초록

본 발명은, 비-절편화된 네가티브-센스의 일본쇄 RNA 바이러스인 개 홍역 바이러스를 구출을 통해 재조합에 의해 생산하는 방법, 및 이로부터 형성된 면역원성 조성물에 관한 것이다. 또 다른 태양은 개 홍역 바이러스를 약독화된 바이러스 및/또는 감염성 바이러스로서 생산하는 방법에 관한 것이다. 재조합 바이러스는 cDNA 클론으로 부터 제조될 수 있으므로, 게놈내에 한정된 변화, 예를 들면 뉴클레오티드/폴리뉴클레오티드 결실, 삽입, 치환 및 재배열을 지닌 바이러스가 수득될 수 있다.

대표청구항 ▼

(i) 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열 또는 이의 변이체 폴리뉴클레오티드 서열과 상기 게놈 또는 안티게놈 내부에 또는 측면에 삽입된 하나 이상의 이종성 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 핵산 분자를 포함하는 전사 벡터, 및 (ii) 캡시드 형성, 전사 및 복제에 필요한 트랜스-작용 단백질(N, P 및 L)을 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 하나 이상의 분리된 핵산 분자(들)를 포함하는 하나 이상의 발현 벡터를 포함하는 구출(rescue) 조성물의 형질감염 또는 형질전환을, 상

(i) 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열 또는 이의 변이체 폴리뉴클레오티드 서열과 상기 게놈 또는 안티게놈 내부에 또는 측면에 삽입된 하나 이상의 이종성 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 분리된 핵산 분자를 포함하는 전사 벡터, 및 (ii) 캡시드 형성, 전사 및 복제에 필요한 트랜스-작용 단백질(N, P 및 L)을 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 하나 이상의 분리된 핵산 분자(들)를 포함하는 하나 이상의 발현 벡터를 포함하는 구출(rescue) 조성물의 형질감염 또는 형질전환을, 상기 벡터들의 공동발현 및 재조합 바이러스의 생산이 허용되기에 충분한 조건하에서 배지내의 하나 이상의 숙주 세포에서 수행함을 포함하여, 재조합 개 홍역 바이러스를 생산하는 방법.제1항에 있어서, 재조합 바이러스를 수거하는 단계를 추가로 포함하는 방법.제1항에 있어서, 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 분리된 핵산 분자가 하나 이상의 게놈 또는 안티게놈 공급원의 키메라인 방법.제1항에 있어서, 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 분리된 핵산 분자가 서열번호 1, 2 또는 3의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 방법.제1항에 있어서, 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 분리된 핵산 분자가 약독화된 바이러스 또는 당해 바이러스의 감염성 형을 암호화하는 방법.제1항에 있어서, 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 분리된 핵산 분자가 당해 바이러스의 감염성 형을 암호화하는 방법.제1항에 있어서, 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 분리된 핵산 분자가 약독화된 바이러스를 암호화하는 방법.제1항에 있어서, 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 분리된 핵산 분자가 감염성의, 약독화된 바이러스를 암호화하는 방법.제1항에 있어서, 숙주 세포가 진핵 세포인 방법.제1항에 있어서, 숙주 세포가 척추동물 세포인 방법.제1항에 있어서, 숙주 세포가 조류 세포인 방법.제1항에 있어서, 숙주 세포가 사람 세포로 부터 유래된 세포인 방법.제9항에 있어서, 숙주 세포가 사람 배아 세포로 부터 유래된 세포인 방법.제12항에 있어서, 숙주 세포가 사람 배아 신장 세포, 사람 폐 암종 및 사람 경부 암종 또는 동물 신장 세포로 부터 유래된 세포인 방법.제1항의 방법으로 부터 수득된 재조합 개 홍역 바이러스.(i) 제1항의 방법으로 부터 수득된 재조합 개 홍역 바이러스 및 (ii) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는, 개 홍역 바이러스에 대한 보호 반응을 유도하기 위한 면역원성 조성물.제1항에 있어서, 전사 벡터가 T7 RNA 중합효소 유전자를 추가로 포함하는 방법.분리된, 재조합에 의해 생산된, 하나 이상의 이종성 폴리뉴클레오티드를 발현하는 개 홍역 바이러스 및 생리학적으로 허용되는 담체를 포함하는, 개 홍역 바이러스에 대한 보호 반응을 유도하기 위한 면역원성 조성물.제1항에 있어서, 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열 또는 이의 변이체 폴리뉴클레오티드 서열이 개 홍역 바이러스의 야생형 뉴클레오티드의 하나 이상의 돌연변이를 함유함으로써, 이러한 돌연변이가 모노네가바이러스 목의 또 다른 비-절편화된 네가티브-센스의 일본쇄 RNA 바이러스의 암호화 영역 또는 비-암호화 영역중의 공지된 약독화 돌연변이에 상응하게 되는, 재조합 개 홍역 바이러스를 생산하는 방법.제1항에 있어서, 개 홍역 바이러스의 게놈 또는 안티게놈을 암호화하는 폴리뉴클레오티드 서열 또는 이의 변이체 폴리뉴클레오티드 서열이, 재조합에 의해 생산된 바이러스의 복제 결함을 일으키는 하나 이상의 돌연변이를 함유하는, 재조합 개 홍역 바이러스를 생산하는 방법. 제19항에 있어서, RNA 바이러스가 PIV, RSV, 멈프스(mumps) 및 홍역(measles) 바이러스중에서 선택되는, 재조합 개 홍역 바이러스를 생산하는 방법.