초록 ▼

본 발명은 다양한 프라이머 및 프로브를 이용하여 타겟 유전자들을 증폭시켜 다중 호흡기 바이러스를 동시에 특이적으로 검출하는 방법 및 이를 이용한 키트에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 타겟 유전자(구체적으로는, 리노바이러스의 5'-UTR, 인플루엔자 바이러스의 매트릭스 유전자, 메타뉴모바이러스의 F 유전자, 파라인플루엔자의 HN 당단백질 유전자, RSV의 접촉 G 유전자, 엔테로바이러스의 5'-UTR, 보카바이러스의 NS1 유전자, 아데노바이러스의 헥손 단백질 유전자 또는 코로나바이러스의 레플리카제 폴리단백질 1b 유전자)-특이적인

본 발명은 다양한 프라이머 및 프로브를 이용하여 타겟 유전자들을 증폭시켜 다중 호흡기 바이러스를 동시에 특이적으로 검출하는 방법 및 이를 이용한 키트에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 타겟 유전자(구체적으로는, 리노바이러스의 5'-UTR, 인플루엔자 바이러스의 매트릭스 유전자, 메타뉴모바이러스의 F 유전자, 파라인플루엔자의 HN 당단백질 유전자, RSV의 접촉 G 유전자, 엔테로바이러스의 5'-UTR, 보카바이러스의 NS1 유전자, 아데노바이러스의 헥손 단백질 유전자 또는 코로나바이러스의 레플리카제 폴리단백질 1b 유전자)-특이적인 프라이머 쌍과 프로브를 이용한 멀티플렉스 실-시간 PCR(multiplex real-time polymerase chain reaction)을 통해 다중 호흡기 바이러스를 매우 높은 효율로 선택적으로 검출할 수 있다. 또한, 본 발명의 키트는 시료 내 타겟 유전자들을 멀티플렉스 실-시간 PCR을 통해 간편하고 효율적으로 검출할 수 있다. 따라서, 본 발명의 방법 및 키트는 다양한 호흡기 바이러스들의 시료 내 감염 여부를 선택적으로 용이하게 검출할 수 있으며, 이를 기반으로 보다 정확하게 질환의 치료에 적용될 수 있다.

대표청구항 ▼

다음의 단계를 포함하는 다중 호흡기 바이러스 동시 검출방법:(a) 분리된 DNA 시료를 준비하는 단계;(b) (i) 서열목록 제1서열 내지 서열목록 제3서열로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 정방향 프라이머, 서열목록 제4서열의 역방향 프라이머, 그리고 서열목록 제5서열의 프로브로 이루어진 리노바이러스 검출 세트; 서열목록 제6서열 및 서열목록 제7서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제8서열 및 서열목록 제9서열로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 프로브로 이루어진 인플루엔자 A 검출 세트; 서열목록 제10서열 및 서열목록

다음의 단계를 포함하는 다중 호흡기 바이러스 동시 검출방법:(a) 분리된 DNA 시료를 준비하는 단계;(b) (i) 서열목록 제1서열 내지 서열목록 제3서열로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 정방향 프라이머, 서열목록 제4서열의 역방향 프라이머, 그리고 서열목록 제5서열의 프로브로 이루어진 리노바이러스 검출 세트; 서열목록 제6서열 및 서열목록 제7서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제8서열 및 서열목록 제9서열로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 프로브로 이루어진 인플루엔자 A 검출 세트; 서열목록 제10서열 및 서열목록 제11서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제12서열의 프로브로 이루어진 인플루엔자 B 검출 세트; 서열목록 제13서열 및 서열목록 제14서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제15서열의 프로브로 이루어진 메타뉴모바이러스 검출 세트; 서열목록 제16서열 및 서열목록 제17서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제18서열의 프로브로 이루어진 파라인플루엔자 제1형 검출 세트; 서열목록 제19서열 및 서열목록 제20서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제21서열의 프로브로 이루어진 파라인플루엔자 제2형 검출 세트; 서열목록 제22서열 및 서열목록 제23서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제24서열의 프로브로 이루어진 파라인플루엔자 제3형 검출 세트; 서열목록 제25서열 및 서열목록 제26서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제27서열의 프로브로 이루어진 파라인플루엔자 제4형 검출 세트; 서열목록 제28서열 및 서열목록 제29서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제30서열의 프로브로 이루어진 RSV A 검출 세트; 서열목록 제31서열 및 서열목록 제32서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제33서열의 프로브로 이루어진 RSV B 검출 세트; 서열목록 제34서열의 정방향 프라이머, 서열목록 제35서열 및 서열목록 제36서열로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 역방향 프라이머, 그리고 서열목록 제37서열의 프로브로 이루어진 엔테로바이러스 검출 세트; 서열목록 제38서열 및 서열목록 제39서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제40서열의 프로브로 이루어진 보카바이러스 검출 세트; 서열목록 제41서열 및 서열목록 제42서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제43서열의 프로브로 이루어진 아데노바이러스 1 검출 세트; 서열목록 제44서열 및 서열목록 제45서열의 프라이머쌍, 그리고 서열목록 제46서열의 프로브로 이루어진 아데노바이러스 2 검출 세트; 서열목록 제47서열 및 서열목록 제48서열로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 정방향 프라이머, 서열목록 제49서열 및 서열목록 제50서열로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 역방향 프라이머, 그리고 서열목록 제51서열의 프로브로 이루어진 코로나바이러스 229E/NL63 검출 세트; 및 서열목록 제52서열의 정방향 프라이머, 서열목록 제53서열 및 서열목록 제54서열로 구성된 군으로부터 선택된 하나 이상의 역방향 프라이머, 그리고 서열목록 제55서열의 프로브로 이루어진 코로나바이러스 OC43/HKU1 검출 세트로 구성된 군으로부터 최소 2종의 검출 세트를 포함하는 다중 호흡기 바이러스 검출 세트; 및 (ii) 서열목록 제56서열 및 서열목록 제57서열의 프라이머 쌍, 그리고 서열목록 제58서열의 프로브로 이루어진 내적 대조군 검출 세트를 이용하여 상기 시료 내의 목적 뉴클레오타이드 서열을 증폭하는 단계; 및(c) 상기 증폭 결과를 형광으로 확인하는 단계.