초록

본 발명은 난분해성 물질 분해효소의 유전자 기능 구명을 위한 기반 기술로서 뿐만 아니라 외래 유전자의 도입 없이도 목재부후균의 일종인 표고버섯을 포함하는 다양한 식용버섯의 육종에 적용될 수 있어, 활용 가치가 높은 CRISPR-Cas9 시스템을 이용한 유색고약버섯의 리그닌 분해효소의 유전자 편집방법, 및 이를 도입하여 식용버섯을 육종하는 방법에 관한 것이다.

대표청구항 ▼

(a). 유색고약버섯(Phanerocheate chrysosporium)의 원형질을 분리하는 단계;(b). 상기 분리된 유색고약버섯의 원형질 내로 단일 가이드 RNA(sgRNA)를 삽입하되, 상기 단일 가이드 RNA(sgRNA)는 서열번호 1 내지 서열번호 8 중에서 선택되는 염기서열로 이루어지는 단계; 및(c). 상기 단일 가이드 RNA(sgRNA)가 삽입된 원형질을 배양하여 형성된 균사체로부터 게놈 DNA를 추출한 후, 프라이머를 이용하여 PCR을 수행하여 DNA 크기의 변화를 확인하되, 상기 프라이머는 서열번호 13의 정방향

(a). 유색고약버섯(Phanerocheate chrysosporium)의 원형질을 분리하는 단계;(b). 상기 분리된 유색고약버섯의 원형질 내로 단일 가이드 RNA(sgRNA)를 삽입하되, 상기 단일 가이드 RNA(sgRNA)는 서열번호 1 내지 서열번호 8 중에서 선택되는 염기서열로 이루어지는 단계; 및(c). 상기 단일 가이드 RNA(sgRNA)가 삽입된 원형질을 배양하여 형성된 균사체로부터 게놈 DNA를 추출한 후, 프라이머를 이용하여 PCR을 수행하여 DNA 크기의 변화를 확인하되, 상기 프라이머는 서열번호 13의 정방향 프라이머와 서열번호 14의 역방향 프라이머로 이루어진 pcmco1 프라이머쌍, 및 서열번호 15의 정방향 프라이머와 서열번호 16의 역방향 프라이머로 이루어진 pclip1 프라이머쌍 중에서 선택되는 프라이머쌍인 단계를 포함하는, CRISPR-Cas9 시스템을 이용한 유색고약버섯의 리그닌 분해효소의 유전자 편집방법.