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NTIS 바로가기국가/구분 | 한국(KR)/등록특허 | |
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국제특허분류(IPC8판) |
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출원번호 | 10-2017-0076403 (2017-06-16) | |
공개번호 | 10-2018-0137148 (2018-12-27) | |
등록번호 | 10-1957979-0000 (2019-03-07) | |
DOI | http://doi.org/10.8080/1020170076403 | |
발명자 / 주소 |
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심사청구여부 | 있음 (2017-09-14) | |
심사진행상태 | 등록결정(일반) | |
법적상태 | 등록 |
본 발명은 진핵 세포의 번역 시스템을 이용한 목적 단백질의 고효율 형광 표지방법에 관한 것이다. 본 발명은 정제된 메티오닌, 및 적어도 1개 이상의 유리 카르복시기를 포함하는 형광 염료 등을 사용한 세포 배양을 통해서, 진핵 세포의 번역 시스템을 이용하여, 목적 단백질의 합성과 함께 부위 특이적인 고효율 형광표지 효과를 제공한다. 또한, 본 발명은 메티오닌 흡광도를 이용한 표준 곡선을 통해 형광 메티오닌의 정량화를 가능하게 하였고, 바이오틴이 결합된 형광 염료를 이용함으로써 FRET 분석을 위한 고정화 과정을 단순화시키고, 형광 표
체외로 분리된 진핵 세포내에, 목적 단백질, 및 상기 목적 단백질의 C 말단에 결합되고 유리 아민기(free amine group)를 포함하는 태그를 코딩 유전자를 포함하는 벡터; 및 정제된 형광 메티오닌 또는 정제된 형광 메티오닌-진핵세포 유래의 tRNA 복합체를 도입하는 단계를 포함하며, 상기 도입하는 단계는, 적어도 1개 이상의 유리 카르복시기(free carboxyl group)를 포함하는 형광 염료가 제공되는 조건에서 이루어지는 것을 특징으로 하는, 목적 단백질의 부위 선택적인 고효율 형광 표지방법.
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