초록 ▼

본 연구의 최종목표는 흡수율이 낮은 점안약물의 결막 및 각막의투과기전을 밝히고, 안조직내 이행을 증가시켜 치료효과를 높이는데 있다. 모델약물로서는수용성인 atenolol 및 상대적으로 지용성인 propranolol을 사용하였다. 또한 소장점막에서세포간극경로로 수송되며 촉진효과를 나타내는 Pz-peptide의 안점막에서의 응용가능성을 검토하였다. 대조되는 간극경로 흡수촉진로서는 EDTA 및 cytochalasin B를 사용하여 상대적으로 평가하였다. 한편, Pz-peptide의 세포간극 약물 투과촉진 기전을 밝히기

본 연구의 최종목표는 흡수율이 낮은 점안약물의 결막 및 각막의투과기전을 밝히고, 안조직내 이행을 증가시켜 치료효과를 높이는데 있다. 모델약물로서는수용성인 atenolol 및 상대적으로 지용성인 propranolol을 사용하였다. 또한 소장점막에서세포간극경로로 수송되며 촉진효과를 나타내는 Pz-peptide의 안점막에서의 응용가능성을 검토하였다. 대조되는 간극경로 흡수촉진로서는 EDTA 및 cytochalasin B를 사용하여 상대적으로 평가하였다. 한편, Pz-peptide의 세포간극 약물 투과촉진 기전을 밝히기 위하여,이온수송 저해제의 영향을 관찰하였으며, 수종의 수용성 모델약물에 대한 Pz-peptide의 영향을 검토하였다.결막의 투과는 각막보다 약 29배의 높은 값을 보였다. 결막에서는 점막측으로부터장막측(m/s)으로의 투과성이 높았다. 이에 비해 각막에서는 두 방향성 간의 유의한 차이를 나타내지 않았다. 각막 및 결막에서 Pz-peptide의 투과성은 농도의존적으로 증가되었다. 따라서 Pz-peptide는 세포 간극경로로 수송되며, 또한 농도의 증가에 따라 자신의 투과성도 증가시킨다고 생각되었다. 각막 및 결막의 Pz-peptide의 수송에 미치는 이온수송저해제(amiloride, ouabain, hexamethylene amiloride, 점막측 Na+의 고갈)의 영향은 대조군과 유의한 차이를 나타내지 않았다. 따라서 각막 및 결막의 안점막에서 Pz-peptide의 간극경로 수송 및 촉진효과는 Na+수송계와는 무관한 것으로 생각된다. Pz-peptide는 수용성인 atenolol 및 상대적으로 지용성인 propranolol의 각막 및 결막 투과성을 증가시켰다.Pz-peptide에 의한 atenolol의 투과성 증가는 간극경로 촉진작용으로 설명되며, Pz-peptide에의해 지용성인 propranolol의 투과성이 증가된 기전은 G-프로테인이 관여하는 세포내 수송때문인 것으로 생각된다. Pz-peptide는 간극경로 수송의 모델물질인 mannitol, fluorescein및 FD-4의 각막 투과성을 각각 50%, 57%, 106% 증가시켰다. 한편, 결막에서는 FD-4 및FD-10의 투과성을 각각 46%, 39% 증가시켰다. 이러한 결과로부터 Pz-peptide는 각막에서 분자량 4,000까지의 약물을, 결막에서는 분자량 10,000이상의 약물에 대한 간극경로 수송을 촉진할 것으로 추정되었다. 약물 점안시 propranolol의 경우에는 Pz-peptide의 영향이관찰되지 않았으나, atenolol의 경우에는 Pz-peptide가 약물의 안조직내 이행을 유의성 있게증가시켰다. 그 효과는 EDTA 및 cytochalasin B와 필적할만한 값을 나타내었다. 상대적으로 지용성인 propranolol은 점안후 첨가제에 의한 전신이행성의 변화가 관찰되지 않았다. 한편, 수용성인 atenolol의 경우에는, EDTA에 의해 흡수속도정수(ka), Cmax, AUC값이 증가되었으나, Pz-peptide에 의한 영향은 보이지 않았다. 즉, Pz-peptide는 수용성인atenolol의 점안시, 안조직내로의 이행성을 증가시켰으나, 전신이행에는 대조군과 유의한 차이를 보이지 않았다.이와 같이 본 연구에서 약물의 안조직내 이행을 높일 수 있는 기초연구 중,Pz-peptide는 세포간극 경로로 수송되며 분자량 4,000까지의 수용성 물질의 안점막 투과를촉진하였다. 또한 수용성 atenolol에 대한 결과로부터, Pz-peptide는 수용성 약물의 점안시, 전신이행을 억제하며 조직내 이행을 높이기 위한 촉진제로의 응용 가능성이 기대된다.

