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재조합 단백질의 생산 및 분리정제 기술 개발;항혈전성 재조합 hirudin의 생산 및 분리정제 기술개발(Ⅰ)
Process Development for Production and Purification of Recombinant Proteins;Process Development for Production and Purification of Anticoagulant Recombinant Hirudin(Ⅰ) 원문보기

보고서 정보
주관연구기관 한국생명공학연구원
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology
연구책임자 이상기
참여연구자 최의성 , 손정훈 , M.Y.Beburov
발행국가대한민국
언어 한국어
발행년월1993-08
주관부처 과학기술부
사업 관리 기관 한국생명공학연구원
Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology
등록번호 TRKO200200052576
DB 구축일자 2013-04-18

초록 ▼

본 연구에서는 항혈전 단백제제의 유전공학적 기법을 이용한 대량 생산을 위한 기반 조성에 목적을 두고 1차년도 연구에서는 강력한 항혈전 단백질인 hirudin의 유전자를 효모 유전자의 codon usage에 따라 화학합성한 후 효모 분비시그널을 가지는 벡터에 클로닝하고 효모숙주세포로서 수종의 Saccharomyces cerevisiae와 Hansenula polymorpha 균주를 이용하여 hirudin 유전자의 발현율 및 분비효율을 조사하였으며 재조합 hirudin 발효생산의 최적화연구로서 최적 생산배지조성을 조사하고 유가배양등을

목차 Contents

  • 제1장 서 론...11
  • 제2장 실험방법...14
  • 제1절 효모를 이용한 hirudin 유전자의 발현 및 분비...14
  • 가. 사용 균주 및 plasmid...14
  • 나. 배지 및 발현 유도...14
  • 다. 제한 효소 및 시약...14
  • 라. DNA 재조합...15
  • 마. Polymerase chain reactions(PCR)...15
  • 바. 화학적 DNA 합성 및 분리 정제...15
  • 사. DNA sequencing...16
  • 아. β-galactosidase의 활성 측정...16
  • 자. 효모의 전체 단백질 분리 및 분리 단백질의 확인...16
  • 차. Ultrafiltration...16
  • 카. HPLC...16
  • 타. 아미노산 조성분석 및 아미노 말단 서열 분석...16
  • 제3장 연구결과 및 고찰...17
  • 제1절 효모를 이용한 hirudin의 발현 및 분비...17
  • 가. 발현 promoter의 선별...17
  • 나. 발현 및 분비 vector, TEGα-1의 제조...17
  • 다. 재조합 hirudin유전자의 발현 및 분비...23
  • 라. 재조합 hirudin의 분리 정제 및 특성...26
  • 제4장 결 론...44
  • 제5장 참고문헌...45
  • 제6장 위탁과제...49
  • Ⅰ. 재조합 hirudin 생산공정의 최적화...51
  • Ⅱ. 유전자 재조합 히루딘의 분리정제 공정개발...112
  • Ⅲ. 유전자 재조합 히루딘의 활성시험방법의 개발과 약리 특징에 관한 연구...160
  • 제7장 국제협력과제...184
  • 제1절 국제협력 사업의 필요성...190
  • 제2절 추진방법...191
  • 제3절 성과...192
  • 제4절 결론...228
  • 제5절 수집된 정보 및 문헌...230

연구자의 다른 보고서 :

참고문헌 (25)

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