초록 ▼

Fusarium moniliforme으로부터 효모 및 식물세포벽 분해효소의 생산조건을 검토하고, 배약액에서 얻은 조효소를 정제하여 효소의 특성을 연구하고 protoplast제조 실험을 하였다.
효모세포벽 분해효소는 baker's yeast 10%와 Ammonium nitrate 0.2%첨가 배지에서 7일간 배양하여 높은 활성의 효소를 생산하였다. column chromatography로 분리한 효소는 세개의 분획구에서 활성을 보였는데 세개를 혼합했을 때 가장 활성이 높았다.
식물세포벽 분해효소로는 셀룰

Fusarium moniliforme으로부터 효모 및 식물세포벽 분해효소의 생산조건을 검토하고, 배약액에서 얻은 조효소를 정제하여 효소의 특성을 연구하고 protoplast제조 실험을 하였다.
효모세포벽 분해효소는 baker's yeast 10%와 Ammonium nitrate 0.2%첨가 배지에서 7일간 배양하여 높은 활성의 효소를 생산하였다. column chromatography로 분리한 효소는 세개의 분획구에서 활성을 보였는데 세개를 혼합했을 때 가장 활성이 높았다.
식물세포벽 분해효소로는 셀룰로오스와 펙틴을 첨가한 배지에서 4일간 배양하여 높은 활성의 cellulae와 pectinase를 동시에 얻을 수 있었다. 효소는 C?, C(sub)(x) 및 endopolygalacturonase로 분리되었는데 세포벽 분해에 상승작용을 보였다. 효모세포의 protoplast수율은 99.2%이었고 담배 잎 1g에서 5.10?개의 protoplast를 나출시킬 수 있었다.

Abstract ▼

Culture conditions of Fusarium moniliforme for yeast and plant cell wall lytic enzyme production have been investigated, and the lytic enzyme was partially purified and mode of action was studied.
Plant cell wall lytic enzymes with relatively high activity were obtained in liquid media containi

Culture conditions of Fusarium moniliforme for yeast and plant cell wall lytic enzyme production have been investigated, and the lytic enzyme was partially purified and mode of action was studied.
Plant cell wall lytic enzymes with relatively high activity were obtained in liquid media containing 1.0% microcrystalline cellulose and 0.6% citrus pectn as induible carbon sources. A strong lytic activity on viable yeast cells could be obtained in a medium containing baker's yeast (10%) and ammonium nitrate (0.2%). Studies on the lysis of Nicotiana., Daucus., Lichiospermum. and viable yeast cells showed that the lytic enzyme preparation was comparable with commercial enzymes.
Three protein peaks were obtained from gel chromatography of the crude yeast cell lytic enzyme, and C?, C(sub)(x) component and endopolygalacturonase from the crude plant cell wall lytic enzyme. The results indicated that the enzyme components acted cooperatively in the lysis of intact cells.

목차 Contents

• 서론 및 연구 배경...11
• Part I. 효모세포벽 분해효소의 생산...13
• 재료 및 방법...14
• 1. 재료...14
• 2. 방법...14
• 1) 효소의 분해역가 측정...14
• 2) 단백질 분해역가 측정...16
• 3) Laminarinase역가 측정...16
• 4) 효소의 분리 및 정제...17
• 5) 단백질 측정...18
• 6) Protoplast 조제...18
• 결과 및 고찰...21
• 1. 효소의 생산조건...21
• 1) 배양일수의 영향...21
• 2) Ammonium nitrate의 영향...22
• 3) 효소생산에 대한 pH의 영향...23
• 2. 효모의 성장시기별 세포벽 분해능...24
• 3. 효소의 분리 및 정제...25
• 4. 세포벽 분해효소의 최적 pH 및 온도...27
• 5. Protoplast 조제...28
• 6. 효소역가의 상승 효과 및 환원제의 영향...31
• Part II. 식물세포벽 분해효소의 생산...32
• 재료 및 방법...33
• 1. 재료...33
• 2. 방법...33
• 1) C.M.Case역가측정...33
• 2) 여지분해효소의 역가측정...35
• 3) Polygalacturonase 역가측정...35
• 4) 세포벽분해역가측정...35
• 5) 효소의 분리...36
• 결과 및 고찰...39
• 1. Cellulase 및 pectinase의 생산...39
• 1) inducer...39
• 2) 초기 pH에 따른 효소생산성...46
• 3) 배양온도에 따른 효소생산성...46
• 4) 질소원에 따른 효소생산성...46
• 2. 효소의 정제...46
• 1) Cellulase의 정제...46
• 2) Endopolygalacturonase의 정제...46
• 3. 효소의 특징...50
• 1) 온도 및 pH...50
• 2) 효소의 안정성...56
• 4. 원형질체 나출...56
• 5. 효소역가의 상승효과...56
• 인용문헌...62