초록

본 발명은 히알루론산의 바이오 생산 (bio-production) 분야에 관한 것이다.당업계에서는 그의 매우 효율적인 합성 및 분비를 가능하게 하는 히알루론산 생산 방법에 대한 필요성이 존재한다.본 발명에서 제안하는 해결책은 본 명세서에 기재된 바와 같은 많은 변형을 포함하는 유전자 변형 세포의 사용이다.본 발명은 또한 본 발명의 유전자 변형 세포를 이용하여 분자량이 조절된 히알루론산을 바이오 생산할 수 있는 방법을 제안한다.

대표청구항 ▼

히알루론산 (Hyaluronic Acid, HA) 을 생산하는 재조합 효모 세포로서, 재조합 효모 세포가 하기를 포함하는 재조합 효모 세포:(a) 히알루로난 신타제 활성을 갖는 폴리펩티드를 암호화하는 하나 이상의 재조합 핵산;(b) UDP-글루코스 데하이드로게나제 (UDP-GlcDH 또는 HASB) 활성을 갖는 폴리펩티드를 암호화하는 하나 이상의 재조합 핵산; (c) 히알루로니다제 활성을 갖는 폴리펩티드를 암호화하는 하나 이상의 재조합 핵산으로서, 히알루로니다제 활성을 갖는 폴리펩티드는 히알루론산, 특히 원하는 분자량 (HAMW)

히알루론산 (Hyaluronic Acid, HA) 을 생산하는 재조합 효모 세포로서, 재조합 효모 세포가 하기를 포함하는 재조합 효모 세포:(a) 히알루로난 신타제 활성을 갖는 폴리펩티드를 암호화하는 하나 이상의 재조합 핵산;(b) UDP-글루코스 데하이드로게나제 (UDP-GlcDH 또는 HASB) 활성을 갖는 폴리펩티드를 암호화하는 하나 이상의 재조합 핵산; (c) 히알루로니다제 활성을 갖는 폴리펩티드를 암호화하는 하나 이상의 재조합 핵산으로서, 히알루로니다제 활성을 갖는 폴리펩티드는 히알루론산, 특히 원하는 분자량 (HAMW) 의 히알루론산이 재조합 효모 세포에 의해 생산되도록 하는 분비 신호를 포함하는 재조합 핵산, 및(d) (i) 글루타민 신테타제 (GLN1) 활성을 갖는 폴리펩티드를 암호화하는 하나 이상의 재조합 핵산; 및/또는(ii) 글루타메이트 신타제 (GLT1) 를 암호화하는 하나 이상의 파괴된 내인성 핵산;상기 재조합 효모 세포는 사카로마이세스 (Saccharomyces) 속, 또는 칸디다 (Candida) 속, 또는 클루이베로마이세스 (Kluyveromyces) 속, 또는 오가타에아 (Ogataea) 속, 또는 야로위아 (Yarrowia) 속, 또는 데바리오마이세스 (Debaryomyces) 속, 또는 아쉬비아 (Ashbya) 속에 속한다.