초록 ▼

2001년도 일반사업 결과 보고서 요약 1. 중과제명 : 일반사업 2. 세부과제명 : 고효율검색기술 (HTS) 기반구축 사업 3. 연구책임자 : 공재양 4. 연구비 : 1,000,000,000 원 5. 연구기간 : 2001. 1.1 - 2001. 12. (총 6년) 6. 2001년 연구목표 고효율검색기술 (HTS) 및 관련 요소핵심기술을 단계적으로 확립하여 범국가적인 신물질개발연구의 공동연구 기반기능으로 활용, 창의적이고 경쟁력있는 신약개발에 기여 7. 2001년 연구수행 내용 요약 (1) HTS인프라 구축 및 기능 확립

2001년도 일반사업 결과 보고서 요약 1. 중과제명 : 일반사업 2. 세부과제명 : 고효율검색기술 (HTS) 기반구축 사업 3. 연구책임자 : 공재양 4. 연구비 : 1,000,000,000 원 5. 연구기간 : 2001. 1.1 - 2001. 12. (총 6년) 6. 2001년 연구목표 고효율검색기술 (HTS) 및 관련 요소핵심기술을 단계적으로 확립하여 범국가적인 신물질개발연구의 공동연구 기반기능으로 활용, 창의적이고 경쟁력있는 신약개발에 기여 7. 2001년 연구수행 내용 요약 (1) HTS인프라 구축 및 기능 확립 - HTS 시스템의 반자동화 (LTS에서 HTS 수준으로 발전) - 검색속도: 1일 >5,000화합물/작용점 처리 - 타겟당 처리 화합물 수: >25,000 - 작용점탐색, 시험재료확보, HTS검색법개발, 반응측정 기술 정립 - DMS 도입/활용에 의한 자료처리 및 자료의 DB화 기능 확보 (2) HTS 수행: 확립된 HTS 기능을 활용한 신약 선도물질 도출 - 화합물은행 25,000개 화합물에 대한 HTS 수행으로 선도물질 도출 (caspase-3, Cdc25B, DR3, BACE, COX-2 등) 8. 2001년 연구결과 활용 및 성과 (1) HTS 인프라 구축 성과 (2) 당해연도 구입장비 목록 (3) 활용 성과 ① 확립 HTS 기능을 활용한 신약 선도물질 도출연구 수행 - 화합물은행 25,000개 화합물의 약효평가 수행 (caspase-3, D3, Cdc25b, COX-II, BACE 외) - 알츠하이머치료제, 항암제 선도물질 도출 (Caspase-3, Cdc25B) ② HTS기능 활용, 타기관 (영진, LG 등)과 공동연구 수행 - Assay 방법 도입: BACE Inhibitor(LG): BACE Inhibitor Hit 도출 - 도출선도물질의 후속연구 수행: Caspase3 억제제 (영진,공동연구) 9. 연구수행자 현황 및 연락처 10. 기타 (1) 확립 인프라 및 기능의 활용 - 확립 고효율검색 기술/기능을 생물산업/정밀화학을 통한 신약개발연구의 공 동 기반기능으로 활용, 범국가적인 신물질개발연구의 효율적 지원 ·공동기반기능으로 활용; 시설, 장비 및 기능 활용 ·공동연구수행; 역할분담에 의한 신물질 개발연구 수행 ·기업체 및 연구기관에 기술이전 - 타 신물질개발연구사업 (또는 과제)와 연계하여 HTS 연구 수행 ·프론티어사업 (생체기능조절물질개발)의 '화합물 다양성 확보 및 초고속 약효검색' 과제의 주관기관으로 참여 (2) 기대효과 - 독창적인 신약개발 연구로의 전환 - 생물산업/정밀화학 관련 기술의 동반 발전 기대 - 막대한 경제적 가치 - 중복투자 방지

