초록 ▼

본 발명은 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 정량분석방법에 관한 것으로, 타겟 인식 물질로 항체 대신에, 핵산으로 구성된 압타머를 사용하는 분석방법이다. 본 발명의 분석방법은 검출 신호가 극대화된 증폭을 통한 극미량 분석을 가능하게 하는 분석방법으로, 포획 압타머에 의해 타겟이 결합되고, 타겟의 다른 부위에 결합된 검출 압타머에 접합된 리포터 유전자를 주형으로 하는 시험관 내 발현(ALIVE) 통해 신호를 발생할 수 있는 리포터 단백질을 합성한 후, 생성된 리포터 단백질이 효소인 경우, 기질을 첨가하여 신호를 증폭함으로써 aM

본 발명은 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 정량분석방법에 관한 것으로, 타겟 인식 물질로 항체 대신에, 핵산으로 구성된 압타머를 사용하는 분석방법이다. 본 발명의 분석방법은 검출 신호가 극대화된 증폭을 통한 극미량 분석을 가능하게 하는 분석방법으로, 포획 압타머에 의해 타겟이 결합되고, 타겟의 다른 부위에 결합된 검출 압타머에 접합된 리포터 유전자를 주형으로 하는 시험관 내 발현(ALIVE) 통해 신호를 발생할 수 있는 리포터 단백질을 합성한 후, 생성된 리포터 단백질이 효소인 경우, 기질을 첨가하여 신호를 증폭함으로써 aM 수준의 극미량으로 존재하는 타겟을 검출할 수 있는 정량방법이다.

대표청구항 ▼

(1) 타겟을 포획할 수 있는 포획 압타머를 지지체에 고정시키는 단계; (2) 상기 단계 (1) 이후에, 타겟을 포함하는 시료를 첨가하여 포획 압타머가 타겟을 포획할 수 있도록 반응시키고, 세척하여 반응하지 않은 잔여물을 제거하는 단계;(3) 상기 단계 (2)에서 포획 압타머에 의해 포획된 타겟에, 리포터 유전자가 접합된 검출 압타머를 결합시키는 단계로서, 상기 검출 압타머와 리포터 유전자 사이에 스페이서를 더 포함하는 것을 특징으로 하며;(4) 상기 단계 (3) 이후에, 상기 검출 압타머에 접합된 리포터 유전자를 주형으로 하며,

(1) 타겟을 포획할 수 있는 포획 압타머를 지지체에 고정시키는 단계; (2) 상기 단계 (1) 이후에, 타겟을 포함하는 시료를 첨가하여 포획 압타머가 타겟을 포획할 수 있도록 반응시키고, 세척하여 반응하지 않은 잔여물을 제거하는 단계;(3) 상기 단계 (2)에서 포획 압타머에 의해 포획된 타겟에, 리포터 유전자가 접합된 검출 압타머를 결합시키는 단계로서, 상기 검출 압타머와 리포터 유전자 사이에 스페이서를 더 포함하는 것을 특징으로 하며;(4) 상기 단계 (3) 이후에, 상기 검출 압타머에 접합된 리포터 유전자를 주형으로 하며, 반응온도가 20~40℃이며, 반응시간이 2~6시간인 조건으로 시험관 내 발현(ALIVE)을 수행하여 리포터 단백질을 합성하는 단계; 및(5) 상기 시험관 내 발현(ALIVE)으로 합성된 리포터 단백질을 분석하여 타겟의 함량을 검출하는 단계;를 포함하는 압타머-리포터 유전자 융합체를 이용하는 분석 방법.