초록 ▼

유전공학의 발달로 유전자 조작의 필수 소재인 제한 효소에 관한 연구가 점차 다양화 되어가고 있으며,따라서 새로운 제한효소의 개발에 대한 요구가 절실해지고 있다. 현재까지는 기존에 존재하고 있는 제한효소들의 분리정제 및 공급이 주였으나 앞으로는 단백질 공학을 이용한 기존 제한효소의 변이체에 대한 연구가 필요하리라 본다. 더 나아가 제한효소는 DNA binding 효소중의 하나로서 생명현상의 이해를 위해 근본적으로 풀어야할 과제인 유전자-단백질간의 상호작용에 대한 연구의 활성화에도 기여하리라고 본다. 본 연구에서는 다른 제한효소에 비해

유전공학의 발달로 유전자 조작의 필수 소재인 제한 효소에 관한 연구가 점차 다양화 되어가고 있으며,따라서 새로운 제한효소의 개발에 대한 요구가 절실해지고 있다. 현재까지는 기존에 존재하고 있는 제한효소들의 분리정제 및 공급이 주였으나 앞으로는 단백질 공학을 이용한 기존 제한효소의 변이체에 대한 연구가 필요하리라 본다. 더 나아가 제한효소는 DNA binding 효소중의 하나로서 생명현상의 이해를 위해 근본적으로 풀어야할 과제인 유전자-단백질간의 상호작용에 대한 연구의 활성화에도 기여하리라고 본다. 본 연구에서는 다른 제한효소에 비해 그 특성 및 3차구조까지 비교적 잘 알려진 200번째 아미노산 Arg의 바로앞 Asn-199를 다른 아미노산으로 대체시킨 신규 변이 EcoRI을 유전자 합성 및 재조합 기술로 고안 제조하였다. 본 연구의 최종 목표는 변이 EcoRI 유전자를 적절한 조건에서 발현 정제하여 EcoRI 제한효소에 있어 Asn-199이 단백질 -DNA Interaction 즉,Binding Specificity와 Catalytic Activity에 미치는 영향에 대해 알아보고,더 나아가 단백질의 구조-기능 관계 및 분자생물학의 근본 질문이라고 할 수 있는 DNA-단백질 상호작요에 대한 이해와 이론을 정립하고자 하는 것이다. 또한 이 연구를 연장하여 새로운 기능을 갖는 신효소를 제조할 수 있는 기반이 이루어질 것으로 본다.

목차 Contents

• 제1장 서론...9
• 제2장 실험재료 및 방법...17
• 제3장 실험결과 및 고찰...25
• 제4장 결론...42
• 제5장 참고문헌...43