초록 ▼

본 연구는 자연환경을 보호하면서 보다 안전한 무공해 살충제를 개발하기 위하여 국내 토양에서 분리하거나 형질 전환한 새로운 균주를 이용하여 농작물 해충 또는 위생곤충 방제에 적합한 B.t.군주를 선발하는 것을 연구개발의 목적으로 하고 있다. 본 연구의 내용 및 범위는 다음과 같다.
·토양료 채취 및 B.t. 분리
·분리된 B.t.균주의 특성조사
·숙주범위가 넓어지고 독성이 증가된 새로운 재조합 B.t.균주의 제작
·재조합 B.t.균주의 특성조사
·효율적인 모기 유충 방제를 위한 재조합 cyanoba

본 연구는 자연환경을 보호하면서 보다 안전한 무공해 살충제를 개발하기 위하여 국내 토양에서 분리하거나 형질 전환한 새로운 균주를 이용하여 농작물 해충 또는 위생곤충 방제에 적합한 B.t.군주를 선발하는 것을 연구개발의 목적으로 하고 있다. 본 연구의 내용 및 범위는 다음과 같다.
·토양료 채취 및 B.t. 분리
·분리된 B.t.균주의 특성조사
·숙주범위가 넓어지고 독성이 증가된 새로운 재조합 B.t.균주의 제작
·재조합 B.t.균주의 특성조사
·효율적인 모기 유충 방제를 위한 재조합 cyanobacteria 제작
·B.t. 내독소 단백질의 조직병리학적 연구 주된 연구결과는
·전국의 곤충서식처로부터 1259개의 먼지와 토양시료를 채취하여 B.t.의 분포와 독성을 조사하였슴
·총 1259개의 채취된 먼지와 토양시료에서 포자와 내독소 단백질을 생산하는 292개에 이르는 많은 수의 B.t.가 분리되었슴.
·분리된 B.t.중 새로운 균주일 가능성이 높은 50개의 균주를 선발하고, 현재 이들을 대상으로 H-antibody와 내독소 단백질의 antibody를 이용한 분류, 동정과 여러 가지 생화학적, 분자유전학적 분석이 수행되어지고 있슴.
·분리된 균주중 나비목과 파리목의 유충에 동시 독성으로 보이는 B.t. NT0423을 수용체로 하여 B.t.의 cryIVD와 cryA 유전자를 형질전화시켜 새로운 재조합 균주를 제작하고 독성을 검정하였슴.
·광합성 부유세균인 Synechocystis PCC6803에 모기 유충에 강한 독성을 보이는 B.t subsp. morrisoni PG-14의 cryIVD유전자를 형질전환기켜 재조합 cyanobavteria를 제작하였슴.
·B.t 내독소 단백질의 작용기작을 알아보기 위하여, B.t의 내독소 단백질에 의한 곤충중장조직과 지방체조직의 미세구조 변화를 관찰하고, 그 생화학적 변화와 치사 이전의 생리적 변화를 조사하였슴.

목차 Contents

• 제1장 서론...14
• 제2장 연구추진방법...17
• 제1절 곤충서식처로부터 Bacillus thuringiensis의 분리 및 특성 조사...17
• 1.1 시료채취...17
• 1.2 Bt의 분리...17
• 1.3 분리된 Bt의 정량적 독성검정...17
• 1.4 위상차현미경 및 전자 현미경 관찰...18
• 1.5 H-antibody 의 제조...18
• 제2절 재조합 Bacillus thuringiensis의 제작...19
• 2.1 사용균주...19
• 2.2 형질전환...19
• 2.3 SDS-PAGE...19
• 2.4 전자현미경 관찰...20
• 2.5 독성검정...20
• 제3장 결과 및 고찰...21
• 제1절 Bacillus thuringiensis의 분리 및 특성조사...21
• 제2절 재조합 Bacillus thuringiensis의 제작...30
• 제4장 결론...35