초록

목표는 암전이 억제를 위해 임상적으로 활용되고 있는 부정방암탕의 항암효과, 암전이 억제 효과, 화학요법의 부작용 감소 효과 등을 세포생물학, 분자생물학, 독성연구를 통해 평가하고 그 작용기전을 규명하는 것이다.

Abstract

Bujungbangamtang, currently used in cancer treatment, is selected for in vitro anti-cancer and anti-metastasis research and decrease in side-effects due to chemotherapy and explained in terms of cellular biology, molecular biology and toxicity test.

목차 Contents

• 표지...1
• 제출문...4
• 세목차례...7
• 제 1 장 서론...9
• 제 2 장 국내외 기술개발 현황...11
• 제 3 장 연구개발 수행내용 및 결과...13
• 1.한의학적 이론 배경...13
• 2.실험적 접근방법...14
• 가.연구개발 목표...15
• (1)제1세부과제: 부정방암탕의 여러 암세포에서의 항암 작용...15
• (가) 1차 연도 연구개발...15
• (나) 2차 연도 연구개발...16
• (2)제2세부과제: 부정방암탕의 여러 암세포에서의 암전이 억제작용...16
• (가) 1차 연도 연구...16
• (나) 2차 연도...16
• (3)제3세부과제: 부정방암탕의 신장독성 경감작용의 규명...16
• 3.제 1 세부 과제...16
• 가. 연구수행 방법...17
• (1)부정방암탕의 추출...17
• (2)세포배양...17
• (3)H3-Thymidine incorporation assay...17
• (4)Western Blotting...18
• (5) DNA fragmentation...18
• (6) Annexin V staining을 이용한 apoptotic cell count...18
• (7) Bcl-xl, cpp32(caspase-3)의 RT-PCR...19
• (8) CAM assay...20
• 나. 연구결과...20
• (1)부정방암탕의 추출...20
• (2)Cell viability test...20
• (3)H3-Thymidine incorporation assay...20
• (4)Western Blotting...21
• (5)Annexin V staining을 이용한 apoptotic cell count...21
• (6)DNA fragmentation...22
• (7)Bcl-xl, cpp32(caspase-3)의 RT-PCR...22
• (8) CAM assay...22
• 4.제 2 세부과제...30
• 가. 연구수행방법...30
• (1)세포배양...30
• (2)Cell viability assay...30
• (3)MTT (HepG2)...30
• (4) Thymidine incorporation assay...30
• (5)Zymogram analysis...30
• (6)Western Blotting...31
• (7)Protein dot Blotting...32
• (8)Invasion assay...32
• (9)Competent bacteria...32
• (10)Transformation...33
• (11)Agar plate...33
• (12)plasmid isolation...33
• (13)Transfection...33
• (14)pCAT3 promoter plasmid 분리...34
• (15)DNA Ligation...34
• (16)Luciferase assay...35
• (17)CAT assay...35
• 나. 연구 결과...35
• (1)Zymogram analysis...35
• (2)in vitro invasion assay...36
• (3)부정방암탕의 c-fos, c-jun의 발현량에 미치는 영향...36
• (4)pCAT3 promoter plasmid 분리...36
• (5)부정방암탕이 암전이 억제 유전자 Nm23 미치는 영향...37
• (6) 부정방암탕이 SK-Hep-1의 viability에 미치는 영향...37
• (7) 부정방암탕이 HepG2 암 세포의 MTT redution에 미치는 영향...38
• (8) 부정방암탕이 HT1080세포의 morphology에 미치는 영향...38
• (9) SK-Hep-1 세포에서 부정방암탕이 gelatinase activity에 미치는 영향...38
• (10) 유방암세포주 MCF-7에서의 부정방암탕 효과...38
• (11) Erk, JNK, nm23에 미치는 영향...39
• (12) HT1080세포에서의 MMP protein expression에 미치는 영향...39
• (13) 부정방암탕의TIMP에 미치는 영향...39
• (14) SK-Hep-1세포의 invasion에 미치는 영향...39
• (15) AP-l activity에 미치는 영향...39
• (16) MEKI signal에 미치는 영향...40
• (17) Ras signal에 미치는 영향...40
• (18) Src signal에 미치는 영향...40
• (19) MEK3 signal에 미치는 효과...40
• (20) JNK에 미치는 영향...41
• (21) NFkB에 미치는 영향...41
• (22) SRE activity에 미치는 영향...41
• (23) TRE activity에 미치는 영향...41
• 5.제 3 세부과제...62
• 가. 연구？？법...62
• (1)Cisplatin의 면역 세포에 대한 자극 특이성...62
• (가)Neutrophil 및 alveolar macrophage분리...62
• (나)Cisplatin의 면역세포자극에의한 superoxide anion생성량비교...62
• (다)ㆍOH radical 측정법...62
• (라)H2O2 radical 측정법...63
• (2)In vivo 에서의 Cisplatin에 의한 신장독성 억제 작용 검색...63
• (가)신장독성 지표 측정 (BUN, creatinine)...63
• (나)간독성 지표 측정(sGOT, sGPT)...64
• (다)항암작용 영향 여부 측정...64
• 나. 연구수행 결과...64
• (1)Cisplatin 에 의한 신장독성 검색 시스템 의 확립...64
• (2)Cisplatin 에 의한 면역세포 자극 억제 효과...64
• (3)IN vivo cisplatin 유도 신장 독성 억제 효과...65
• (4)결과 종합...67
• 제 4 장 연구 개발 목표달성도 및 대외 기여도...68
• 제 5 장 연구 개발 결과의 활용성 및 계획...69
• 제 6 장 참고문헌...70
• 최종보고서 요약(초록)...71