초록

본 발명은 돌외 추출물로부터 비만, 당뇨, 고지혈증 등을 포함하는 대사질환의 치료에 유용한 AMPK 활성화 유효 성분인 다물린 A 및 다물린 B를 대량으로 분리하는 분리방법에 관한 것이다.

대표청구항 ▼

(1) 돌외(Gynostemma pentaphyllum)시료를 돌외 시료 중량의 2 내지 20배(v/w)의 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 또는 부탄올로부터 선택된 단독용매 또는 하나 이상의 혼합용매로 30 내지 100℃의 추출온도에서 2 내지 12시간 동안 초음파 추출 추출법으로 추출하는 제 1단계; (2) 상기 추출물을 여과법, 원심분리법 또는 이들의 조합법으로 처리하여 돌외 조추출물을 얻는 제 2단계; (3) 상기 조추출물에 정제수를 넣고 상기 정제수의 중량과 동일 중량의 SP207, HP20SS, Diaion HP 20,

(1) 돌외(Gynostemma pentaphyllum)시료를 돌외 시료 중량의 2 내지 20배(v/w)의 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 또는 부탄올로부터 선택된 단독용매 또는 하나 이상의 혼합용매로 30 내지 100℃의 추출온도에서 2 내지 12시간 동안 초음파 추출 추출법으로 추출하는 제 1단계; (2) 상기 추출물을 여과법, 원심분리법 또는 이들의 조합법으로 처리하여 돌외 조추출물을 얻는 제 2단계; (3) 상기 조추출물에 정제수를 넣고 상기 정제수의 중량과 동일 중량의 SP207, HP20SS, Diaion HP 20, SP-850 resin,활성탄, 또는 Amberlite XAD-2,4 흡착성 수지(resin)를 이용하고 메탄올 용량을 증가시키는 전개용매시스템을 이용한 흡착크로마토그래프 방법을 수행하여 메탄올 용량을 각각 증가시켜 (1) 30% 메탄올 용리분획, (2) 70% 메탄올 용리분획, 및 100% 메탄올 용리분획으로 각각 분획하여 100% 메탄올 용리분획을 회수하는 제 1차 정제물을 수득하는 제 3단계; (4) 상기 제 1차 정제물에 Aremen Spot prepII 시스템, Waters prep. HPLC, Agilent 1200 Series HPLC Purification Systems, Glison PLC 2020 Purification System, 또는 Hitachi HPLC Systems Prep-36으로부터 선택된 Prep HPLC을 Watchers 120 ODS-AP 컬럼, Waters sunfire, Waters symmetry, YMC-Triart C18, YMC-Pack ODS-A and B, Thermo Hypersil ODS, Agilent ZORBAX C-18, Phenomenex snergy C18, 또는 Phenomenex luna C18 으로부터 선택된 프레퍼러티브(preparative) HPLC 컬럼을 이용하여 77% (v/v) 메탄올 전개용매로 전개하여 118분에서 다물린(Damulin) A 을 수득하고 및 106분에서 다물린 B를 대량으로 분리하는 분리방법.