초록 ▼

본 발명은 세포를 동결 건조할 때 고농도의 트리할로즈(trehalose)를 세포에 처리하는 과정이 필수적인데 이 과정에서 발생하는 세포 손상을 최소화하는 방법에 관한 것이다. 특히 트리할로즈를 부과하는 여러 가지 방법 중에서 세포 외부를 고농도 트리할로즈 환경을 만들어 이차적으로 세포 내부를 고농도 트리할로즈로 만드는 방법에 관한 것이다. 기존의 방법은 세포막에 트리할로즈 버퍼(buffer)만 부과하는 방법이기 때문에 세포 손상이 심해 임상적으로 바로 사용하기에는 무리가 따르지만 본 방법을 사용하면 세포의 손상을 최소화하면서 안전하

본 발명은 세포를 동결 건조할 때 고농도의 트리할로즈(trehalose)를 세포에 처리하는 과정이 필수적인데 이 과정에서 발생하는 세포 손상을 최소화하는 방법에 관한 것이다. 특히 트리할로즈를 부과하는 여러 가지 방법 중에서 세포 외부를 고농도 트리할로즈 환경을 만들어 이차적으로 세포 내부를 고농도 트리할로즈로 만드는 방법에 관한 것이다. 기존의 방법은 세포막에 트리할로즈 버퍼(buffer)만 부과하는 방법이기 때문에 세포 손상이 심해 임상적으로 바로 사용하기에는 무리가 따르지만 본 방법을 사용하면 세포의 손상을 최소화하면서 안전하게 트리할로즈를 고농도로 부과할 수 있다.세포 모델로는 인간의 적혈구 세포를 선택했으며 실험방법으로는 적혈구를 15시간 동안 37℃에서 배양하면서 여러 실험 조건에 따른 용혈 현상을 관찰하였다. 이 실험에서 고농도의 트리할로즈를 세포에 부과시 용혈의 감소에 도움을 주는 최종 세포 보호 프로토콜의 물질과 농도는 5 × 10-4M L-ascorbic acid, 5 × 10-5M α-lipoic acid, 5 × 10-5M Melatonin, 3 × 10-4M N-actyl-L-cysteine, 10-5M δ-tocopherol 그리고 5 × 10-5M insulin이었다. 본 실험에서는 이들 물질을 복합적으로 사용하여 임상적으로 필요로 하는 세포 내부 농도인 60mM이상의 트리할로즈를 부과하면서도 5% 이하의 용혈 결과를 관찰할 수 있었다. 이러한 결과는 세포를 동결 건조할 때 고농도의 트리할로즈를 세포에 부과하는 특수한 상황에서 세포의 생존에 도움을 줄 수 있는 새로운 방법이기에 이의 내용에 대해 특허를 신청한다.

대표청구항

도 3의 결과에 대해 청구한다.

도 3의 결과에 대해 청구한다.