초록

본 발명은 바이러스 RNA를 추출하는 방법에 관한 것으로, 시료로부터 다양한 오염원(예를 들어, 곰팡이, 세균, 꽃가루 등) 등을 효과적으로 제거하므로, 더욱 민감하게 시료 유래 바이러스의 진단을 가능하게 하며, 기존 RNA 추출 방법에 비하여 저렴한 시약을 사용하기 때문에 질병을 매개하는 바이러스 진단 실험 및 다양한 감시 사업의 규모를 더욱 확대할 수 있고, 그에 따라 공중보건에 기여할 수 있다.

대표청구항 ▼

다음 단계를 포함하는 바이러스 RNA를 추출하는 방법.(a) 균질화 용액 총량에 대하여 1 내지 30 mM의 EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid) 및 0.1 내지 2%(v/v)의 NaCl을 포함하는 균질화 용액을 시료에 첨가하여 시료를 균질화하는 균질화 단계; (b) 균질화된 용액을 원심분리하는 제1원심분리 단계; (c) 제1원심분리 상층액에 용해 버퍼 총량에 대하여 0.1 내지 1.5 M 농도의 NaCl(sodium chloride) 및 0.1 내지 10 %(v/v)의 SDS(sodium dodecy

다음 단계를 포함하는 바이러스 RNA를 추출하는 방법.(a) 균질화 용액 총량에 대하여 1 내지 30 mM의 EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid) 및 0.1 내지 2%(v/v)의 NaCl을 포함하는 균질화 용액을 시료에 첨가하여 시료를 균질화하는 균질화 단계; (b) 균질화된 용액을 원심분리하는 제1원심분리 단계; (c) 제1원심분리 상층액에 용해 버퍼 총량에 대하여 0.1 내지 1.5 M 농도의 NaCl(sodium chloride) 및 0.1 내지 10 %(v/v)의 SDS(sodium dodecyl sulfate)를 포함하는 용해 버퍼를 혼합하고 1 내지 10 M의 NaCl 수용액을 첨가하여 혼합하는 제1혼합 단계;(d) 용해 버퍼 혼합물을 원심분리하는 제2원심분리 단계;(e) 제2원심분리 상층액에 이소프로파놀(isopropanol)을 혼합하는 제2혼합 단계;(f) 이소프로파놀 혼합물을 실리카 멤브레인(silica membrane) 컬럼에 통과시키는 단계;(g) 실리카 멤브레인 컬럼에 세척 버퍼 총량에 대하여 1 내지 5 M 농도의 초산 나트륨(sodium acetate)을 포함하는 세척 버퍼를 통과시켜 실리카 멤브레인 컬럼을 세척하는 세척단계; 및(h) 실리카 멤브레인 컬럼으로부터 RNA를 용출시키는 용출 단계.