초록

본 발명은 모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자의 C1494T 돌연변이 검출에 사용가능한 실시간 정량적 MGB 프로브 및 이의 용도에 관한 것이다. 본 발명에서는 각각의 Taqman 돌연변이형, 야생형 MGB 프로브와, 한 쌍의 프라이머를 제작하였다. 실시간 정량적 Taqman MGB 프로브 방법에 의해 모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자의 C1494T 돌연변이의 유전자형을 분석한다. 따라서, 모계 유전성 청각장애를 진단할 수 있다.

대표청구항 ▼

모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자의 C1494T 돌연변이를 검출하기 위한 실시간 정량 TaqMan MGB 프로브로서, 상기 프로브의 5’말단은 모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자 서열인 서열번호 5에서 1482-1488 bp 영역에 위치되고;상기 프로브의 3’말단은 모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자 서열인 서열번호 5에서 1503-1508 bp 영역에 위치되고;상기 프로브 단편의 5' 말단은 리포터로 표지되어 있으며;상기 프로브 단편의 3' 말단은 비-형광 퀀칭 그룹인 MGB로 표

모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자의 C1494T 돌연변이를 검출하기 위한 실시간 정량 TaqMan MGB 프로브로서, 상기 프로브의 5’말단은 모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자 서열인 서열번호 5에서 1482-1488 bp 영역에 위치되고;상기 프로브의 3’말단은 모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자 서열인 서열번호 5에서 1503-1508 bp 영역에 위치되고;상기 프로브 단편의 5' 말단은 리포터로 표지되어 있으며;상기 프로브 단편의 3' 말단은 비-형광 퀀칭 그룹인 MGB로 표지되어 있으며;상기 프로브의 서열에서 서열번호 5의 1494bp에 해당되는 염기가 C에서 T로 치환되어 있으며, 이를 돌연변이형 실시간 정량 MGB 프로브라고 하는 것을 특징으로 하는 실시간 정량적 TaqMan MGB 프로브.제 1항에 있어서, 야생형 MGB 프로브를 더 포함하며;상기 야생형 MGB 프로브는, 1494bp의 염기가 C이고 5’말단 형광 리포터 그룹이 돌연변이형 MGB 프로브의 5’말단 형광 리포터 그룹과 상이하고, 프로브의 시작점이 1487bp이 아니라 1488bp인 것을 제외하고는, 상기 돌연변이형 실시간 정량 MGB 프로브와 동일한 것을 특징으로 하는 실시간 정량 TaqMan MGB 프로브.제 1항 또는 제 2항에 있어서, 상기 돌연변이형 MGB 프로브의 뉴클레오티드 서열은 서열번호 1에 기재된 뉴클레오티드 서열로부터 선택되거나, 또는 상기 야생형 MGB 프로브의 뉴클레오티드 서열은 서열번호 2에 기재된 뉴클레오티드 서열로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 실시간 정량 TaqMan MGB 프로브.제 3항에 있어서,상기 돌연변이형 MGB 프로브 5' 말단의 형광 리포터 그룹은 FAM 형광 리포터 그룹이고, 야생형 MGB 프로브 5' 말단의 형광 리포터 그룹은 HEX 형광 리포터 그룹인 것을 특징으로 하는 실시간 정량 TaqMan MGB 프로브.모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자 서열인 서열번호 5에서 C1494T 돌연변이를 실시간 정량적으로 검출하여, 모계 유전성 미토콘드리아 청각장애를 진단하기 위한 키트로서,1. 혈액 샘플 DNA 분리용 시약;2. PCR 증폭 반응용 시약 혼합물;3. C1494C 부위 또는 C1494T 돌연변이 부위를 포함하는 모계 유전성 미토콘드리아 청각장애와 관련있는 유전자 서열인 서열번호 5를 증폭하기 위한 정방향 프라이머와 역방향 프라이머;4. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한항에 따른 실시간 정량 돌연변이형 Taqman MGB 프로브; 및5. 선택적으로, 설명서를 포함하는 것을 특징으로 하는 모계 유전성 미토콘드리아 청각장애의 진단 키트.제 5항에 있어서,제 2항 내지 제 4항 중 어느 한항에 따른 야생형 실시간 정량 TaqMan MGB 프로브를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 키트.제 5항 또는 제6항에 있어서,상기 정방향 프라이머는 서열번호 3에 기재된 뉴클레오티드 서열로부터 선택되며, 역방향 프라이머는 서열번호 4에 기재된 뉴클레오티드 서열로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 키트.제 5항 내지 제 7항 중 어느 한항에 있어서,상기 반응용 시약 혼합물은 Hotstar Mastermix 혼합액이고, 상기 정방향 프라이머와 역방향 프라이머는 같은 비율로 혼합되며, 상기 혈액 샘플 DNA 분리용 시약은 발바닥 혈액 DNA 분리에 사용되는 용액I이며, 이의 주요 성분은 Chelex인 것을 특징으로 하는 키트.제 5항 내지 제 7항 중 어느 한항에 있어서,상기 반응용 시약 혼합물은 Hotstar Mastermix 혼합물이고,상기 정방향 프라이머와 역방향 프라이머는 동일 비율로 혼합되며, 상기 혈액 샘플 DNA 분리용 시약은 말초 혈액 DNA 분리에 사용되는 시약인 것을 특징으로 하는 키트.모계 유전성 청각장애와 관련있는 미토콘드리아 유전자의 C1494T 돌연변이를 검출하기 위한, 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한항에 따른 TaqMGB 프로브 또는 제 5항 내지 제 9항 중 어느 한항에 따른 키트의 용도.