초록 ▼

자연 또는 유전자 재조합에 의해 변형된 동물세포의 배양을 통한 유용물질의 생산기술이 발전함에 따라 부착성 및 비부착성 동물세포의 정착 및 성장면적(또는 공간)을 최대로 제공하여줄 수있는 미립담체의 개발이 절실이 요구되고 있다. 따라서 최근들어 외국에서 상업화되어 시판되고 있는 미립담체들중 가장 고농도 세포배양에 적합하다고 판단되는 다공성 스폰지형의 골라젠 미립담체를 이용하여 부착성 동물세포의 정착 및 고농도 세포배양의 가능성을 검토하였고, 여타의 미립담체와 성능비교를 하였다. 연구내용으로는 상기의 상업화된 스폰지형의 다공성 콜라

자연 또는 유전자 재조합에 의해 변형된 동물세포의 배양을 통한 유용물질의 생산기술이 발전함에 따라 부착성 및 비부착성 동물세포의 정착 및 성장면적(또는 공간)을 최대로 제공하여줄 수있는 미립담체의 개발이 절실이 요구되고 있다. 따라서 최근들어 외국에서 상업화되어 시판되고 있는 미립담체들중 가장 고농도 세포배양에 적합하다고 판단되는 다공성 스폰지형의 골라젠 미립담체를 이용하여 부착성 동물세포의 정착 및 고농도 세포배양의 가능성을 검토하였고, 여타의 미립담체와 성능비교를 하였다. 연구내용으로는 상기의 상업화된 스폰지형의 다공성 콜라젠 미립 담체에서 부착성 세포가 효과적으로 정착 및 고농도 성장이 가능한지의 여부와 타 미립담체와의 성능비교 검토가 주 연구내용이다. 연구방법으로 세포배양 배지로는 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)에 10% Horse Serum을 첨가하여 사용하였고, 세포배양 장치로는 250ml Spinner Flask를 사용하여 Humidified CO? Incubator내에서 40 RPM으로 연속교반을 하면서 매 24시간 간격으로 세포성장정도를 측정하였다. Cell counting 방법으로는 Sanford et.al의 Nuclei counting Method와 효소(Collagenase)를 이용한 방법을 사용하였다. 미립담체로는 미국의 Verax Co.에서 개발한 VX-100, Biomat Co.에서 개발한 Informatrix, 스웨덴의 Percell Biolytic 에서 나온 Cutispher-G로서 다공성 콜라젠 미립담체들이고, 성능비교를 하기위한 고형 미립담체로는 Cytodex 3(Pharmacia Co.;USA)를 사용하였다.

Abstract ▼

By the progress in culturing technology of primary or genetically engineered anlmal cells for the prodution of biologically imfortant molecules such as Vaccine, Hormones Interferons, TPA, and MAB, it has been highly motivated to develop good microcarrier which can provide the maximum attachment and

By the progress in culturing technology of primary or genetically engineered anlmal cells for the prodution of biologically imfortant molecules such as Vaccine, Hormones Interferons, TPA, and MAB, it has been highly motivated to develop good microcarrier which can provide the maximum attachment and groth surface(or void volume) to the anchorage-dependent and independent animal cell line. Therefore the primary goal of this research is to test the rscent promissing commercial sponge-type microporous collagen microcarrier such as VX-100(Verax Co.,USA) or Informatrix(Biomat Co.,USA) whether they can give good cell attachment and groth surface( or void volume) to reach high cell density culture and also compare them with other common-type microcarrier such Cytoedx 3. According to the above test result, those microcarriers can be improved and made domestically and also the optimization strategy to achieve high cell density culture process can be studied using those microcarrier.

목차 Contents

• 1. 서론...10
• 1-1. 동물세포 배양의 목적...10
• 1-2. 미립담체(Microcarrier) 배양의 목적 및 특성...12
• 1-3. 본 연구의 목적...17
• 2. 실험 재료 및 방법...18
• 2-1. 실험 재료...18
• 2-2. 실험 방법...24
• 3. 결과 및 고찰...28
• 3-1. Cytodex 3 를 이용한 세포배양...28
• 3-2. Cultispher-G를 이용한 세포배양...41
• 3-3. VX-100 을 이용한 세포배양...46
• 3-4. Informatrix Bead 를 이용한 세포배양...49
• 3-5. 회수한 세포의 재접종...52
• 4. 결론...54
• 참고문헌...56