시키기 위한 개량된 표면.제 1항에 있어서,전기 생체고분자는 생분해성을 갖는 것을 특징으로 하는개량된 표면.제 1항에 있어서,전기 생체고분자는 시트(SHEET)의 형태인 것을 특징으로 하는개량된 표면.제 1항에 있어서,전기 생체고분자는 미세입자 형태인 것을 특징으로 하는개량된 표면.고품질의 수소가 없는 다이아몬드-유사 탄소표면으로 코팅된 생체고분자에 뉴런을 접종 및 성장시키는 단계를 포함하는, 배양물에서 뉴런을 성장시키는 방법.제 5항에

고품질의 수소가 없는 다이아몬드-유사 탄소표면으로 코팅된 생체고분자를 포함하는 세포의 부착을 증대시키기 위한 개량된 표면.제 1항에 있어서,전기 생체고분자는 생분해성을 갖는 것을 특징으로 하는개량된 표면.제 1항에 있어서,전기 생체고분자는 시트(SHEET)의 형태인 것을 특징으로 하는개량된 표면.제 1항에 있어서,전기 생체고분자는 미세입자 형태인 것을 특징으로 하는개량된 표면.고품질의 수소가 없는 다이아몬드-유사 탄소표면으로 코팅된 생체고분자에 뉴런을 접종 및 성장시키는 단계를 포함하는, 배양물에서 뉴런을 성장시키는 방법.제 5항에 있어서,전기 생체고분자는 생분해성을 갖는 것을 특징으로 하는방법.제 5항에 있어서,전기 생체고분자는 시트(SHEET)의 형태인 것을 특징으로 하는방법.제 5항에 있어서,전기 생체고분자는 미세입자 형태인 것을 특징으로 하는방법.제 1항에 있어서,전기 생체고분자는 그의 합성도중 라미닌(LAMININ), 피브로넥틴(FIBRONECTIN), RGDS, 폴리카보필과 결합된 BFGF, 폴리카보필과 결합된 EGF 및 헤파린 설페이트 중의 하나 또는 그 이상을 포함하는 부착제가 그의 구조물 내부로 함입 또는 투입되는 것을 특징으로 하는개량된 표면.제 9항의 방법을 사용하여 제조된 생체고분자에 뉴런을 접종 및 성장시키는 단계를 포함하는, 배양물에서 뉴런을 성장시키는 방법.(Ⅰ) 하기 생체고분자의 단위체에 저밀도로 이식된 신경 또는 신경세포가 증식되어 신경신호(NEURAL PROCESS)를 보내기에 충분하도록, 합성도중 라미닌(LAMININ), 피브로넥틴(FIBRONECTIN), RGDS, 폴리카보필과 결합된 BFGF, 폴리카보필과 결합된 EGF 및 헤파린 설페이트 또는 신경성장인자 중의 하나 또는 그 이상을 포함하는 부착제가 그의 구조물 내부로 함입 또는 투입된 생체고분자 단위체;(Ⅱ) 상기 신경신호 또는 수상돌기가 전기적으로 접속하기 위한 수단을 가지는 통합된 회로칩(INTERGATED CIRCUIT CHIP) 또는 전하가 결합된 장치;(Ⅲ) 뉴런에서 발생하는 전기신호를 측정하기 위한 검출수단; 및,(Ⅳ) 검출수단에 상기 칩을 부착하기 위한 수단을 포함하는, 신경세포신호의 검출장치.제 11항에 있어서,상기 생체고분자 단위체는 독립적으로 자활하는(SELF-CONTAINED) 것을 특징으로 하는검출장치.제 11항에 있어서,상기 생체고분자 단위체는 반고체(SEMI-SOLID)인 것을 특징으로 하는검출장치.제 11항에 있어서,상기 통합된 회로칩 또는 전하가 결합된 장치는 생체고분자의 합성도중 신경성장인자 또는 다이아몬드-유사 탄소 중의 하나 또는 그 이상을 포함하는 부착제가 코팅되어, 신경신호 또는 수상돌기와 상기 칩간의 전기적인 접촉을 증대시키는 것을 특징으로 하는검출장치.신경성장을 도모할 수 있는 반고체 생체고분자를 포함하는 신경세포의 성장 및 분열을 도모하기에 적합한 삼차원 성장배지.제 15항에 있어서,메이폴리머("MAY POLYMER")를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는성장배지.제 16항에 있어서,상기 메이폴리머는 상기 생체고분자 단위체로 저밀도로 이식된 신경 또는 신경세포가 증식되어 신경신호(NEURAL PROCESSES)를 보내기에 충분하도록, 합성도중 라미닌, 피브로넥틴, RGDS, 폴리카보필과 결합된 BFGF, 폴리카보필과 결합된 EGF 및 헤파린 설페이트 또는 신경성장인자 중의 하나 또는 그 이상을 포함하는 부착제가 그의 구조물 내부로 함입 또는 투입된 것을 특징으로 하는성장배지.제 17항에 있어서,폴리카보필과 결합된 BFGF 또는 헤파린 설페이트의 농도는 약 50㎍/㎖이고, 폴리카보필과 결합된 NGF 또는 헤파린 설페이트의 농도는 약 50㎍/㎖이며, 라미닌의 농도는 약 500㎍/㎖이고, RGDS의 농도는 약 500㎍/㎖인 것을 특징으로 하는성장배지.다이아몬드-유사 탄소로 코팅된 신경성장을 도모할 수 있는 반고체 생체고분자를 포함하는 신경세포의 성장 및 분열을 도모하기에 적합한 삼차원 성장배지.