초록

향상된 산후 부착형 세포 및 그의 제조 방법을 제공한다. 상기 향상된 산후 부착형 세포의 제조 방법은 태반 조직으로부터 부착형 세포의 수득율 및 증식율을 증가시킬 수 있으며, 신경질환에 효과적인 단백질을 분비하고, 손상된 조직으로의 이동 능력이 향상된 부착형 세포를 제조할 수 있다.

대표청구항 ▼

분리된 태반으로부터 태반 유래 조직인 양막을 얻는 단계; 상기 태반 유래 조직인 양막 조직에 효소 혼합물 용액을 첨가하여 세포 집단(cell population)을 수거하는 단계로서, 상기 효소 혼합물 용액은 1 ㎎/㎖ 내지 5 ㎎/㎖ 농도의 트립신, 0.1 U/㎖ 내지 5 U/㎖ 농도의 디스파아제,　0.5 ㎎/㎖ 내지 5 ㎎/㎖의 콜라게나아제, 0.01 mg /ml 내지 0.05 mg /ml 농도의 DNA 가수분해 효소를 포함하는 것인 단계;상기 수거된 세포 집단을 용기에 부착 배양한 후, 동물 유래 성분이 없는(Animal Co

분리된 태반으로부터 태반 유래 조직인 양막을 얻는 단계; 상기 태반 유래 조직인 양막 조직에 효소 혼합물 용액을 첨가하여 세포 집단(cell population)을 수거하는 단계로서, 상기 효소 혼합물 용액은 1 ㎎/㎖ 내지 5 ㎎/㎖ 농도의 트립신, 0.1 U/㎖ 내지 5 U/㎖ 농도의 디스파아제,　0.5 ㎎/㎖ 내지 5 ㎎/㎖의 콜라게나아제, 0.01 mg /ml 내지 0.05 mg /ml 농도의 DNA 가수분해 효소를 포함하는 것인 단계;상기 수거된 세포 집단을 용기에 부착 배양한 후, 동물 유래 성분이 없는(Animal Component Free) (ACF) 재조합 효소를 처리하여 산후 부착형 세포를 분리하는 단계; 및분리된 산후 부착형 세포를 산소분압이 1 내지 15% 인 저산소 조건에서 섬유아세포성장인자-4(FGF-4) 및 헤파린을 포함하는 배지에서 5 계대 이상 계대 배양하는 단계로서, 계대 배양 단계 마다, 계대 배양을 위한 세포 이식 전 동물 유래 성분이 없는 재조합 효소의 처리를 더 포함하는 것인 단계를 포함하는 산후 부착형 세포를 제조하는 방법으로서, 상기 산후 부착형 세포는 1 내지 4 계대 계대 배양된 세포에 비해 혈관내피성장인자(Vascular endothelial growth factor) (VEGF) 및 인터루킨-6(interleukin, IL-6)를 더 많이 분비하는 것이고, 상기 산후 부착형 세포는 섬유아세포 특이적 형태를 가지며, CD44, CD73, CD90 및 CD105 양성 표면 마커를 80%이상 발현하고 CD45 음성 표면 마커를 10%이하로 발현하는 것인 방법.