천연물 이용 B형 간염 치료제 개발을 위한 연구의 시작으로 간염 치료제 개발을 위한 간염치료용 생약제제의 탐색, 생체 추출물 탐색, 생약제제의 성분분석, 천연물의 간염 치료 효과분석, 천연물의 간염 치료제의 생화학적 성분분석 등의 기초 연구로서 성분분석과 재료의 수집 등 많은 준비작업이 소요되는 것과 동시에 간독성 발현기전은 매우 다양하고 그 예방 및 치료의 효능 검색 또한 매우 광범위 하기 때문에 다양한 모델 중에서 가장 치료효과가 높은 모델을 활용하여야 한다. 1) 간염 치료제 생약 제제의 수집과 추출 및 분석 시판되는
천연물 이용 B형 간염 치료제 개발을 위한 연구의 시작으로 간염 치료제 개발을 위한 간염치료용 생약제제의 탐색, 생체 추출물 탐색, 생약제제의 성분분석, 천연물의 간염 치료 효과분석, 천연물의 간염 치료제의 생화학적 성분분석 등의 기초 연구로서 성분분석과 재료의 수집 등 많은 준비작업이 소요되는 것과 동시에 간독성 발현기전은 매우 다양하고 그 예방 및 치료의 효능 검색 또한 매우 광범위 하기 때문에 다양한 모델 중에서 가장 치료효과가 높은 모델을 활용하여야 한다. 1) 간염 치료제 생약 제제의 수집과 추출 및 분석 시판되는 한약 중 간장과 관련이 있다고 조사되고 한국내의 한약재료상에서 비교적 쉽게 구입할 수 있는 생약제 151종을 각 시료당 500g에서 1kg을 대부분은 대구한약 재료상에서 주로구입하였으며 몇 종류는 서울과 부산등지에서 구입하였다. 몇가지 한의서와 식물성 약제를 다룬 서적에서 황달이나 간장질환에서 사용된다는 생약제를 중요시하였으나 Screening의 목적을 겸하여 151종 모두를 조사하였다. 2) HBS 항원 양성 혈청과 생약제 추출액과의 침강반응 5ml 용량의 시험관에 HBS 항원 양성 혈청을 0.5ml씩 분주하고 2% 생약 추출액을 동량씩 이위에 서서히 중충하여 침강환의 형성유무를 육안으로 확인하였다. 3) 생액제의 HBS 항원과의 결합능 검사 HBS 항원이 양성인 환자 혈청을 이용한 HBS 항원과 생약제 추출물과의 결합능력을 검사 하였으며, B형 간염 Vaccine내의 HBS 항원을 이용한 HBS 항원과의 검사, HBS 항원에 대한 Anti-HBS 항체와의 길항적 결합력을 조사하였다. 4) 생약제 추출물의 HBV DNA polymerase 활성도 억제능 측정 냉동건조한 생액 추출물을 증류수에 녹여 농도가 340.6, 68.1, 34.1, 6.8 ㎍/ml 되게 만든 후 HBV particle과 반응시켜 DNA polymerase 활성도의 억제능을 측정하였다. 5) 간독성 보호 효과검색 체중 160-180g의 SD자성 rat에 천연물치료제를 saline으로 희석하여 galactosamine 투여 24시간전, 3시간전 및 후에 투여하였다. galactosamine 투여 24시간 후에 serum을 얻어 AST, ALT kit를 이용하여 측정하였다. 과산화지질의 측정을 위해서는 TBA 법으로 측정하였다. 6) 천연물 간염 치료제의 면역학적 작용기전 고신의료원 소화기내에 입원한 환자중 혈청 HBsAg 및 HBeAg이 양성이고 간조직 생검상 만성활동성 간염으로 진단되었던 환자 38명을 대상으로 천연물 간염치료제 60ml를 매일 1회로 조식후 30분 후에 경구 복용해서 2개월간 투여하였다. 투여한 후 Aminotransferase의 변화 및 HBeAg음전에 대해 4개월까지 추적 조사하여 비교 관찰하였다. 7) 천연물 치료제로부터 항균 효과 및 항산화 효과 분석 천연물 간염 치료제에 함유되어 있는 물질 중에서 간염치료에 관련 되어질 수 있다고 보여지는 항산화 물질을 분리하는 데에 Gel Filtration, HPLC를 이용하여 분리한 물질을 6종류 시험균에서 측정하였다. 8) 간경변 발생기전 탐색 간경변의 Cellular 및 Molecular 현상 규명을 위하여 Lipocyte 에서 Collagen 합성의 정량분석과 간경변에 관련하는 1L-6의 활성도를 측정하였다.
Abstract▼
By using traditional methods, a therapeutic agent was produced using natural extracts to treat Hepatitis B. We must develop an investigative protocol, an extraction method, and an analysis method. By determining what the specific components are, and their importance, we can pinpoint their role in t
By using traditional methods, a therapeutic agent was produced using natural extracts to treat Hepatitis B. We must develop an investigative protocol, an extraction method, and an analysis method. By determining what the specific components are, and their importance, we can pinpoint their role in the treatment of Hepatitis B. 1) Effect of extracts of traditional korean herbal medicines on Hepatitis B virus. The 151 traditional herbs were extracted, filtered and lyophilized. Using 151 herbal extracts we tested binding capability to the HBeAg, inhibition of HBV DNA polymerase, release of tumor necrosis factor (TNF), and protection against galactosamine induced liver damage. 2) Clinical examination of Natural produsts The 38 Patients suffering frem Hepatitis disease were slelected for examination. Their serum was found to be HBsAg and HBeAg positive. Their chronic hepatitis was diagnosed to change of aminotransferase and HBeAg sero-negative conversion. 3) Hepatoprotective effects of natural product. The diluted therapeutic agent with saline was administered to SD rat (160~180g) body weight), 3 or 24hr before administration, galactosamine was injected into the rat, after 24hr of galactosamine injection, AST and ALT ans determined by this kit from the serum. The lipid peroxidation of liver tissue was represented by the amount of produced MDA using TBA method. 4) Biochemical effects of antibiotic and antioxidant. Compounds showing an antibiotic and an antioxidant were detected and isolated by methods including gel filtration, TLC, HPLC. 5) The pathogenesis of liver cirrhosis As an in vivo experiment, CCl₄treatment induced liver disease in rats, which was monitored in pathological and biochemical aspects. The collagen production by lipocytes was monitored by indirect ELISA.
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