초록 ▼

다가 양이온을 갖는 putrescine, spermidine과 spermine같은 polyamine은 thrombin, ADP, epinephrine과 collagen같은 생리적 활성제에 의해 응집되는 혈소판 응집을 억제하였다. 이의 억제는 spermine, spermidine, putrescine 순서이었으며 또한 이들 농도는 비례하였다. 동시에 polyamine은 혈소판내 phosphoinositide-특이-phospholipase C에 생성되는 inositol phosphates의 생성을 억제하였으며 protein kina

다가 양이온을 갖는 putrescine, spermidine과 spermine같은 polyamine은 thrombin, ADP, epinephrine과 collagen같은 생리적 활성제에 의해 응집되는 혈소판 응집을 억제하였다. 이의 억제는 spermine, spermidine, putrescine 순서이었으며 또한 이들 농도는 비례하였다. 동시에 polyamine은 혈소판내 phosphoinositide-특이-phospholipase C에 생성되는 inositol phosphates의 생성을 억제하였으며 protein kinase C (PKC)에 의해 일어나는 40 K dalton 단백의 인산화를 억제하였다. 또한 polayamine은 실험관내 실험에서 혈소판 phospholipase C와 PKC의 효소활성을 억제하였으며 이들의 억제는 기질에 대하여 상경적 억제양상을 나타내었다. 또한 polyamine은 ADP의 혈소판 응집을 억제하였다. 이들 시험관내 실험은 모두 그 효과가 spermine, spermidine, putrescine 순이었고 이들의 농도에 비례하였다. 그러나 polyamine은 PKC활성 촉진제인 tetradecanoic phorbol acetate(TPA)에 의한 혈소판 응집에는 거의 영향을 미치지 못하였다. 이와 같은 성적으로 미루어 polyamine은 혈소판내 phospholipase C나 PKC의 활성을 시험관내에서는 억제하나 혈소판을 억제하는 기전은 이들 효소의 활성을 억제하는 것보다 활성물질의 혈소판 결합을 억제하여 일어나는 현상으로 생각되었다.

Abstract ▼

Polyamines, such as spermine, spermidine and putrescine ingibited platelet aggregation induced by thrombin, ADP, epinephrine, and collagen. Spermine (300 μM) inhibited IP? formation in platelets induced by thrombin. The polyamines inhibited 40 kD protein phosphorylation by PKC in platelets with th

Polyamines, such as spermine, spermidine and putrescine ingibited platelet aggregation induced by thrombin, ADP, epinephrine, and collagen. Spermine (300 μM) inhibited IP? formation in platelets induced by thrombin. The polyamines inhibited 40 kD protein phosphorylation by PKC in platelets with thrombin treatement. The polyamines inhibited platelet PLC and PKC in vitro in a concentration dependent manner. The concentration of spermine for 50％ inhibition was 300μM for PLC and 2 mM for PKC. Spermine inhibited PLC activity competitively with respect to phosphatidylinositol substrate. Polyamines also inhibited ADP binding to human platelets in a dose dependent manner. The concentration of 50％ inhibition of the binding was 100 μM, 1 mM and 50mM for spermine, spermidine, and putrescine respectively. The polyamines had almost no effects on platelet aggregation induced by tetradecanoic phorbol acetate, a PKC activator. The above date suggest that the inhibitory mechanism of polyamines on platelet aggregation is due to the inhibition of ligand binding rather than the inhibition on PLC and PKC enzyme activity directly.

목차 Contents

• 1. 서론...8
• 2. 실험방법...8
• 2.1 시약류...8
• 2.2 혈소판 응집 검사...8
• 2.3 혈소판내 phospholipase C의 활성 측정...8
• 2.4 혈소판의 단백 인산화...9
• 2.5 혈소판 phospholipase C 활성 측정...10
• 2.6 PKC 활성측정...11
• 2.7 ADP의 혈소판 결합능 측정...11
• 3. 실험 결과...12
• 3.1 polyamine에 의한 혈소판 응집의 억제...12
• 3.2 thrombin에 의한 IP3생산을 polyamine이 억제...12
• 3.3 thrombin에 의한 단백 인산화를 polyamine이 억제...18
• 3.4 polyamine의 phospholipase C의 억제...18
• 3.5 polyamine의 PKC활성억제...23
• 3.6 ADP의 혈소판 결합에 미치는 polyamine의 영향...23
• 3.7 TPA에 의한 혈소판 응집에 미치는 polyamine의 영향...27
• 4. 고찰...29
• 5. 인용 문헌...31