목차 Contents

• 제 1 장 서 론...11
• 제 1 절HTS 기술의 정의 및 내용...11
• 1. 작용점 탐색 및 실험재료확보 기술...11
• 2. 실험방법 개발 기술...11
• 3. 고효율대량검색 (HTS)...11
• 4. 인프라 구축...12
• 5. 데이터 및 정보관리 기술...12
• 제 2 절신물질개발연구에서의 HTS...13
• 제 3 절HTS 기술 확립의 필요성...14
• 1. 기술적 측면...14
• 2. 경제적 측면...14
• 제 2 장국내외 기술개발 현황...15
• 제 1 절세계적 기술동향 및 수준...15
• 제 2 절국내의 기술동향 및 수준...15
• 제 3 절현 기술상태의 취약성...16
• 제 4 절관련기술의 획득 방안...17
• 제 5 절향후 기술 수요 전망...17
• 제 3 장 연구개발수행내용 및 결과...19
• 제 1 절 HTS 인프라 구축...19
• 1. 배경...19
• 가. HTS 인프라...19
• 나. 시스템 자동화...20
• 다.Data Management...21
• 2. HTS 인프라구축 내용 및 결과...22
• 가. 반자동화 HTS 체계 구축...22
• 나. Assay Explorer 도입 활용...23
• 제 2 절 Caspase-3 효소의 분리 및 HTS 검색조건 확립...36
• 1. 배경...36
• 2. 재료 및 방법...38
• 가. Caspase-3 유전자의 분리...38
• 나. Caspase-3 단백질의 분리...39
• 다. Caspase-3 효소의 활성측정과 조건확립...40
• 3. 결과 및 고찰...40
• 가. Recombinant caspase-3단백질의 분리...40
• 나. Recombinant caspase-3 단백질의 효소 활성 측정 및 검색조건 확립...41
• 제 3 절 Dopamine 수용체 (DR3) 억제제 개발을 위한 HTS수행...46
• 1. 배경...46
• 2. 실험재료 및 방법...47
• 가. Recombinant human DR3 gene expression and purification...47
• 나. DR3 binding assay...48
• 3. 결과 및 고찰...49
• 제 4 절 BACE inhibitor 개발을 위항 HTS 수행...58
• 1. 배경...58
• 2. 실험재료 및 방법...59
• 가. Recombinant human BACE protein의 확보...59
• 나. 실험방법...59
• 3. 결과 및 고찰...60
• 제 5 절 COX-2 Inhibitor 개발을 위한 검색방법의 개발...64
• 1. 배경...64
• 2. 실험재료 및 방법...65
• 가. Recombinant COX-2 protein의 확보...65
• 나. 실험방법...66
• 3. 결과 및 고찰...66
• 제 6 절 Acetylcholinesterase(AChE) 저해 HTS 수행...68
• 1. 배경...68
• 2. 실험재료 및 방법...68
• 가. 실험약제...68
• 나. Acetylcholinesterase...69
• 다. 효소활성 검정...69
• 3. 결과 및 고찰...70
• 제 7 절 질병 저항성 유도 화합물 탐색을 위한 HTS 연구...77
• 1. 배경...77
• 2.실험재료 및 방법...78
• 가. 식물체...78
• 나. 식물 callus의 유기 및 현탁 배양...78
• 다. 화합물의 처리...78
• 라. GUS 발현 검정...79
• 3. 결과 및 고찰...79
• 가. 형질전환체 T2 식물체의 선발 및 T2 종자 확보...79
• 나. 형질전환체들의 callus 유기 및 GUS 발현 검정...81
• 제 4 장 연구개발목표 달성도 및 결과의 활용계획...83
• 제 1 절연구개발목표 달성도...83
• 1. 사업목표 대비 달성도 (당해년도)...83
• 2. 사업 최종연도의 목표달성 가능성...83
• 3. 사업 기대효과...84
• 제 2 절 연구개발결과의 활용계획...84
• 1. 활용 성과...84
• 가. 확립 HTS 기능을 활용한 신약 선도물질 도출연구 수행...84
• 나. HTS기능 활용, 타기관 (영진, LG 등)과 공동연구 수행...84
• 다. 타 신물질개발연구사업 (또는 과제)와 연계하여 HTS 연구 수행...84
• 2. 확립 인프라 및 기능의 활용...85
• 제 5 장 참고문헌...86