초록 ▼

본 연구에서는 인공 심장용 재료의 생체 적합성을 향상시키기 위하여 현재 인공 심장의 재료로 사용되고 있는 폴리우레탄(Pellathanc 2363-80 AE)에 대하여 혈전 분해 효소인 룸부로키나제(Lumbrokinase)를 고정화 시키는 방법과 혈관 내피 세포 (Endothelial cell)를 안정적으로 배양하는 기술을 개발하였다.폴리우레탄에 대한 효소의 고정화 방법을 개선하기 위하여 기존에 많이 사용되고 있던 Hexamethylene Diisocyanate (HMDI)를 연결인자로 사용했을 경우와 본 연구진에 의하여 새로이 개발

본 연구에서는 인공 심장용 재료의 생체 적합성을 향상시키기 위하여 현재 인공 심장의 재료로 사용되고 있는 폴리우레탄(Pellathanc 2363-80 AE)에 대하여 혈전 분해 효소인 룸부로키나제(Lumbrokinase)를 고정화 시키는 방법과 혈관 내피 세포 (Endothelial cell)를 안정적으로 배양하는 기술을 개발하였다.폴리우레탄에 대한 효소의 고정화 방법을 개선하기 위하여 기존에 많이 사용되고 있던 Hexamethylene Diisocyanate (HMDI)를 연결인자로 사용했을 경우와 본 연구진에 의하여 새로이 개발된 방법인 Maleic Anhydride Methylvinyl Ether Copolymer(MAMEC)를 폴리우레탄 표면에 코팅하는 기법을 사용했을 경우에 각각 고정화된 효소의 양과 활성을 비교해보았다. 그 결과 고정화된 효소이 양은 두 방법 모두 비슷한 수준이었으나,고정화된 효소의 활성을 각각 4% 와 34% 로 MAMEC 를 사용했을때가 효소의 활성면에서 약 9배의 향상을 나타내었다.또한 고정화된 효소의 안정성 테스트에서도 기존의 유사한 혈전분해효소인 유로키나제와 비교했을때 온도,pH,억제 인자의 영향에 대하여 룸부로키나제는 온도(37-80℃),pH(4-10),억제인자(최소 60% 이상의 활성유지)의 영향을 거의 받지 않는 매우 안정적인 활성을 보였다.In Vitro 혈액 적합성 테스트 결과 폴리우레탄 콘트롤에 비하여 약8배 정도 혈전의 형성을 억제하였다.현 전세계적으로 혈관내피세포의 부착을 유도하기 위하여 사용되는 물질인 피브로넥틴을 비교대상으로 하여 본 연구진에서 개발한 세포외 기질을 폴리우레탄에 도입하는 방법을 사용하여 혈관 내피세포의 성장율 및 부착능을 비교평가해 보았다.실험결과 세포를 배양한지 약13일 후부터 부착된 세포의 수에서 ECM을 처리한 경우에 약5배이상 증가하였으며,현미경 관찰 결과 세포의 형태도 정상세포와 같은 생리활성을 갖추고 있는 모습이었다.

목차 Contents

• 제1장 서론...7
• 제1절 연구개발의 필요성...7
• 제2절 현재까지의 연구개발 현황...9
• 제3절 연구개발의 목적과 범위...12
• 제2장 연구추진 방법 (실험 방법)...13
• 제1절 룸부로키나제의 순수분리법 개발...13
• 제2절 룸부로키나제가 고정화된 재료의 체내 독성 테스트...23
• 제3장 연구 결과 및 고찰...36
• 제1절 룸부로키나제의 분리 및 정제...36
• 제2절 룸부로키나제가 고정화된 재료의 체내 독성 테스트...71
• 제4장 결론...85
• 제5장 참고 문헌...87
• 제6장 국제 협력 과제...91