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단백 분해효소 저해제의 탐색 및 개발에 관한 연구(Ⅱ)
Screening and Development of Protease Inhibitor (II) 원문보기

보고서 정보
주관연구기관 한국생명공학연구원
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology
연구책임자 고영희
참여연구자 오태광 , 서영배 , 전효곤 , 조경연 , 김태효 , 이호재 , 정명철 , 노현모 , 이승환
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월1991-07
주관부처 과학기술부
사업 관리 기관 한국생명공학연구원
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology
등록번호 TRKO200200004098
DB 구축일자 2013-04-18
키워드 단백질 분해효소.효소저해제.트립신.펩신.파파인.Protease.Enzyme inhibitor.Protease inhibitor.Trypsin.Pepsin.Papain.Pepstatin.

초록 ▼

미생물 대사산물로 부터 저분자의 단백질 분해효소 저해제를 탐색하기 위하여 토양미생물을 분리 배양하여 Screening 작업을 수행하였다. Trysin, Pepsin, Papain에 대하여 저해활성을 갖고 있는 60개의 균주를 1차 선정하고 이들 중 각 효서에 대한 특이한 저해활성이 있는 균주 6주를 최종 선정하여 이들 배양액으로 부터 저해활성물질을 분리 정제하였다. 정제된 저해 활성물질에 대한 이화학적 특성을 조사한 결과 기지의 물질인 Pepstatin을 얻었고 Arginine : Phenylalanine : Valine = 1:1

목차 Contents

  • Part 1. 방선균이 생산하는 단백질 분해효소 저해제의 탐색...17
  • 제 1 장 서론...19
  • 제 2 장 실험재료 및 방법...24
  • 제 1 절 실험재료...24
  • 제 2 절 실험방법...24
  • 1. 사용배지...24
  • 2. 토양채취 및 균주분리...26
  • 3. 저해제 생산...26
  • 4. 단백질 분해효소 저해제의 역가측정...27
  • 5. 단백질 분해효소 저해제 생산균주의 탐색...28
  • 6. 단백질 분해효소 저해제의 부리정제...29
  • 제 3 장 실험결과...33
  • 제 1 절 단백질 분해효소 저해제 생산균주의 선별...33
  • 제 2 절 493-16 균주에 의한 pepsin 저해제의 생산 및 분리...33
  • 제 3 절 12-6에 의한 papain 저해제의 생산 및 분리...38
  • 제 4 절 A-138에 의한 trypsin 저해제의 생산 및 분리...48
  • 제 5 절 B84에 의한 papain inhibitor의 생산 및 분리...52
  • 참고문헌...56
  • Part 2. 신기능성 단백질 분해효소의 탐색 및 유전자 재조합에 의한 효소생산...59
  • 제 1 장 서론...61
  • 제 2 장 재료 및 방법...65
  • 제 1 절 토양미생물로부터 protease를 분해하는 균주들의 선별...65
  • 제 2 절 선별된 토양미생물 균주의 동정...65
  • 제 3 절 Extracellular protease gene의 shot-gun cloning...66
  • 1. 선별된 균주 Serratia marcescens RH1으로부터 chromosomal DNA의 분리...66
  • 2. Shot-gun cloning...67
  • 제 4 절 SDS-polyacylamide gel electrophoresis 및 native gel을 이용한 activity assay...68
  • 제 5 절 Protease activity assay...68
  • 제 3 장 결과 및 고찰...70
  • 제 1 절 Protease를 분비하는 토양미생물의 선별...70
  • 제 2 절 Major extracellular protease의 생화학적 특성...73
  • 제 3 절 Protease gene의 shot-gun clongin...76
  • 제 4 절 Cloning된 protease의 동정 및 분석...78
  • 제 5 절 Protease의 생화학적 특성...80
  • 제 6 절 결론...80
  • 참고문헌...83

연구자의 다른 보고서 :

참고문헌 (25)

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