초록 ▼

암세포의 항암제에 대한 내성화는 항암제를 사용하는 암의 치료에 있어 큰 문제점으로 지적되고 있다. 본 연구는 항암제 내성 극복을 위한 세로운 mechanism을 가진 신물질의 개발에의 연구의 일환으로서 본 연구자는 human이나 mouse의 배양 암세포의 내성 변이주를 대상으로 항암제 내성을 극복할 수 있는 신물질 screening한 결과 cadeguomycin라고 명명한 신규핵산계 항생물질이 이러한 생물활성을 가진 것을 발견했다. 이 물질은 조혈기 종양 치료제로 사용되고 있는 cytosine arbinoside (ara-C) 의

암세포의 항암제에 대한 내성화는 항암제를 사용하는 암의 치료에 있어 큰 문제점으로 지적되고 있다. 본 연구는 항암제 내성 극복을 위한 세로운 mechanism을 가진 신물질의 개발에의 연구의 일환으로서 본 연구자는 human이나 mouse의 배양 암세포의 내성 변이주를 대상으로 항암제 내성을 극복할 수 있는 신물질 screening한 결과 cadeguomycin라고 명명한 신규핵산계 항생물질이 이러한 생물활성을 가진 것을 발견했다. 이 물질은 조혈기 종양 치료제로 사용되고 있는 cytosine arbinoside (ara-C) 의 효과를 크게 증강시키는 효과를 나타내며, arc-C에 내성을 나타내는 항암제 내성 암세포에 대하여서는 그 효과가 더욱 증강되어 ara-C 내성을 극복하는 종래 알려지지 않은 새로운 작용기작을 가진 항생물질임이 예상 되었다. 본 연구에서는 cadeguomycin의 arc-C 내성극복작용의 mechanism을 규명함 과 동시에 CDM의 유도체를 합성하여 CDM 유도체의 arc-C 효과 증각작용을 조사했다. 또한 human 및 mouse 세포로부터 여러가지 약제의 대해 동시에 내성을 나타내는 다제내성 암세포를 분리하여 MDR gene의 발현 및 이 gene의 발현증강이 oncogene expression에 미치는 영향과 이러한 다제내 성 암세포에 유효한 물질을 조사하여 항암제와 병용에 의한 multidrug resistance의 극복을 시도하였다.

Abstract ▼

The development of drug resistance remains a major cause of failure of clinical cancer chemotherapy We have been screened new agents with new mechanism against drug-resistant cancer cells Cadeguomycin (CDM) is a new nucleoside antibiotic with the unique property of potentiating cytotoxicity of ara-

The development of drug resistance remains a major cause of failure of clinical cancer chemotherapy We have been screened new agents with new mechanism against drug-resistant cancer cells Cadeguomycin (CDM) is a new nucleoside antibiotic with the unique property of potentiating cytotoxicity of ara-C to cancer cells in vitro Moreover, CDM, which exhibited more effective to ara-C resistant cancer cells than ara-C sensitive cells, overcomes their ara-C resistance In this study we investigated the mechanism of CDM overcoming ara-C resistance and synthesized analogs of CDM Several analogs of CDM exhibited more effective than CDM in potentiating cytotoxicity of ara-C. To study the mechanism of drug resistance in cancer cells, we isolatd multidrug resistant (MDR) cancer cells which exhibited the cross-resistance to wide variety of anticancer drugs We investigated whether MDR gene amplifies in MDR cells and the effect of oncogene expression which associated with MDR gene expression. In a futher attmept to clarity overcoming drug resistance We examined that the effect of resistance modifier aight possibly oncoletely overcome the MDR phenotype

목차 Contents

• 1. 암세포의 항암제에 대한 multidrug resistance mechanism의 유전생화학적 연구...7
• 1.1 서 론...8
• 1.2 실험재료 및 방법...11
• 1.2.1 세포 배양...11
• 1.2.2 항암제 내성 변이주의 분리...12
• 1.2.3 약제감수성 검사 및 chemosensitizer에 의한 내성극복효과조사...12
• 1.2.4 Genomic DNA 분리정제...13
• 1.2.5 DNA dot blot...14
• 1.2.6 Nick translation...15
• 1.2.7 Hybridisation...15
• 1.3 실험성적...17
• 1.3.1 MDR 세포변이주 분리 및 교차내성분석...17
• 1.3.2 약제 병용에 의한 내성극복효과...25
• 1.3.3 p-Glycoprotein 유전자의 변화...33
• 1.4 고 찰...36
• 1.5 참고문헌...39
• 2. Cadeguomycin (CDM)에 의한 ara-C 내성극복작용기전...44
• 2.1 서 론...45
• 2.2 실험재료 및 방법...46
• 2.2.1 실험재료...46
• 2.2.2 세포 배양...46
• 2.2.3 Ara-C 내성세포의 분리...46
• 2.2.4 Ara-C 세포독서에 대한 cadeguomycin의 효과...47
• 2.2.5 효소활성의 측정...47
• 2.2.6 dCMP deaminase의 정제...48
• 2.2.7 CDM-5'-monophoshate의 dCMP deaminase 활성저해의 측정...49
• 2.2.8 Ara-C 세포독성에 대한 cadeguomycin 유도체의 효과...50
• 2.3 실험결과 및 고찰...50
• 2.3.1 CDM에 의한 ara-C 내성극복작용...50
• 2.3.2 Ara-C 내성세포에 있어 효소 활성의 변화...52
• 2.3.3 dCMP deaminase의 정제...54
• 2.3.4 CDM의 dCMP deaminase 저해작용...54
• 2.3.5 CDM-5'-monophosphate의 dCMP deaminase 저해양식의 해석...57
• 2.3.6 CDM 유도체의 구조활성 관계...57
• 2.3.7 CDM 유도체의 ara-C 내성극복작용...60
• 2.3.8 CDM과 tetrahydrouridine의 ara-C 효소 증강 활성의 비교...60
• 2.4 Reference...64