초록 ▼

본 발명은 Forward 혹은 Reverse 프라이머의 5’말단에 상보적인 염기서열 내지는 mis-matched 염기서열을 포함하는 상보적인 염기서열을 직접 또는 linker로서 Inosine을 사용하여 PCR용 프라이머 및 상기 프라이머를 포함하는 PCR 조성물에 핵산 주형을 혼합한 후 상기 혼합물에 대해 PCR을 수행하는 단계를 포함하는 PCR 방법에 관한 것이다.본 발명의 PCR용 프라이머는 5‘위치에 직접 혹은 linker를 연결한 상보적인 염기서열 내지는 상보적인 염기서열 내에 mis-matched 염기서열을 포함시킴으로써

본 발명은 Forward 혹은 Reverse 프라이머의 5’말단에 상보적인 염기서열 내지는 mis-matched 염기서열을 포함하는 상보적인 염기서열을 직접 또는 linker로서 Inosine을 사용하여 PCR용 프라이머 및 상기 프라이머를 포함하는 PCR 조성물에 핵산 주형을 혼합한 후 상기 혼합물에 대해 PCR을 수행하는 단계를 포함하는 PCR 방법에 관한 것이다.본 발명의 PCR용 프라이머는 5‘위치에 직접 혹은 linker를 연결한 상보적인 염기서열 내지는 상보적인 염기서열 내에 mis-matched 염기서열을 포함시킴으로써 PCR 반응에서 증폭산물 증가에 따른 민감도 증가 및 비특이적으로 발생되는 반응을 낮출 수 있다는 장점이 있다.

대표청구항 ▼

하기 구조식 1의 유전자 증폭용 프라이머:[구조식 1]상기 프라이머는 3' 말단에서 5'방향으로 특정 유전자서열 증폭을 위한 뉴클레오타이드 서열 Xa, Xb, 및 Xc, 부위를 포함하고, 상기 Xc의 5' 말단에 이노신 링커인 뉴클레오타이드 서열 Ya를 포함하고, 상기 Ya의 5' 말단에 상기 Xc의 상보적 서열인 X'c이 연결되고, 상기 X'c의 5' 말단에 상기 Xb에 미스-매칭 뉴클레오타이드 서열로 X'b가 연결되고, 상기 미스-매칭 뉴클레오타이드 서열의 뉴클레오타이드 수는 1-12개이며, 상기 X'b의 5’ 말단에 상기 Xa

하기 구조식 1의 유전자 증폭용 프라이머:[구조식 1]상기 프라이머는 3' 말단에서 5'방향으로 특정 유전자서열 증폭을 위한 뉴클레오타이드 서열 Xa, Xb, 및 Xc, 부위를 포함하고, 상기 Xc의 5' 말단에 이노신 링커인 뉴클레오타이드 서열 Ya를 포함하고, 상기 Ya의 5' 말단에 상기 Xc의 상보적 서열인 X'c이 연결되고, 상기 X'c의 5' 말단에 상기 Xb에 미스-매칭 뉴클레오타이드 서열로 X'b가 연결되고, 상기 미스-매칭 뉴클레오타이드 서열의 뉴클레오타이드 수는 1-12개이며, 상기 X'b의 5’ 말단에 상기 Xa에 상보적인 서열인 X'a를 포함하고, 여기서 상보적이란 역방향으로 상보적인 것을 특징으로 하며, 상기 Xb와 X'b는 버블구조를 형성하고, 상기 Xc와 상기 X'c 사이의 Ya도 버블 구조를 형성하는 것을 특징으로 하는 프라이머.