초록 ▼

중국산 발효두유(상품명 `생천')에 사용된 균주는 Azotobacter 변이주인데 Azotobacter는 대두유를 발효시키고 번식하기 어려운 균주이므로, 대두 식품류 또는 관련 식품에서 균주를 수집 분리 선발하고, 대두유 발효에 대한 적합성, 발효두유의 식품으로서의 안전성, 그리고 면역기능 항진을 위시한 각종 기능성을 조사 확인하였다. 따라서 연구의 주된 내용은 균주의 비병원성, 세균학적 동정, 그리고 발효유의 안전성, 항변이원성, 항산화성, 독성물질의 독성감소효과, 체액성 면역 및 세포성 면역 기능 항진효과, 전이성 암세포에 대한

중국산 발효두유(상품명 `생천')에 사용된 균주는 Azotobacter 변이주인데 Azotobacter는 대두유를 발효시키고 번식하기 어려운 균주이므로, 대두 식품류 또는 관련 식품에서 균주를 수집 분리 선발하고, 대두유 발효에 대한 적합성, 발효두유의 식품으로서의 안전성, 그리고 면역기능 항진을 위시한 각종 기능성을 조사 확인하였다. 따라서 연구의 주된 내용은 균주의 비병원성, 세균학적 동정, 그리고 발효유의 안전성, 항변이원성, 항산화성, 독성물질의 독성감소효과, 체액성 면역 및 세포성 면역 기능 항진효과, 전이성 암세포에 대한 전이 억제 및 암 발생 억제 효과 등을 in vitro와 in vivo에서 시험하였다. 수집 또는 분리된 200여 주의 관련 균주 중에서 가장 대표적인 균주를 선발하고 동정한 결과, Bacillus sp. 였고 비병원성이고 그 균주에 의한 발효유는 식품학적인 안전성이 충분히 인정되었으며, Bacillus sp. SK-31로 명명하고 특허 관계 균주의 등록을 마쳤다. 발효두유의 항산화력과 항변이원성은 뛰어난 편이고, 독성 감소 효과도 인정되었다. In vitro 실험과, in vivo 실험에서 phagocitosis와 IgA, IgG의 증가 등 면역기능을 항진시켰고, 전이성 폐암세포인 SOS cell line의 F344 rat에 대한 발암실험에서 항암 또는 암 발생의 억제 효과를 확인할 수 있었다. 본 발효식품은 저농도임에도 중국산 ㅂ발효유 `생천'보다 우수한 성적을 나타내었다. 계속적 추시에서도 동일한 결과를 얻었다.

Abstract ▼

Non nutritive health factors in fermented foods were discussed for many years and a variety of pap0ers proposed the yogurt fermented with Lactobacillus casei or Bifidobacterium strains was an effective food for prevent the cancer or to promote the immunological activities.- Lately chinese professor

Non nutritive health factors in fermented foods were discussed for many years and a variety of pap0ers proposed the yogurt fermented with Lactobacillus casei or Bifidobacterium strains was an effective food for prevent the cancer or to promote the immunological activities.- Lately chinese professor Yang asserted the strong anticancer activity and immunological activity of fermented soy milk fermented with a kind of Azotobacter species. And the fermented soy milk product(Saeng chun, produced in china) is now widely sold with very much expensive value in korea for the cancer patients. Authors tried to develope the more highly effective fermented soybean milk product using quite different strains of Bacillus sp. from Yang's method. Bacillus sp. SK-31 strain was selected from the korean traditional fermented soy bean paste and identified as a non pathogenic strain and the food stability of the fermented soy milk with the strain was also proved. Strong activites of antimutagenicity, antioxidation, antitoxicity of drug(MNNG), anticancer(spontaneous osteo sarcoma for F344 rat) and promoting immunological activities(macrophage, IgA, IgG) were also proved. A various king of physiological activites of the fermented soy milk was tested in vitro and in vivo. It was identified and proved that the fermented soy milk showed somewhat higher activities of immunological response and SOS cancer prevention activity even though in lower concentration. It was thought that the fermented soy milk product is able to supply the market demand of effective functional food with a very cheap prices and to keep the people's health of low income classes.

