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[국가R&D연구보고서] 생물 질소 고정에 관한 분자유전학적 연구;-벼 질소 고정균의 분자 육종개발(Ⅱ)-
Molecular and Genetic Study of the Biological Nitrogen Fixation;-Strain Improvement of a Nitrogen Fixers in the Rhizosphere of Rice Plant (II) 원문보기

보고서 정보
주관연구기관 한국과학기술연구원
Korea Institute Of Science and Technology
연구책임자 유익동
참여연구자 김창진 , 김신덕 , 서현창 , 김원곤 , 박동진
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월1990-04
주관부처 과학기술부
과제관리전문기관 한국생명공학연구원
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology
등록번호 TRKO200200002831
DB 구축일자 2013-04-18
키워드 생물질소고정.벼.Klebsiella sp. Azospirillum sp.N₂-fixation.Rice.Klebsiella sp. Azospirillum sp.

초록

\\ 1. Klebsiella Oxytoca NG 13의 Nif LA Operon이 nif L- A(upper c) 구조로 완전히 바뀌어진 새로운 육종 균주 K.Oxytoca SH31,SH43,SH161을 육종하였으며 이들 균주의 질소 고정능을 조사한 질소고정활성을 보였다. 한편 pMC 71A의 도입에 의한 nif A Portein의 Overproduction에 의해 K.oxytoca SH31 균주의 질소고정 활성에 비해 17.2배 높은 질소고정 활성을 보임을 알 수 있었고,15mM NH₄+ 고농도의 암모니아태 질소 존재하에서도 질

목차 Contents

  • 제 1 장 서언...17
  • 제 2 장 질소고정 유전자의 재구성을 통한 Klebsiella oxytoca 균주의 육종...23
  • 제 1 절 서론...25
  • 제 2 절 실험재료 및 방법...27
  • 1. 사용 균주 및 플라스미드...27
  • 2. 사용 배지 및 효소...28
  • 3. 플라스미드 분리와 형질전환...29
  • 4. Southern Blot Hybridization...29
  • 5. 질소고정활성의 측정...30
  • 제 3 절 결과 및 고찰...31
  • 1. nif $L^-A^C$ 구조를 갖는 Klebsiella 균주 선발...31
  • 2. Klebsiella oxytoca의 형질 전환...34
  • 3. 질소 고정 활성...34
  • 제 4 절 요약...39
  • 제 5 절 참고문헌...40
  • 제 3 장 벼 근권에서 질소 고정균 Azospirillum의 분리 및 동정...43
  • 제 1 절 서론...45
  • 제 2 절 실험재료 및 방법...46
  • 1. 배지...46
  • 2. 토양 시료 채취...47
  • 3. 토양의 질소고정활성측정...47
  • 4. Azospirillum의 분리 및 우수 균주 선발...49
  • 5. 질소 고정활성의 측정...49
  • 6. 분리 균주의 동정...50
  • 제 3 절 결과 및 고찰...50
  • 1. 토양의 질소고정 활성...50
  • 2. Enrichment culture의 질소 고정 활성...50
  • 3. Azospirillum 분리 및 우수 균주 선발...53
  • 4. 분리균주의 동정...56
  • 제 4 절 요약...60
  • 제 5 절 참고문헌...60
  • 제 4 장 Azospirillum lipoferum의 Tn5-mutaqenesis와 $Nif^-$ 변이주 분리...65
  • 제 1 절 서론...67
  • 제 2 절 실험재료 및 방법...68
  • 1. 사용균주 및 plasmid...68
  • 2. 사용 배지 및 효소...69
  • 3. 항생제 저항성 조사...69
  • 4. Bacterial mating 과 Transconjugant의 선발...70
  • 5. Azospirillum $Nif^-$ 변이주 분리...71
  • 6. 질소고정 활성의 측정...71
  • 7. DNA 분리 및 DNA Probe의 제조...72
  • 8. Colony hybridization...72
  • 제 3 절 결과 및 고찰...73
  • 1. 항생제 저항성...73
  • 2. Donor와 acceptor cell비의 transconjugation rate에 대한 영향...75
  • 3. Colony hybridization에 의한 transconjugant의 Tn5 존재 확인...75
  • 4. 분리된 Azospirillum $Nif^-$ 변이주의 특성...77
  • 5. Southern hybridization에 의한 Tn5 Azospirillum transconjugant의 분석...81
  • 제 4 절 요약...81
  • 제 5 절 참고문헌...82
  • 제 5 장 Azospirillum 균주의 질소 고정 유전자의 특성과 구조 분석...87
  • 제 1 절 서론...89
  • 제 2 절 실험 재료 및 방법...92
  • 1. 사용 균주 및 플라스미드...92
  • 2. 사용 배지 및 효소...93
  • 3. DNA 분리...93
  • 4. DNA Probe의 제조...93
  • 5. Hybridization...94
  • 제 3 절 결과 및 고찰...94
  • 1. Azospirillum의 large plasmid 분리...94
  • 2. Azospirillum의 large plasmid 분석...95
  • 3. Azospirillum nif 유전자 분석...101
  • 제 4 절 요약...104
  • 제 5 절 참고문헌...105

연구자의 다른 보고서 :

참고문헌 (25)

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