초록 ▼

Amoeba proteus 의 xD strain 은 1966년 유해한 기생박테리아에 의한 감염으로 시작하여 숙주와 공생체간의 유기체 상호작용을 통하여 모체인 tD strain으로부터 유도된 변이주이다. 본 연구 에서는 근래에 형성된 공생 아메바인 xD strain 과 그 모체인 tD strain 의 세포질 및 순수분리한 세포분리한 세포기관자의 단백질 조성을 폴리아크릴 아마이드 2차원 전기 영동법에 의해 비교하고 특이성 단백질의 세포내의 소개 및 공생박테리아와의 관련여부를 밝혔다. silver strain에 의해 비교 가능한 200여

Amoeba proteus 의 xD strain 은 1966년 유해한 기생박테리아에 의한 감염으로 시작하여 숙주와 공생체간의 유기체 상호작용을 통하여 모체인 tD strain으로부터 유도된 변이주이다. 본 연구 에서는 근래에 형성된 공생 아메바인 xD strain 과 그 모체인 tD strain 의 세포질 및 순수분리한 세포분리한 세포기관자의 단백질 조성을 폴리아크릴 아마이드 2차원 전기 영동법에 의해 비교하고 특이성 단백질의 세포내의 소개 및 공생박테리아와의 관련여부를 밝혔다. silver strain에 의해 비교 가능한 200여개의 주요 단백질 가운데 tD strain 에서 분자량 45000 달톤, 등전점 5.9의 특이성 단백질이 xD strain 에서 세포액과 공생낭에 분자량 29.000달톤 등전점 5.5의 공생 특이성 단백질이 탐지되었다. 공생 특이성 단백질은 아메바의 고온 배양 및 실험 공생에서 세포내 박테리아의 숫적 증감에 따라 증감되었다. 종전의 세포핵 이식 및 배양 실험을 통해 밝혀진 숙주핵의 공생체에 대한 의존도, 공생아메바의 고온 감수성 및 실험공생 아메바에서 감수성의 획득, 실험 공생 4중안에 획득된 세포특이성에 비추어 이상에서 탐지된 두 특이성 단백질의 세포내의 기능 및 공생기작에 관하여 논의하고 공생특이성 단백질의 순수분리 가능성에 관하여 조사한 바를 보고한다.

Abstract ▼

An organismic association between a parasitic bacteria and a host amoeba was initiated in 1966 through tht infection of the host by unknown gram negative bacteria. The symbiotic xD strain of Amoeba proteuA is deriven from the infected tD strain by developlng mutual dependence bctween the bacteria an

An organismic association between a parasitic bacteria and a host amoeba was initiated in 1966 through tht infection of the host by unknown gram negative bacteria. The symbiotic xD strain of Amoeba proteuA is deriven from the infected tD strain by developlng mutual dependence bctween the bacteria and the host amoeba. In this research protein compositions of the two strains of amoebae and of their subcellular fractions were analyged by two-dimensional polyacrylamid gel electrophoresis By comparing the protein patterns, two cell specific proteins are detected and localized among the cell organelles. Among 200 major proteins which are shown by silver staining method the cytosol of tD strain contains a unique protein whose m. wt. and isoelectric point is 45,000 dalton and 5.9 respectively. The cytosol and purified symbiotic vacuoles from xD strain contain a symbiosi-specific protein whose m. wt. and pI is 29,000 dalton and 5.5 respectively. When the population of bacteria in the cytosol was changed by growing the hosts at an elevated temperature or by establishing experimental symbiosis, the amount of the symbiosis-specific protein was changed accordingly.
Possible roles of these specific proteins in the development of endosymbiosis are discussed in review of previous studies such as the dependence of the host nucleus on the symbiotic bacteria, temperature sensitivity of the symbiotic strain, development of temperature sensitivity in the established symbiosis, and the strain specificity obtained in the early period of infection. Finally, the preliminary results that have been practiced to purify the symbiosis-specific protein are reported

목차 Contents

• 1. 서 론...6
• 2. 재료 및 방법...9
• 2.1 세표 배양...9
• 2.2 $S^{35}$에 의한 단백질 표지...9
• 2.3 아메바의 실험 공생...9
• 2.4 공생박테리아의 측정...10
• 2.5 세포기관자의 순수분리...11
• 2.6 전기영동법...11
• 2.7 겔 자기방사 사진법...11
• 2.8 공생특이성단백질의 농축및 순수분리...11
• 3. 결 과...13
• 3.1 두아메바 Strain의 단백질 양상비교...13
• 3.2 공생특이성 단백질의 출치...13
• 3.3 고온배양 효과...14
• 3.4 실험 공생아메바에서 공생특이성 단백질의 출현...15
• 3.5 공생특이성 단백질의 합성특이성...15
• 3.6 공생특이성 단백질 분리...16
• 4. 고찰...17
• 4.1 세포및 공생특이성 단백질의 세포공생에 관하여...17
• 4.2 공생특이성 단백질의 순수불리 가능성에 관하여...20
• 5. 참고문헌...22
• 6. Figure Legends...25
• 7. 논문발표실적및 계획...37