목차 Contents

• 제 1 장 서론...12
• 제 2 장 국내$ \cdot $외 기술개발 현황...15
• 제 3 장 연구개발 수행내용 및 결과...18
• 제 1 절 실험재료 및 방법...18
• 1. Soybean milk의 제조...18
• 2. 균주 screening을 위한 발효대두유 sample 제조...18
• 3. 항산화 효과 측정...19
• 가. 전자공여능 조사를 통한 항산화능 검사...19
• (1) DPPH reagent 제조...19
• (2) DPPH assay method...19
• 나. $ O_2 $ radical 생성억제 및 소거능 측정...20
• 다. 지질 과산화물 측정에 의한 항산화능 측정...20
• 4. 항돌연변이 효과의 측정...21
• 가. Rec assay...21
• (1) 피검 균주의 특성조사...22
• (2) Test mutagen...22
• 나. Ames test...22
• (1) 피검 균주의 준비...24
• (2) 피검 균주의 특성 조사...24
• (가) Histidine 요구성...24
• (나) rfa mutation...24
• (다) uvrB mutation...24
• (라) R factor 확인...25
• (3) Preincubation method...25
• 5. L929 cell line을 이용한 CCl$ _4 $에 대한 독성감소 효과 측정...26
• 6. 면역세포 활성화 효과 측정...27
• 가. PEC(peritoneum exudated cell) 활성화의 측정...27
• (1) PEC의 준비...27
• (2) Macrophage의 반응 대사 산물 NO(nitric oxide)의 측정...27
• (3) PEC의 phagocytosis activation 효과 측정...28
• (가) 대상 미생물의 준비...28
• (나) PEC의 phagocytic activity 측정...28
• 나. Spleen cell activation 효과 측정...29
• (1) Spleen cell의 분리...29
• (2) MTT assay를 통한 spleen cell activation 효과 측정...29
• 다. Peyer's patch cell activation 효과 검사...30
• (1) Peyer's patch cell의 분리...30
• (2) XTT assay를 통한 peyer's patch activation 측정...30
• 7. Serum IgG와 장관내 IgA의 측정...31
• 가. Immunization...31
• 나. IgA 측정을 위한 mouse 장의 분리 및 lavage solution 처리...31
• 다. IgG 측정을 위한 serum의 준비...32
• 라. 항원의 준비...32
• (1) 항원 조단백질의 분리 및 보관...32
• (2) 단백질 정량...34
• 마. 항체 역가 측정...34
• 8. F344 rat에서 폐전이 암세포인 SOS의 폐전이 억제효과 측정...34
• 제 2 절 실험결과 및 고찰...36
• 1. 항산화 효과 측정을 통한 균주의 1차 선별...36
• 가. 전자 공여능 조사를 통한 항산화능 검사...36
• 나. Pyrogallol autoxidation에 의한 $ \cdot \; O_2 \; ^- $ radical 생성억제 및 소거능...37
• 2. 면역기능 활성화 효과 측정에 의한 균주의 2차 선별...38
• 가. Mouse PEC(peritonieum exudated cell)의 활성화 효과 측정...38
• 나. Spleen cell growth activation 효과 측정...39
• 3. 안정성 검사에 의한 균주의 3차 선별...40
• 가. L929 cell line을 이용한 세포독성 검사...40
• 나. Wister 계 rat을 이용한 경구투여 안전성 검사...41
• 4. 최종 선발 균주의 동정...42
• 5. 발효대두유의 항산화 효과...44
• 가. 전자공여능 검사...44
• (1) 배지 종류에 따른 발효액의 항산화력 비교...44
• (2) 조정제 단계에 따른 전자 공여능의 비교...45
• (3) 배양시간에 따른 경시적 전자공여능의 변화...46
• (4) 각종 유기용매에 대한 전자공여성 물질의 전이 효과...47
• 나. 배지 종류 및 조정제 단계에 따른 $ \cdot \; O_2 \; ^- $ radical 생성억제 및 소거효과...48
• 다. 지질 과산화물 측정에 의한 항산화능 측정...49
• 6. 발효 대두유의 항돌연변이 효과...51
• 가. 각종 직접 돌연변이원에 대한 항돌연변이 특성...51
• 나. 배지종류 및 조정제 단계별 sample의 항돌연변이 효과...53
• 다. 배양시간에 따른 항돌연변이 효과의 변화...54
• 라. Ames test를 통한 항돌연변이 효과 측정...55
• 7. $ CCl_4 $에 대한 독성감소효과...57
• 8. 면역활성화 효과 및 항암효과...58
• 가. Peyer's patch activation 효과...58
• 나. PEC(peritoneum exudated cell)의 phagocytosis activation 효과...58
• 다. 장내 IgA 및 serum IgG의 측정...60
• 라. F344 rats에서 폐전이 암세포인 SOS의 폐전이 억제효과 측정...62
• 제 4 장 연구개발목표 달성도 및 대외기여도...64
• 제 5 장 연구개발결과의 활용계획...65
• 1. 항암제 부작용의 제거 효과...65
• 2. 암 발생의 예방 및 독성 물질(변이원성 물질)의 독성 감소 효과...65
• 3. 경제성의 제고 효과...65
• 4. 영양 보강 식품으로서의 기능이 기대 된다...66
• 5. 기타의 생리적 기능성 기대...66
• 6. 건강 보조 식품으로 활용...66
• 7, 제품의 공업적 생산...66
• 제 6 장 참고 문헌...67