초록 ▼

주유소 및 세차장의 폐수와 토양으로 부터 naphthalene, camphor, toluene을 분해하는 균종을 수종씩 분리하였으며 이중에서 활성이 큰 균종들을 분리 보관하였다. Naphthalene을 분해하는 균종 중에서 한종을 plasmid 수용균주로 사용하기 위하여 그 생리학적,형태학적 특성을 정확히 조사하였다. 이러한 조사로 얻어진 균을 P. putida N3라 칭하였으며 toluene을 분해하는 plasmid인 TOL plasmid를 P. putida mt-2로부터 접합에 의해서 옮겼으며 camphor를 분해하는 plasm

주유소 및 세차장의 폐수와 토양으로 부터 naphthalene, camphor, toluene을 분해하는 균종을 수종씩 분리하였으며 이중에서 활성이 큰 균종들을 분리 보관하였다. Naphthalene을 분해하는 균종 중에서 한종을 plasmid 수용균주로 사용하기 위하여 그 생리학적,형태학적 특성을 정확히 조사하였다. 이러한 조사로 얻어진 균을 P. putida N3라 칭하였으며 toluene을 분해하는 plasmid인 TOL plasmid를 P. putida mt-2로부터 접합에 의해서 옮겼으며 camphor를 분해하는 plasmid인 CAM plasmid를 P. putida PpG1으로 부터 옮겨 P.putida N3에 TOL plasmid와 CAM plasmid를 지닌 P. putida conj 26 을 만들었다. P.putida conj 26은 naphthalene,camphor,toluene을 모두 유일한 탄소원으로 이용할 수 있었으며 CAM plasmid의 활성과 TOL plasmid 의 활성은 공여체의 활성에 비해 거의 비슷한 수준으로 나타내었다. P.putida conj 26의 TOL plasmid 공여체인 P.putida mt-2와 P.putida conj 26을 m-toluic acid가 기질인 배지에서의 생장을 비교하여 본 결과 24시간 이후의 생장량은 동일하였으며 화학적 산소요구량도 거의 같은 수준으로 감소되었다. P.putida conj 26의 CAM plasmid 공여체인 P.putida PpG1과 P.putida conj 26을 camphor배지에서 키우면서 생장을 비교하여 본 결과 배양 후 24시간 이후에 두 균주는 camphor 분해활성 및 C.O.D 감소량이 거의 비슷하였다. 최종적으로 naphthalene에 대한 분해능을 비교해 본 결과 차이가 없는 결과를 얻었다.

목차 Contents

• 제1장 미생물에 의한 탄화수소 분해에 대한 연구...31
• 제1절 서론...31
• 1. 환경오염...31
• 2. 환경오염화합물의 생물학적 분해...33
• 3. Pseudomonas 속에서의 Plasmid와 탄화수소 분해계...35
• 4. 접합에 의한 plasmid의 이동...40
• 5. 수질오염에 대한 대책...42
• 6. 우리나라 방류수의 수질기준...46
• 제2절 실험재료 및 방법...48
• 1. 실험재료...48
• 2. 실험균주...48
• 3. 실험방법...49
• 가. 배지...49
• 나. Naphthalene 분해 미생물의 분리...49
• 다. 항생물질에 대한 저항성 조사...50
• 라. Catechol oxigenase의 활성 측정...51
• 마. 접합...52
• 바. DNA의 확인...52
• 사. Plasmid DNA의 분리...53
• 아. DNA의 전기영동분리...53
• 자. 화학적 산소요구량 (C.O.D)의 측정...54
• 제3절 결과 및 고찰...55
• 1. Naphthalene 균주의 개발...55
• 가. Naphthalene 분해 균주의 분리...55
• 나. 균주의 동정...55
• 다. P. putida N3.의 생장특성...59
• 라. P. putida N3.의 유사 방향족 화합물의 이용성...62
• 마. P. putida N3.에서의 catechol 분해 경로...64
• 바. P. putida N3.의 항생제 저항성과 MIC...67
• 사. P. putida N3.의 plasmid...68
• 2. 접합에 의한 multi-plasmid 균주의 개발...70
• 가. P. putida CST3 균주의 개발...70
• 나. P. putida conj26 균주의 개발...73
• 3. P. putida conj26의 분해 활성...75
• 가. P. putida conj26의 TOL plasmid의 분해 활성 비교...76
• 나. P. putida conj26의 CAM plasmid의 분해 활성 비교...82
• 다. P. putida conj26의 NAH plasmid의 분해 활성 비교...88
• 라. P. putida conj26의 CAM, TOL, NAH plasmid의 분해 활성 비교...93
• 4. 결론 및 건의사항...102
• 참고문헌...104
• 제2장 chlorinated organic compound 의 분해와 그 plasmid DNA의 특성에 관한 연구...109
• 제1절 서론...109
• 제2절 재료 및 방법...112
• 1. 배지 및 균주의 증식...112
• 2. 염소화 탄화수소 분해세균의 분리 및 동정...112
• 3. 염소화 탄화수소 분해와 분해경로 검정...113
• 4. 돌연변이주의 선발...114
• 5. Plasmid DNA의 확인 및 분리...114
• 6. Plasmid curing...115
• 7. Plasmid DNA의 순수분리 및 제한효소처리...115
• 8. 전기영동...116
• 제3절 실험결과 및 고찰...116
• 1. 염소화 탄화수소 분해세균의 선발과 동정...116
• 2. 염소화 탄화수소 분해능과 분해대사 과정...121
• 3. 염소화 탄화수소 분해유전자의 특징...137
• 제4절 결론 및 건의사항...149
• 참고문헌...152
• 제3장 중금속 폐기물 처리를 위한 미생물 균주 개발에 관한 연구...157
• 제1절 서론...157
• 제2절 실험재료 및 방법...159
• 1. 균주의 분리...159
• 2. 균주의 선택 및 확인실험...161
• 3. 항생물질에 대한 저항성 조사...161
• 4. 수은이 내성균주의 생리적 활성도에 미치는 영향...161
• 5. Plasmid분리...162
• 제3절 결과 및 고찰...163
• 1. 균주의 분리 및 동정...163
• 2. 항생물질에 대한 저항성...165
• 3. 우수균주 선별...168
• 4. 수은이 내성균주의 생리적 활성도에 미치는 영향...168
• 5. Plasmid...171
• 제4절 결론 및 건의사항...173
• 참고문헌...174