초록 ▼

원통형 깊이 필터(cylindrical depth filter)를 동물세포의 고정화 matrix로 사용한 DFPS(depth filter perfusion system)에서의 세포의 고정화가 간단하게 이루어 졌고, 연속 배양 시에 높은 회석율로 조업되므로 744mg/L/day 의 높은 항체 생산성을 얻을 수 있었다. Matrix내의 배재 흐름이 바깥에서 안쪽으로 공급됨에 따라 더욱 빨라지는 효과가 세포의 생존도를 향상시키는 것으로 생각되며, 이와 같은 효과는 바깥 부분의 pore size가 내부보다 큰 필터를 사용 할 때보다 고정화

원통형 깊이 필터(cylindrical depth filter)를 동물세포의 고정화 matrix로 사용한 DFPS(depth filter perfusion system)에서의 세포의 고정화가 간단하게 이루어 졌고, 연속 배양 시에 높은 회석율로 조업되므로 744mg/L/day 의 높은 항체 생산성을 얻을 수 있었다. Matrix내의 배재 흐름이 바깥에서 안쪽으로 공급됨에 따라 더욱 빨라지는 효과가 세포의 생존도를 향상시키는 것으로 생각되며, 이와 같은 효과는 바깥 부분의 pore size가 내부보다 큰 필터를 사용 할 때보다 고정화된 세포의 유출 빈도가 낮아 쉽게 고농도의 세포에 이르렀고, 따라서 짧은 배양시간만에 높은 생산성을 얻을 수 있었다. 필터의 가격이 다른 배양 시스템의 고정화 matrix에 비해 저렴하고, 안정적으로 조업될 수 있으며, scale-up이 용이한 DFPS는 동물 세포 배양에 매우 효과적으로 쓰일 수 있는 배양기로 생각되어진다. 산소전달현상의 수학적 고찰을 통해 칼슘알지네이트, 이중실관 반응기 및 DFPS내에서의 산소농도 분포를 구할 수 있었으며, 칼슘알지네이트에서는 캡슐 내부에 심각한 산소 결핍현상이 나타났으며, 이중실관 반응기에서는 내부와 외부에 동시 산소공급효과로 기존의 실관 반응기에 비해 훨씬 효율적인 산소전달이 가능하였다. 그리고 DFPS에서는 Diffusion에 의한 산소의 전달보다 흐름에 의한 산소전달로 인해 Filter 내부의 산소 농도의 변화가 심각하지 않음을 알 수 있었다. 최종적으로 가장 scale-up이 용이한 DFPS에 대한 scale-up module 제안 및 가능성을 타진하여 보았다.

목차 Contents

• 제1장 서론...13
• 제1절 동물 세포의 배양...13
• 제2절 단일클론항체와 하이브리도마...14
• 제3절 동물 세포 배양기...17
• 제4절 본 연구에서의 생물 반응기의 개발...24
• 제2장 실험 재료 및 방법...28
• 제1절 세포주 및 배지...28
• a. 세포주...28
• b. 배지 및 계대 배양...28
• c. 배지의 조제...28
• 제2절 분석 방법...29
• a. 세포 농도...29
• b. 포도당의 농도...31
• c. 암모니아의 농도...32
• d. 항체의 농도...33
• 제3절 배양 방법 (생물 반응기)...36
• a. Depth filter perfusion system (DFPS)...36
• b. 산소농도 분포 계산...37
• 제3장 결과 및 고찰...41
• 제1절 Depth filter perfusion system...41
• 제2절 고정화 세포 배양에서의 산소 전달 현상 분석...50
• a. Ca-alginate 에서의 산소 전달...53
• b. 이중 실관 생물 반응기에서의 산소 전달...60
• c. Depth filter perfusion system 에서의 산소농도 분포...82
• 제3절 개발된 반응기의 scale-up module 및 가능성...87
• a. 산소전달 방법...87
• b. 가능한 scale-up modules...90
• 제4장 결론 및 건의...94
• -참고문헌(총괄)-...96