Abstract ▼

The relative impermeability of the corneal epithelium to polardrugs is well known. The objectives of this study were: (a) to determine the relativepermeability of the cornea and the conjunctiva to Pz-peptide, (b) to determine whetherPz-peptide enhanced its own transport as well as that of pola

The relative impermeability of the corneal epithelium to polardrugs is well known. The objectives of this study were: (a) to determine the relativepermeability of the cornea and the conjunctiva to Pz-peptide, (b) to determine whetherPz-peptide enhanced its own transport as well as that of polar solutes across the corneaand the conjunctiva, and (c) to evaluate the effect of Pz-peptide on the ocular andsystemic absorption of topically applied hydrophilic atenolol and lipophilic propranolol inthe rabbit. The polar solutes were mannitol (M.W. 182), atenolol (M.W. 266),fluorescein (M.W. 376), FD-4 (M.W. 4,000) and FD-10 (M.W. 10,000). For comparison,EDTA and cytochalasin B were also evaluated.Drug penetration across the rabbit cornea and conjunctiva was evaluated using themodified Ussing chamber. Ocular and systemic absorption of topically applied atenololand propranolol was evaluated.The conjunctiva was 29 times more permeable than the cornea to 3 mMPz-peptide. Conjunctival Pz-peptide transport was 1.7 times more extensive in themucosal-to-serosal than in the opposite direction, whereas corneal Pz-peptide transportshowed no directionality. Both corneal and conjunctival transport increased withPz-peptide concentration over the 1-5 mM range, suggesting that Pz-peptide enhancedits own transport across both epithelial tissues. The cornea appeared to be moresensitive than the conjunctiva to the penetration enhancement effect of Pz-peptide.Thus, whereas Pz-peptide elevated the corneal transport of mannitol, fluorescein, andFD4 by 50%, 57%, and 106%, respectively, it did not affect the conjunctival transport ofmannitol and fluorescein, while enhancing FD4 transport by only 46%. Moreover, whilePz-peptide enhanced the ocular absorption of topically applied hydrophilic atenolol, it didnot affect the ocular absorption of lipophilic propranolol. Interestingly, Pz-peptide didnot affect the systemic absorption of either beta adrenergic antagonist.Pz-peptide appears to be able to penetrate both the cornea and the conjunctiva byparacellular mechanism. Pz-peptide appears to increase the ocular absorption ofhydrophilic but not lipophilic drugs, while not affecting the systemic absorption of eithertype of drugs. The attractiveness of Pz-peptide as a possible penetration enhancer fortopically applied hydrophilic drugs is its preferential effect on ocular absorption, as theresults with topically applied atenolol seem to suggest.

목차 Contents

• 1. 본 문...7
• 1. 서 론...7
• 가. 연구배경...7
• 나. 연구의 목적 및 범위...10
• 2. 연구방법...11
• 가. Ussing chamber를 사용한 모델약물의 각막 및 결막 투과기전...11
• 1) 재료 및 시약...11
• 2) 각막 및 결막 투과성 측정...11
• 3) 세포간극경로 수송 촉진제의 영향...11
• 4) 세포내 이온수송이 각 모델약물의 투과에 미치는 영향...12
• 5) 투과계수(apparent permeability coefficient)의 산출...12
• 6) Pz-peptide, Pz-product, atenolol 및 propranolol의 HPLC 정량...12
• 나. 토끼를 사용한 in vivo에 있어서 안점막 수송...13
• 1) 모델약물의 점안후 안조직으로의 이행성 측정...13
• 2) 모델약물의 점안후 전신순환으로의 이행성 측정...13
• 3) 모델약물의 안 조직 및 전신순환으로의 이행에 미치는 첨가제의 영향...13
• 4) 약물속도론적 해석...14
• 3. 연구결과...15
• 가. 각막 및 결막에서 Pz-peptide 및 Pz-product 투과성...15
• 나. Pz-peptide 및 Pz-product 투과성의 농도의존성...15
• 다. Pz-peptide 간극경로 투과에 미치는 이온수송 저해제의 영향...15
• 라. Atenolol 및 propranolol의 투과에 미치는 Pz-peptide의 영향...20
• 마. Mannitol 및 FITC-dextran의 투과에 미치는 Pz-peptide의 영향...20
• 바. Atenolol 및 propranolol의 안조직 이행에 미치는 Pz-peptide의 영향...23
• 사. Atenolol 및 propranolol의 전신 이행에 미치는 Pz-peptide의 영향...23
• 4. 고찰...29
• 가. 본 연구의 중요성...29
• 나. 수용성인 atenolol 및 지용성인 propranolol 에 대한 Pz-peptide의 영향...29
• 다. Atenolol 및 propranolol에 대한 영향의 in vitro-in vivo 상관성...30
• 라. Pz-peptide의 간극경로 수송 촉진기전...30
• 마. 장 래 전 망...30
• 5. 결 론...32
• 6. 인용문헌...33
• II. 논문발표 목록서...36
• III. 자체평가서...37