초록 ▼

Ⅰ.제 목 한약을 이용한 골다공증의 예방 및 치료제 개발연구 Ⅱ.연구개발의 목적 및 중요성 골다공증은 진행과정이 수십년이나 되는 만성질환으로 크게는 노화현상의 심화와 함께 폐경기 후에 많이 나타난다. 현재까지는 특별한 치료제가 없는 것으로 알려져 있다. 현재 많이 사용되는 치료제들은 여러가지 부작용이 많으므로 우리의 전통의약인 한방의 여러가지 단미제와 복합 처방을 이용하여 골다공증에 대한 효능검사를 하고 장기투여로 일어나는 여러가지 부작용을 가능한 한 줄일 수 있는 새로운 약으로 개발하여 국민건강에 이바지 하고자 한다. Ⅲ

Ⅰ.제 목 한약을 이용한 골다공증의 예방 및 치료제 개발연구 Ⅱ.연구개발의 목적 및 중요성 골다공증은 진행과정이 수십년이나 되는 만성질환으로 크게는 노화현상의 심화와 함께 폐경기 후에 많이 나타난다. 현재까지는 특별한 치료제가 없는 것으로 알려져 있다. 현재 많이 사용되는 치료제들은 여러가지 부작용이 많으므로 우리의 전통의약인 한방의 여러가지 단미제와 복합 처방을 이용하여 골다공증에 대한 효능검사를 하고 장기투여로 일어나는 여러가지 부작용을 가능한 한 줄일 수 있는 새로운 약으로 개발하여 국민건강에 이바지 하고자 한다. Ⅲ. 연구개발의 내용 및 범위 본 연구는 4개의 세부과제 즉 내분비연구, 한약연구, 골밀도연구 및 성장홀몬(GH)연구로 나누어져 있다. 1995년 연구과제의 목표는 각 세부과제팀에서 분석방법 및 검사방법의 확립에 초점을 두고 진행하였다. 먼저 내분비 연구팀에서 골다공증 유발 동물모형으로 Type Ⅰ 골다공증으로는 난소적출 쥐(SD)를 선택하였고 Type Ⅱ 골다공증으로는 노화촉진 생쥐(SAM P6)를 선택하였다. 난소제거 6주후 부터 황기 물추출물(faction E), 숙지황, 산수유, 우슬, 지골피를 30일간 투약한 후 혈액을 채취하여 CBC 검사(WBC, Lymphocytes, monocytes, granulocytes, RBC, HCB, HCT), 생화학적 임상검사(혈중 칼슘, alkaline phosphatase, creatinine, glucose, 무기성 phosphate, urea)를 행하고 동시에 total T3,74, Cortisol, Calcitriol, Ercalcitriol의 농도를 측정하였다. 이때 tibia골을 분리하여 골밀도 연구팀에서 골량의 측정으로 조직검사를 통해 골밀도 검사를 진행중에 있다. 동시에 SAM Rl(대조군)과 SAM P6의 생쥐에도 녹용, 황기물추출물(fraction E), 영지를 14일 또는 30일 동안 투약한 후 같은 검사 과정을 거친다. 한약연구팀에서는 한약의 혈중농도 검사를 위하여 HPLC 분석조건을 확립하고, 황기를 추출, 분리하여 약효검증을 하고있다. 동시에 GH 연구팀에서는 pituitary cell culture를 통하여 GH의 생성항진을 검토하고 GH의 농도를 RIA로 검색했다. Ⅳ. 연구개발결과 및 활용에 대한 건의 본 연구는 5개월 동안 진행된 것으로 내분비연구팀에서는 여러가지 분석 및 검색확립에 중점을 두고 행하였으나 홀몬정량범은 좀 더 시간을 두고 개선해야 될 것으로 보인다. 한약연구팀에서 추출분리한 황기 fraction A, B, C, D, E를 GH연구팀에서 검색한 결과 GH의 양은 fraction B, C, D에서 찾을 수 있었다. 동시에 녹용이 RBC등을 증가시키므로 보혈작용을 한다는 한의학적인 이론이 현대의학적으로도 의미가 있다는 것이 증명되었다. 이의 활용을 위하여 적정량과 투여기간등에 대한 연구가 더 계속되어야 될 것으로 믿는다. 황기의 물추출물(fraction E)는 보혈작용을 나타내는 것으로 나타났고 T4의 상승을 억제시키는 것으로 나타났으나 GH연구팀의 연구에서는 GH의 생성이 저조했다. 아마도 이 fraction은 다른 기전을 통하여 효능을 나타내는것 같다. 영지는 특히 T4의 상승을 억제하는것으로 나타났는데 이는 갑상선기능항진의 치료제로 개발가능성을 나타낸다. 앞으로 좀 더 많은 단미제를 연구한 뒤 복합처방으로 같은 연구를 하여 그 효능검색을 행하고 이들 단미제와 복합처방과의 관계를 잘 모색하여 골다공증에 새로운 예방 및 치료약으로 개발하게 하기를 바란다.

