초록 ▼

본 발명은 다수의 타겟 핵산 서열을 실시간으로 동시에 분석할 수 있는, 형광기반의 다중 융해 분석을 이용한 증폭 산물의 다중 분석방법 및 이를 수행하기 위한 키트에 관한 것으로, 본 발명에 의하면 하나의 형광 채널을 이용하는 한 번의 중합효소 증폭 반응으로 다수의 타겟 핵산 서열을 검출할 수 있어, 핵산 다중 검출 시간 및 비용을 획기적으로 줄일 수 있다. 따라서 본 발명은 여러 개의 대상 유전자의 분석이 필요한 동반 진단 분야, 여러 개의 대립유전자를 분석해야 하는 농림축산분야, 다수 개의 감염체를 동시에 분석해야 하는 임상병리분

본 발명은 다수의 타겟 핵산 서열을 실시간으로 동시에 분석할 수 있는, 형광기반의 다중 융해 분석을 이용한 증폭 산물의 다중 분석방법 및 이를 수행하기 위한 키트에 관한 것으로, 본 발명에 의하면 하나의 형광 채널을 이용하는 한 번의 중합효소 증폭 반응으로 다수의 타겟 핵산 서열을 검출할 수 있어, 핵산 다중 검출 시간 및 비용을 획기적으로 줄일 수 있다. 따라서 본 발명은 여러 개의 대상 유전자의 분석이 필요한 동반 진단 분야, 여러 개의 대립유전자를 분석해야 하는 농림축산분야, 다수 개의 감염체를 동시에 분석해야 하는 임상병리분야에 광범위하게 이용될 수 있다.

대표청구항 ▼

a) 5'-R-T-Q-C-3' 구조의 FMMA 프로브와 비표지 프라이머로 구성되는 타겟-특이적 FMMA 프로브-프라이머 세트를 준비하는 단계로서, 여기서 R은 형광표지이고, T는 서로 상이한 증폭 산물들의 다양한 융해온도를 유도하는 증폭산물 융해온도 조절서열이고, Q는 소광자이고, C는 타겟 핵산 서열에 대해 상보적인 서열이며, 각각의 FMMA 프로브-프라이머는 서로 상이한 융해온도를 갖는 증폭산물을 생성하도록 설계하는 단계;b) 전 단계에서 수득된 타겟-특이적 FMMA 프로브-프라이머 세트를 이용하여 하나 이상의 타겟 핵산을 포함

a) 5'-R-T-Q-C-3' 구조의 FMMA 프로브와 비표지 프라이머로 구성되는 타겟-특이적 FMMA 프로브-프라이머 세트를 준비하는 단계로서, 여기서 R은 형광표지이고, T는 서로 상이한 증폭 산물들의 다양한 융해온도를 유도하는 증폭산물 융해온도 조절서열이고, Q는 소광자이고, C는 타겟 핵산 서열에 대해 상보적인 서열이며, 각각의 FMMA 프로브-프라이머는 서로 상이한 융해온도를 갖는 증폭산물을 생성하도록 설계하는 단계;b) 전 단계에서 수득된 타겟-특이적 FMMA 프로브-프라이머 세트를 이용하여 하나 이상의 타겟 핵산을 포함하는 시료 내의 다수의 타겟 핵산들을 핵산 중합효소 반응에 의해 증폭시키는 단계;c) 증폭 산물들에 대하여 융해온도 분석을 수행하는 단계를 포함하는 형광기반의 다중 융해 분석을 이용한 증폭 산물의 다중 분석방법. 상기 타겟-특이적 FMMA 프로브-프라이머 세트 내의 각각의 FMMA 프로브-프라이머의 융해온도 조절은, 증폭산물의 길이와 GC 함량 및 증폭산물 융해온도 조절서열의 길이와 GC 함량을 조정하여 증폭산물의 융점이 구별되도록 설계된 것임을 특징으로 하는 형광기반의 다중 융해 분석을 이용한 증폭 산물의 다중 분석방법.