초록

본 발명은 CRISPR/dCas9을 이용한 표면증강라만산란 기반 병원균 검출법에 관한 것이다.본 발명에 따른 병원균 검출 방법은 별도의 유전자 분리 및 증폭 단계 없이 신속하고 민감하게 표적 병원균의 유전자를 검출할 수 있고, 우수한 특이성 및 신속성을 통하여 빠른 진단 정보를 제공할 수 있다.

대표청구항 ▼

(a) dCas9 및 guide RNA(gRNA)로 이루어진 dCas9/gRNA 복합체가 부착된 금속 자성 나노 입자와 표적 시료를 반응시키는 단계로서, 상기 금속 자성 나노 입자는,자성을 가진 물질의 코어층, 코어를 둘러싸는 친수성 폴리머로 구성된 쉘 층, 및 쉘 층을 둘러싸는 금속 코팅층으로 이루어지며;SNAP와 벤질구아닌 간의 결합, 히스태그(his-tag)와 Ni-NTA 간 결합, 클립 태그(CLIP-tag)와 벤조일시토신(benzylcytosine) 간 결합 및 말레이미드와 티올간 결합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느

(a) dCas9 및 guide RNA(gRNA)로 이루어진 dCas9/gRNA 복합체가 부착된 금속 자성 나노 입자와 표적 시료를 반응시키는 단계로서, 상기 금속 자성 나노 입자는,자성을 가진 물질의 코어층, 코어를 둘러싸는 친수성 폴리머로 구성된 쉘 층, 및 쉘 층을 둘러싸는 금속 코팅층으로 이루어지며;SNAP와 벤질구아닌 간의 결합, 히스태그(his-tag)와 Ni-NTA 간 결합, 클립 태그(CLIP-tag)와 벤조일시토신(benzylcytosine) 간 결합 및 말레이미드와 티올간 결합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나에 의해 개질되고;(b) 상기 (a) 단계의 반응물에 라만 다이(dye)를 처리하여 반응시키는 단계; 및(c) 상기 (b) 단계의 반응물로부터 표면 증강 라만 산란 스펙트럼을 측정하는 단계;를 포함하는 병원균의 검출 방법.