Abstract ▼

Osteoporosis has been known as a common chronic disease in silver generation with no remedy. In this year, we tried to set up the animal models for osteoporosis type I and ll and also to confirm the analytical methods for developing new preventive or thrapeutical durgs from traditional oriental med

Osteoporosis has been known as a common chronic disease in silver generation with no remedy. In this year, we tried to set up the animal models for osteoporosis type I and ll and also to confirm the analytical methods for developing new preventive or thrapeutical durgs from traditional oriental medicine. This project began to start four groups such as Endocrinological study, Oriental herbal drug study, Bone mineral density study, and Growth hormonal study. The Endocrinological study group set up animal models and checked CBC, many biological assays, and hormonal assays including Cortisol,T3, and T4. GH study used to screen GH effects by herbal medicine in pituitary cell culture. Cervi Cornu, 5g/kg, extract was administered daily for 14 days induced increases in concentrations red blood cells (RBC), hemoglobin (HGB), and hematocrits (HCT). Fraction E from Astragali Rakix, 5g/kg, extract increased the numbers of RBC and inhibited the elevation of T4 concentration during aging process. The 3 fractions of Astragali Radix extract stimulated the relative activity of Growth Hormone in the culture. Although the fraction E did not increase in GH secretion during cell culture and fraction B showed antiviral activity. Ganoderma, 5g/kg, extract did not show any specific changes in CBC and Biological Assays. However, it inhibited the elevation of T4 during aging, too. In future, more items of herbal medicine should be screened through these method and hopely developed as preventive and thrapeutical drugs for osteoporosis.

목차 Contents

• 서론...10
• 재료 및 방법...15
• 가)내분비 연구과제의 재료 및 방법...15
• (1)동물모형...15
• 1)Type 1 골다공증...15
• a.동물실험...15
• b.난소적출술...15
• 2)Type ll 골다공증...16
• a.동물실험...16
• (2)CBC (complete blood cells counts) 측정...17
• (3)여러가지 생화학 검사들...18
• 1)혈중 Alkaline Phosphatase의 정량분석...18
• 2)혈중 알부민의 정량분석...18
• 3)혈중 칼슘 정량분석...18
• 4)creatinine 농도의 분석...19
• 5)혈중 glucose 정량...19
• 6)무기성 phosphate 정량...19
• 7)혈중 urea (BUN)정량...20
• 8)총단백질의 정량...20
• (4)내분비 홀몬들의 정량검사...20
• 1)Total T4...20
• 2)total T3...21
• 3)Thyroid uptake...21
• 4)Cortisol 정량...22
• 5)beta-chorionic gonadotropin (beta-CG) 정량분석...22
• 6)HPLC에 의한 Ercalcitriol, Calcitriol 분석...23
• (5)통계처리...23
• 나)한약 연구과제의 재료 및 방법...23
• (1)HPLC 분석 방법...23
• 1)녹용(Cervi Cornu)...24
• 2)황기(Astragali Radix)...24
• 3)숙지황(Rehmannia Radix Preparat)...24
• 4)영지(Ganoderma)...24
• 5)우슬(Achyranthis Bidentatae Radix)...24
• 6)지골피(Paoraleae Fructus)...24
• 7)감초 (Glycyrrhizae Radix)...25
• (2)한약의 추출...25
• 1)황기(Astragali Radix)...25
• 다)골밀도 연구과제 재료 및 방법...27
• (1)골량의 측정...27
• 1)조직학적 검사...27
• 2)조직형태 계측학적 검사...27
• 라)GH 연구 재료 및 방법...28
• 1)Dwarf Rat Test...28
• 2)GH assay by RIA...28
• 3)Pituitary cell culture...28
• 4)IGF-1 assay...29
• 결과 및 고찰...29
• 가)내분비 연구 결과 및 고찰...29
• (1)동물모형...29
• 1)Type I 골다공증...29
• a.동물실험...29
• b.난소적출한 쥐...32
• (2)CBC 측정...32
• (3)생화학적 임상검사들...40
• (4)내분비 홀몬들의 정량검사...46
• 나)한약 연구과제의 결과 및 고찰...50
• 1)HPLC 분석결과...55
• 2)황기 추출 및 분리...55
• 다)골밀도 연구과제의 결과 및 고찰...55
• 라)GH 연구과제의 결과 및 고찰...64
• 마)총괄과제 결과 및 고찰...64
• 바)각 세부과제의 현재까지의 계획대비 추진현황(대비표)...66
• 참고문헌...67