[특허]Method for extracting nucleic acids from a wide range of organisms

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IPC분류정보
국가/구분	United States(US) Patent 등록
국제특허분류(IPC7판)	C12N-001/08 C12N-015/00 C12Q-001/68 C07H-021/04
출원번호	US-0544560 (1995-10-18)
발명자 / 주소	Clark Kathleen A. Kacian Daniel L.
출원인 / 주소	Gen-Probe Incorporated
대리인 / 주소	Fisher
인용정보	피인용 횟수 : 22 인용 특허 : 0

초록 ▼

Methods for extracting nucleic acids by heating sample cells at about 80-95 degrees C. in a permeabilization reagent containing a non-ionic detergent and a metal chelating agent. The methods of the invention release large fragments of undegraded nucleic acids without physically disrupting the entire cell wall. The nucleic acids are released into solution without bursting the cells and are suitable for research and testing without further purification. The extraction method described herein is rapid, easy to perform, and applicable to a wide variety of cells, including microorganisms. Clinical samples may be screened for the presence or absence of a microorganism by heating the sample at 80-95 degrees Celsius in the presence of a non-ionic detergent and a metal chelating agent, adding to the sample a nucleic acid probe specific to the selected microorganism, incubating the sample under conditions which allow the probe to hybridize to released nucleic acid and detecting whether any hybridized probe is present. A kit for performing the nucleic acid extraction methods disclosed herein is also described.

대표청구항 ▼

[ What is claimed is:] [1.] A method for extracting nucleic aids from a wide range of microorganisms, consisting essentially of the steps:a. contacting a sample containing one or more microorganisms in an aqueous suspension with a permeabilization reagent consisting essentially of a non-ionic detergent, from 0% to about 2% (w/v) of an anionic detergent, and a metal chelating agent; andb. heating the sample and permeabilization reagent together at about 80.degree.-100.degree. C. until nucleic acids are released from said microorganisms rein said nucleic acids are provided in a form suitable for hybridization and said method is performed in the absence of lysozyme.

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