제 19항에 있어서,메이폴리머("MAY POLYMER")를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는성장배지.제 20항에 있어서,상기 메이폴리머는 상기 생체고분자 단위체로 저밀도로 이식된 신경 또는 신경세포가 증식되어 신경신호(NEURAL PROCESSES)를 보내기에 충분하도록, 합성도중 라미닌, 피브로넥틴, RGDS, 폴리카보필과 결합된 BFGF, 폴리카보필과 결합된 EGF 및 헤파린 설페이트 또는 신경성장인자 중의 하나 또는 그 이상을 포함하는 부착제가 함입 또는 투입된 것을 특징으로 하는성장배지.제 21항에 있어서,상기 생체고분자는 비드(BEAD), 시트(SHEET) 또는 미세입자(MICRO-PARTICLE)의 형태로 성형되는 것을 특징으로 하는성장배지.제 19항의 성장배지에 목적하는 뉴런을 접종하고, 충분한 밀도로 뉴런을 성장시키며, 숙주의 성장배지로 전기 뉴런을 도입하는 단계를 포함하는, 수령 숙주(RECIPIENT HOST)에 뉴런을 이식하는 방법.BCE-ECM으로 코팅된 신경성장을 도모할 수 있는 반고체 생체고분자를 포함하는 신경세포의 성장 및 분열을 도모하기에 적합한 삼차원 성장배지.(Ⅰ) 성장에 적합한 배양배지에 있는 송아지 각막 내피(BCE) 세포군을 낮은 밀도로 삼차원 성장배지에 접종하는 단계; (Ⅱ) 군집체가 되도록 상기 BCE 세포를 성장시키는 단계; 및,(Ⅲ) 배지를 흡입하고, 세포를 제거하기에 충분한 시간동안 수산화암모늄을 전기 삼차원 성장배지에 처리하는 단계를 포함하는, 제 24항의 성장배지를 제조하는 방법.BCE-ECM과 다이아몬드-유사 탄소로 코팅된 신경성장을 도모할 수 있는 반고체 생체고분자를 포함하는 신경세포의 성장 및 분열을 도모하기에 적합한 삼차원 성장배지.제 26항에 있어서,메이폴리머("MAY POLYMER")를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는성장배지.제 20항에 있어서,상기 메이폴리머는 상기 생체고분자 단위체로 저밀도로 이식된 신경 또는 신경세포가 증식되어 신경신호(NEURAL PROCESSES)를 보내기에 충분하도록, 합성도중 라미닌, 피브로넥틴, RGDS, 폴리카보필과 결합된 BFGF, 폴리카보필과 결합된 EGF 및 헤파린 설페이트 또는 신경성장인자 중의 하나 또는 그 이상을 포함하는 부착제가 그의 구조물 내부로 함입 또는 투입된 것을 특징으로 하는성장배지.제 26항에 있어서,상기 생체고분자는 비드(BEAD), 시트(SHEET) 또는 미세입자(MICRO-PARTICLE)의 형태로 성형되는 것을 특징으로 하는성장배지.세포 및 세포배지와 접촉하고, 다이아몬드-유사-코팅층의 필름으로 코팅된 내측면 및 외측면을 포함하며, 세포의 성장 및 부착을 유도하기에 적합한 코팅층을 가지는 실험장치.제 30항에 있어서,세포배양용 디쉬, 페트리 디쉬, 조직배양용 플라스크, 플레이트, 용기, 슬라이드, 필터 챔버, 슬라이드 챔버, 롤러 바틀(ROLLER BOTTLE), 수집기(HARVESTER) 및 튜브로 구성된 그룹으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는실험장치.적어도 하나의 다른 코팅층의 위에 위치한 다이아몬드-유사-코팅층의 필름으로 코팅된 부위를 포함하고, 세포의 성장 및 부착을 유도하기에 적합한 코팅층을 가지는 실험장치.제 32항에 있어서,전기 코팅층은 세포외 기질(EXTRACELLULAR MATRIX)인 것을 특징으로 하는 실험장치.제 33항에 있어서,전기 코팅층은 BCE-ECM인 것을 특징으로 하는 실험장치.다이아몬드-유사-코팅층의 필름을 내측면에 도포하는 단계를 포함하는 세포의 성장 및 부착을 유도하기에 적합한 실험장치를 코팅하는 방법.제 35항에 있어서,전기 실험장치의 내측면을 적어도 하나의 다른 BCE-ECM과 같은 코팅층으로 먼저 코팅하고, 그런 다음 다이아몬드-유사-코팅층으로 코팅하는 단계를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는방법.제 35항의 방법으로 제조된 장치.제 36항의 방법으로 제조된 장치.고품질의 수소가 없는 다이아몬드-유사 탄소표면으로 코팅된 합성 생체고분자를 포함하는 세포의 성장 및 부착용 개량된 표면.제 39항에 있어서,합성 고분자는 폴리메틸 메타아크릴레이트, 폴리-N-이소프로필아크릴아미드 또는 폴리-2-히드록시메타아크릴레이트, 또는 폴리비닐알콜 및 그의 유도체 및 공중합체와 같은, 아크릴 고분자 및 그의 유도체 또는 공중합체인 것을 특징으로 하는개량된 표면.